人类中期染色体引物原位延伸标记的研究

染色体上引物原位延伸标记在研究染色体结构和基因定位等方面具有重要意义,分别应用随机引物和ＳＯＸ基因兼并引物人类染色体上进行了原位延伸标记,结果表明,随机引物伸在染色体上呈现明暗相间的带纹样特征。ＳＯＸ基因兼并引物延伸发现了更多的ＳＯＸ基因位座,并进一步证实该家族基因在基因组中是散存在的。     

土壤食细菌线虫的原位富集培养方法

采用两种孔径的尼龙网袋（1mm和5μm），将盆钵供试土壤分成内外两层，内层土壤混合猪粪或稻草，并以不添加猪粪和稻草的供试土壤作为空白；外层直接接入供试土壤，进行培养，以获取土著食细菌线虫大量富集的试验土壤。结果表明：添加基质（猪粪和稻草）显著地促进了土壤线虫的繁殖，大量繁殖的线虫通过1mm网袋迁移至外层未加基质的土壤，而采用5μm网袋则限制了线虫向外层土壤的迁移。添加猪粪的1mm网袋处理经过28d培养后，外层土壤线虫数是空白处理的9．1倍；添加稻草的1mm网袋处理经过35d培养后，外层土壤线虫数是空白处理的5．9倍。添加两种基质的5μm网袋处理，外层土壤线虫数和空白处理差异不大。添加基质主要是促进了食细菌线虫的繁殖，在培养结束时，添加猪粪的1mm网袋处理的食细菌线虫比例达到98．2％，添加稻草的1mm网袋处理的食细菌线虫比例达到90．5％，两个处理食细菌线虫的总数分别是空白处理的14．8倍和8．9倍，并且主要是Protorhabditis sp．线虫的增加。     

正常人与A-T患者培养细胞对致癌物与诱变剂反应的初步观察

采用原位缺口翻译法（In situ nick translation method),比较T正常人与毛细血管扩张性共济失调（ataxia telangiectasia, A-T)患者培养细胞对强致癌物及弱诱变剂的反应。发现两种细胞对甲基硝基亚硝基孤(MNNG）的反应相同,但在低浓度的没食子酸(gallic acid, GA）作用下,A-T细胞显示出明显的DNA损伤,而正常细胞未见改变,对此意义以及该技术方法进行了简要讨论。     

基因靶位操作的技术与应用

ＴｈｅＡｐｐｒｏａｃｈａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＧｅｎｅＴａｒｇｅｔｉｎｇＷＡＮＧＹａ－ＰｉｎｇＺＨＵＺｕｏ－Ｙａｎ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＨｙｄｒｏｂｉｏｌｏｇｙ,ＴｈｅＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ,Ｗｕｈａｎ４３００７２...     

秋季太湖梅梁湾蓝藻的原位增殖与垂直分布

通过细胞分裂频率法对秋季太湖梅梁湾蓝藻(微囊藻)原位生长速率进行了测定, 发现微囊藻白天的细胞分裂频率高于夜间, 水柱表层微囊藻的原位生长速率最高; 湖体微囊藻的原位生长速率为0.09-0.16 d^-1, 围隔微囊藻的原位生长速率为0.20-0.35 d^-1; 蓝藻的原位生长速率受光照、温度、营养盐与生物量等因素的影响。蓝藻生物量、群体粒径组成、捕光色素及其组成等在水柱中均有垂直分布差异, 依赖于混合强度、浮力调节与群体粒径的垂直迁移或是蓝藻为了获取更为合适的光照条件。     

Takayama pulchellum原位增长率测定的研究

现今用于测定有害藻华生物原位增长率的方法很难在现场进行有效地应用,因此我们尝试采用基于rRNA、叶绿素和总蛋白质浓度的定量测定方法来估算其细胞增长率.本研究重点对Takayama pulchellum细胞株(TPXM)的rRNA含量和特定生长率的关系进行了探索.用荧光标记的肽核酸探针结合全细胞杂交方法,结合流式细胞仪和专业图像分析软件对T.pulchellum单细胞水平的rRNA进行了定量检测.结果表明不同生长阶段的T.pulchellum单细胞rRNA水平与其相应的细胞特定生长率有较好的相关关系(R2=0.7293,p＜0.01,n=14),单细胞蛋白质含量、rRNA水平与同步后的细胞周期变化情况也有较好的相关关系(R2＝0.6984,p＜0.01,n=14).上述结果提示单细胞rRNA含量可作为指示细胞周期变化和细胞特定生长率的较好指标.     

利用水生植物原位修复污染水体

在实验围隔系统中,夏季利用凤眼莲、冬季利用耐寒型沉水植物伊乐藻等恢复水生生态系统,研究水生植物对水体氮、磷营养盐、透明度等理化性质的影响.结果表明：水生植物处理围区营养盐水平均显著低于围区对照和大湖水体.最初15 d,凤眼莲生长速度快,覆盖面积从100 m²增加到470 m²;44 d后,覆盖面积达到65％,处理围区的水质最佳,总氮(TN)、铵态氮(NH₄⁺ -N)、亚硝态氮(NO₂^- -N)、高锰酸钾盐指数(COD_Mn)和叶绿素a浓度最低,透明度达到1.7～1.8 m(水底).10月份后,处理围区水体总磷(TP)维持在0.1 mg·L^-1左右.处理围区透明度提高后,伊乐藻逐渐成为优势种(覆盖面积达到总水域的1/3),在净化水质、维持水质理化性质稳定和提高透明度方面作用显著.表明水生植被恢复可以有效降低水体营养盐,控制浮游植物增长,是改善富营养湖泊水质的重要措施.     

MAR-FISH技术及其在环境微生物群落与功能研究中的应用

对复杂环境中微生物群落结构和功能的研究是微生物生态学的重要任务。尽管现代分子生物学技术已经成功地用于解析环境中微生物的群落结构, 但是这些方法并不能提供微生物的原位生理学信息。而一种新的方法, 微观放射自显影和荧光原位杂交集成技术(MAR-FISH)则能够同时在单细胞水平上, 检测复杂环境中微生物的系统发育信息及其生理特性。本文总结了MAR-FISH方法的原理, 实验步骤及其在环境微生物群落与功能研究中的应用。     

Snail基因及其蛋白、E-cadherin蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的观察Snail mRNA及其蛋白、E-cadherin蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系,并探讨它们在胃癌发生、发展中的作用及其临床应用价值。方法收集96例手术切除胃癌标本,同时取80例癌旁组织作为对照。应用免疫组织化学S-P法检测胃癌组织、癌旁组织中snail蛋白、E-cadherin蛋白的表达;运用原位分子杂交技术检测胃癌组织、癌旁组织中Snail mRNA的表达。结果（1）Snail蛋白在胃癌组织阳性率（83.3%）显著高于癌旁组织（41.25%）（P〈0.05）;高、中分化组Snail蛋白阳性表达率显著低于低分化组（P〈0.05）;Snail蛋白的阳性表达率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性（P〈0.05）;Snail蛋白的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关（P〈0.05）,与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位及临床分期无关（P〉0.05）;（2）胃癌组织中snail mR-NA的阳性率（76%）显著高于癌旁组织（30%）（P〈0.05）;高、中分化组Snail mRNA阳性表达率显著低于低分化组（P〈0.05）;Snail mRNA的阳性表达率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性（P〈0.05）;Snail mRNA的表达与浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）,与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、临床分期及远处转移无关（P〉0.05）;（3）E-cadherin蛋白在胃癌组织阳性率（37.5%）显著低于癌旁组织（100%）（P〈0.05）;高、中分化组E-cadherin蛋白阳性率显著高于低分化组（P〈0.05）;E-cadherin蛋白阳性率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性（P〈0.05）;E-cadherin蛋白的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、临床分期及远处转移有关（P〈0.05）,与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位均无关（P〉0.05）;（4）胃癌组织中snail mRNA和snail蛋白的表达呈正相关（r=0.594,P〈0.05）;Snail蛋白和E-cadherin蛋白的表达呈负相关（r=-0.234,P〈0.05）。结论（1）E-cadher-in蛋白低表达与Snail蛋白高表达可能是胃黏膜恶性转变以及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志;联合检测E-cadherin蛋白与Snail蛋白对预测胃癌浸润转移有重要意义。（2）Snail蛋白可能在转录水平上调控E-cadherin蛋白的表达。     

肝移植术后复发转移患者化疗的护理体会

目的探讨原发性肝癌肝移植术后肿瘤复发转移患者对化疗的耐受性,护理方法是否得当。方法对肝移植术后肿瘤复发转移患者采用吉西他滨＋表阿霉素（GE）方案化疗,21d为1个周期。从心理疏导、服用免疫抑制剂的依从性、减轻药物毒性反应方面进行护理干预。结果13例病人完成化疗共53个周期,其中GE方案化疗19．5周期,无严重并发症发生。结论肝移植术后肿瘤复发转移的患者对化疗耐受性较好。