肝移植急性排斥反应时外周血Th17细胞的特征及意义

目的:观测肝移植患者术前及术后急性排斥时外周血中Th17细胞频率变化特征,探讨其与肝移植术后急性排斥发生的关系。方法:对18例于我院进行肝移植手术的患者进行随访研究,应用流式细胞仪检测各随访点外周血中Th17细胞频率。随访期间发生急性排斥反应的患者为急排组(n=7,男女比为5/2),未发生急性排斥反应者为非急排组(n=11,男女比为8/3),比较两组患者肝移植前后外周血中Th17细胞频率的变化规律。结果:急排组与非急排组患者肝移植术前外周血中Th17细胞频率无统计学差异(P=0.672),而急排组患者发生急性排斥反应时与非急排组患者相比Th17细胞频率明显升高(P=0.002)。在随访研究中,急排组患者在发生急性排斥反应时外周血中Th17细胞频率较未发生急性排斥反应时增高,且Th17细胞频率与ALT变化趋势一致,呈明显正性相关。而非急排组患者术后随访期间外周血中Th17细胞频率无统计学差异。结论:肝移植患者术后发生急性排斥反应时外周血中Th17细胞频率明显升高,变化趋势与ALT水平一致,呈正性相关,可能成为诊断急性排斥反应的潜在指标。     

荒漠草原灌丛引入过程中土壤氮矿化的季节动态及其影响因子

选取封育草地、放牧草地、不同年限(引入柠条3、12、22年)/密度(间距2、6、40 m)的灌丛地为对象,研究荒漠草原-退化-灌丛引入过程中生长季(4—10月)土壤氮矿化的季节动态及其影响因子。结果表明：0～10 cm表层土壤水分具有明显的季节特征,0～200 cm剖面土壤水分随灌丛年限和密度增加而加剧消耗;与放牧草地和封育草地相比,灌丛对土壤碳氮磷养分的促进作用随灌丛年限和密度的增加呈现先强后弱趋势;生长季动态和草地变化对土壤氮矿化过程产生显著影响,土壤NO₃^-、微生物生物量碳和氮在生长季中期(6—8月)显著升高,其中NO₃^-占总无机氮的比值由封育草地30.5%增至灌丛地69.5%。NH₄⁺受生长季动态影响大于草地变化,其含量在生长季后期(10月)升高。在草原-退化-灌丛引入过程中,灌丛年限和密度的增加显著增大荒漠草原土壤硝化和铵化作用的生长季动态差异,而对微生物生物量碳和氮的影响不显著;土壤NH₄⁺和NO     

原位胶原酶循环灌注法分离猪肝细胞

本文建立了原位胶原酶循环灌注分离猪肝细胞方法并与离体两步胶原酶灌注法进行了比较。猪门静脉和下腔静脉分剐插管,先用D-Hanks液灌注,再采用自制的循环灌流装置进行胶原酶循环原位灌注分离猪肝细胞,分离后的肝细胞以5×105/ml培养,观察分离和培养7d的肝细胞产量、活率、蛋白质合成功能、葡萄糖合成功能和LDH含量。同时测定离体组的上述指标。研究结果表明采用原位胶原酶循环灌注法每克肝组织分离获得的肝细胞总量为5.1×107,肝细胞活率98.6％,培养7d肝细胞活率89.5％。肝细胞的蛋白质合成功能在培养7d中保持稳定;葡萄糖合成功能从1d时1.05±0.15nmol/cell下降到3d时0.74±0.09nmol/cell;LDH含量在3d较高。原位胶原酶循环灌注法分离的猪肝细胞总量、活率高于离体法;蛋白质合成功能和葡萄糖合成功能强于离体法。因此,原位胶原酶循环灌注分离猪肝细胞方法可获得大量高活率和良好功能的猪肝细胞。     

养殖水质原位自净微生物诱导及复合应用

本文采用原位诱导有益微生物（污水菌、芽胞杆菌、硝化菌和副球菌等）,复合添加外源的有益微生物（金藻、栅藻、硅藻、芽胞杆菌、光合菌、酵母菌和EM（effective microorganisms）菌等）,在养殖水体中建立稳定的有益微生物复合菌群,使水体中亚硝酸氮和氨氮清除率分别可达100%和99%。并进一步利用这些菌群在小红鲫鱼（red crucian carp）和南美白对虾（Penaeus vannamei）养殖中进行原位水质净化应用。在小红鲫鱼养殖水质原位自净中,无需清污和换水,就可长期维持水环境完全稳定,连续养殖50 d以上,水中未检测出亚硝酸氮,氨氮低于0.2 mg/L,稳定在优质安全的养殖环境;在南美白对虾养殖中,投菌后初期水体亚硝酸氮较快下降,第10 d后氨氮浓度也降至养殖安全范围内,形成稳定安全的养殖水质环境。实验效果显著,表明微生物菌群原位水质自净技术具有推广应用前景。     

固定化微生物技术修复多氯联苯污染土壤的应用前景

多氯联苯(PCBs)是一类持久性有机污染物,生物危害性极大,流入环境后易被土壤颗粒吸附而长期蓄积在土壤中.运用生物技术修复PCBs污染土壤一直是国内外学者研究的热点.其中固定化微生物技术因其独特的优势而具备了较高的开发与应用价值.本文简要评述了当前PCBs污染土壤的主要修复技术,并通过分析固定化微生物技术的特点及其在有机污染土壤修复方面的研究进展,论述了运用该技术修复PCBs污染土壤的可行性以及所面临的关键科学问题.     

关中地区小麦/玉米轮作农田硝态氮淋溶特点

通过田间原位淋溶装置研究了不同施氮量和秸秆覆盖对关中地区小麦/玉米轮作农田90cm深处硝态氮(NO3--N)淋溶量、0～1m土层硝态氮累积及作物产量和氮平衡的影响.试验设不施氮(N1,0kg·hm-2·a-1)、常规施氮(N2,471kg·hm-2·a-1)、推荐施氮(N3,330kg·hm-2·a-1)、减量施氮(N4,165kg·hm-2·a-1)、增量施氮(N5,495kg·hm-2·a-1)和推荐施氮+秸秆覆盖(N3+S)6个不同施肥处理.结果表明:NO3--N淋溶量随施氮量的增加而增大,氮肥的过量施用及秸秆覆盖易造成NO3--N淋溶.N3+S处理90cm处年NO3--N流失量最大,为22.32kg·hm-2,施肥造成的氮流失量为16.44kg·hm-2,比相同施氮量不覆盖处理(N3)高158.9%.NO3--N主要累积在20～60cm土层,年施氮量330kg·hm-2(N3)时,秸秆覆盖与否不影响NO3--N的剖面分布.各施肥处理对作物产量没有显著影响,但减量施氮处理(N4)有减少作物产量的趋势.在本试验条件下,推荐施肥量(小麦施氮150kg·hm-2,玉米施氮180kg·hm-2)在保证作物产量的同时,可减少土壤NO3--N的淋溶和累积.     

肝移植术后曲霉的气道定植与侵袭性曲霉病的关系

目的评价肝移植术后曲霉气道的定植及其发生侵袭性感染的风险。方法回顾2003—2004年南京八一医院和上海长征医院56例肝移植患者进行的连续组织学检查和曲霉培养结果。结果24例患者被分离出曲霉,2例发生侵袭性烟曲霉感染。这2例患者在移植后6个月内都有烟曲霉的定植,并且都死亡,占所有移植后死亡的29％。无曲霉定植者都未发生侵袭性曲霉感染。结论肝移植术后的侵袭性曲霉感染较为少见,但常致死,曲霉定植常见但为一过性,由于气管侵袭性曲霉感染只发生在有烟曲霉定植的移植后6个月内的患者,所以在此期间进行预防性的治疗能否有效降低侵袭性曲霉感染值得研究。     

用DNA杂交技术检测临床分离株的四种耐四环素基因

采用DNA杂交技术对来自我国几个省的306株革兰氏阴性杆菌携带的耐四环素基因(Tet)的分布进行了研究。所有菌株均用15种生化反应数码分析法判定,绿脓杆菌用双歧法鉴定。用四种Tet探针检测结果如下：TetB占31．4％,TetD占25．2％TetA占1 2.5％,TetC占10．5％。与四种探针均不杂交者占36．6％。含1种基因的菌株占51．3％,含2种的占7．5％,含3种的占2．9％,含4种的占1．6％。不同地区的菌株的Tet种类不完全相同。还发现在严格控制的条件下杂交,TetA和Tetc有交叉反应。     

通过原位易错PCR一步构建基因突变文库

主要介绍一种通过原位易错PCR构建随机突变文库的新技术。本实验室最近发表的一项国际专利中,利用来源于海栖热孢菌的极耐热性DNA连接酶,在传统PCR循环中加入一个连接步骤,即变性—退火—延伸—连接的四步循环法PCR,从而实现环状质粒的PCR指数扩增(PPCP)。原位易错PCR中所用引物为一段线性双链DNA,它含有与模板质粒不同的筛选标记,产物转化宿主菌后,模板质粒在筛选平板上被直接剔除。筛选到的阳性突变子可用作模板直接进入突变文库的再次构建,通过筛选获得二级或多级累加的正突变。利用这种方法构建了一个木聚糖酶基因和一个纤维素酶基因的随机突变文库,并筛选出具有正向突变的蛋白,证明以PPCP为基础的原位易错PCR技术,为基因定向进化提供了一种快速有效的随机突变文库构建的新方法。     

肝移植术后替米夫定联合乙肝免疫球蛋白预防乙肝复发的研究

目的:评价在肝移植后替米夫定联合乙肝免疫球蛋白(HBIG)预防乙肝复发的临床疗效和安全性.方法:68例肝移植患者分为2组:32例患者应用拉米夫定联合HBIG预防预防乙肝的复发;36例患者应用替米夫定联合HBIG预防.观察两组患者用药干预后体内乙肝病毒DNA拷贝数(HBV DNA)、乙肝表面抗原(HB sAg)、乙肝E抗原(HBeAg)的变化以及用药过程中的不良反应.结果:拉米夫定联合HBIG组有4例患者在随访期间复发乙肝,复发率为12.5％,而替米夫定联合HBIG组未见患者复发乙肝.两组患者在治疗过程中均未见到明显的药物引起的不良反应.结论:替米夫定联合HBIG在肝移植术后预防乙肝复发中的临床疗效显著、安全性好,具有推广价值.