儿童活体肝移植术后感染常见致病菌及其耐药性分析

目的分析儿童活体肝移植术后常见致病菌的分布特点及其对常用抗菌药物的耐药性情况,为合理使用抗生素提供参考。方法回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院自2006年6月至2009年12月术后监护的42例儿童活体肝移植患儿送检共152份标本进行菌株鉴定及药敏试验。结果经培养共分离出66株致病菌,阳性率为43.4%,以呼吸道来源为主,占71.2%。66株致病菌中革兰阴性菌（G^-）63.6%,革兰阳性菌（G^＋）27.3%,真菌9.1%。常见G^-菌为铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌肺炎亚种。常见G^＋菌为金黄葡萄球菌和肺炎链球菌。真菌主要为白色假丝酵母菌。药敏结果显示细菌耐药性明显增强,G^-菌中阴沟肠杆菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌肺炎亚种对美洛培南、亚胺培南100%敏感,对环丙沙星、左旋氧氟沙星、阿米卡星和氯霉素敏感在85.7%以上;超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株检出率为66.7%100%。铜绿假单胞菌仅对环丙沙星、左旋氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星和多粘菌素敏高度感度,敏感度在91.6%以上。G^＋菌中金黄色葡萄菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、呋喃妥因、阿米卡星和环丙沙星100%敏感,β-内酰胺酶检出率为100%。肺炎链球菌对万古霉素、利奈唑胺、头孢西丁、美洛培南、左旋氧氟沙星和头孢吡肟均有83.3%以上的敏感性,对于阿莫西林仍有66.7%的敏感性,但对于大环内酯类100%耐药。白色假丝酵母菌对两性霉素B 100%敏感。结论儿童活体肝移植术后常见致病菌以G^-菌为主,多为多重耐药菌株,含有β-内酰胺酶抑制剂及碳青霉烯类抗生素是治疗该类细菌的有效抗生素。万古霉素是G^＋菌感染的有效抗生素。两性霉素B是真菌感染的有效药物。为避免耐药率上升,临床应合理使用抗生素。     

少量贴壁培养细胞电镜原位包埋方法的探讨

该文探讨了对少量贴壁培养细胞较易操作且能保存较好超微结构的透射电镜样品包埋的方法。将Hela细胞分为三组:(1)不使用环氧丙烷,将树脂胶囊直接倒扣包埋于塑料培养皿;(2)不使用环氧丙烷,将细胞爬片倒扣包埋于胶囊;(3)使用环氧丙烷并将细胞爬片倒扣包埋于胶囊。将三组带有细胞的树脂胶囊进行超薄切片,电镜观察后发现,第一种方法包埋简便,超薄切片上无细胞缺失孔洞,且超微结构保存较好。     

微波修复在细胞凋亡原位检测中的应用

末端转移酶 (Td T)介导的 X-d UTP切口末端标记法(Td T-mediated X-d UTP nick end labeling TUNEL)是目前原位检测细胞凋亡最敏感、快速、特异的新方法 ,已广泛用于医学生物学领域 ,尤其对肿瘤的基础与临床研究。它的标记靶是凋亡细胞 DNA在核小体处断裂形成的 3′-OH,通过TDT将标记的脱氧核苷酸结合到 3′-OH末端上 ,通常所用核苷酸为 d UTP,再进行免疫组织化学方法观察。TUNEL法检测的成功与否和组织的修复有着十分密切的关系 ,一般石蜡包埋切片作 TUNEL检测 ,其修复的方法均采用蛋白酶 K处理。在实践操作中我们发现这…     

新型共聚物淀粉接技聚乳酸的制备及其表征

采用原位熔融共聚法,以淀粉和乳酸为原料,制备改性淀粉聚乳酸接枝共聚物,对共聚反应机理进行初步探讨.结果表明,淀粉经PEG-400和马来酸酐增塑改性处理反应活性增强,与乳酸反应生成的淀粉聚乳酸接枝共聚物分子量Mw为6.921×10~4,Mn为4.789×10~4,分子量分布Mw/Mn为1.445.共聚物在PBS缓冲溶液中进行降解测试,结果为6天后质量损失一半.     

环境因子对厌氧微生物脱卤的影响研究进展

有机卤代物在工农业生产中的广泛应用及不合理处置与排放导致其成为地下环境中普遍存在的一类污染物,严重威胁地下生态系统功能、饮用水安全和人类健康。有机卤呼吸细菌在有机卤污染场地的原位生物修复中起到了至关重要的作用。本文简要概述了影响和制约有机卤呼吸微生物生长代谢及脱卤活性的一些关键环境因子,如pH、温度、盐度、电子供受体和氧气等,并且对有机卤呼吸细菌未来的研究方向提出展望,以期为污染场地原位生物修复工程的有效实施提供理论与技术参考。     

黄鳝二价体上随机引物原位DNA合成的探讨

采用随机引物,在黄鳝二价体上建立了氚标记引物原位DNA合成技术,并详细探索了该技术的实验条件。其结果显示黄鳝二价体上DNA延伸效果十分明显,银颗粒基本上是非随机性的相间排列,而且主要特征是基本稳定的,据此可以进行染色体识别。此外,还讨论了建立该技术的重要意义。 Abstract:We have developed a technique of random-primed tritium labeled DNA extension on the pachytene bivalents of rice-field eels.The bivalents were not homogeneously labeled with this technique and the extension signals were very apparent and relatively stable,and these can be applied to identify the individual bivalent.The significance to develop this technique has also been discussed in detail.     

黄鳝二价染色体上地高辛配基标记随机引物原位DNA合成的研究

在黄鳝二价染色体上, 运用地高辛配基标记的随机引物原位DNA合成技术诱导出了明暗相间、基本稳定且类似于R带的带状结构。本文对该结果进行了较详细的分析和讨论。 Abstract:The dark bands alternating with light bands,relatively stable and R-band-like structure was showed on the pachytene bivalents of Rics-field eel(Monopterus albus Zuiew)by using the random-primed in situ digoxigenin-labelled DNA synthesis technique,and the results were analysed and discussed in detail.     

乙型肝炎人免疫球蛋白预防肝移植术后HBV再感染研究进展

乙型肝炎人免疫球蛋白(HBIG)是含有高效价乙型肝炎表面抗体(HBs Ab)的多克隆球蛋白制剂,其含量占蛋白质总量的96%以上。静脉输注后即刻达到高峰,能与乙肝病毒颗粒外壳上的乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)特异性结合发生抗原抗体反应,从而使病毒失去对细胞的侵袭能力,它与拉米夫定联合应用是公认的预防肝移植术后HBV再感染的有效的常规治疗方法。但是,一旦停止HBIG用药,由于拉米夫定存在耐药性问题,HBV再感染率会升高。为此,国内外在HBIG预防肝移植术后HBV再感染长期效果方面做了大量研究工作,并取得了一些进展,现作一简要综述。     

肝病患者肝细胞内HBV DNA原位杂交研究——形态、分布及意义

应用生物素标记HBV DNA(乙肝病毒脱氧核糖核酸)作探针,对129例肝病患者肝组织作原位杂交研究。发现HBV DNA主要存在肝细胞浆内,可分为胞浆致密型、疏松型和包涵体型。HBV DNA阳性肝细胞在肝实质中分为三种型:小叶型、局灶型与散在点状分布。HBV DNA在慢性活动型肝炎中检出率最高(81％),显著高于肝硬化,慢性小叶型肝炎、急性肝炎及原发性肝癌组。乙肝复制指标阳性患者肝细胞内HBV DNA检出率明显高于非复制组;并观察到HBV DNA阳性肝细胞与肝细胞坏死灶关系密切,多数紧紧毗邻肝细胞坏死灶/或和位于坏死灶中间,尤以局灶型分布的HBV DNA阳性肝细胞为显著。     

原位染色检测慢病毒载体转录通读方法的建立

慢病毒载体作为基因导入系统已被多次应用于基因治疗试验当中,近年来受到了广泛关注。转录通读是慢病毒载体应用过程中存在的潜在不安全因素之一。为了进一步完善慢病毒载体转录通读的检测方法,使检测结果更加直观准确,在已建立的在转录水平检测其转录通读的基础上,进一步模拟病毒载体整合入基因组的状态,于原病毒载体3'-LTR后插入经密码子优化的Lac Z报告基因。经转染细胞后进行原位染色,发生通读现象的细胞会被染成蓝色,从而在蛋白质水平直观地体现慢病毒载体的通读情况,说明所建立的方法是准确可行的。所得结论与q RTPCR方法在转录水平检测的结果是平行相一致。原位染色检测法的建立为慢病毒载体转录通读的检测、提高慢病毒载体生物安全性的研究提供了技术支持。