直接酶标—化学发光分子杂交体系的建立

本文通过调整发光剂,氧化剂,发光增强剂的浓度,并加入一组辅助剂,改进了依赖过氧化物酶化学发光液的配方。并通过比较实验证明：该发光液的检测灵敏度高于其它原有的发光液,同时还发现合成后的酶标复合物可经ＣＭ－３２离子交换柱阶段洗脱纯化,以提高杂交灵敏度。从而建立了一套直接酶标ＤＮＡ探针－化学发光自显影分子杂交体系。其狭缝杂交灵敏度可达０．０３ｐｇ。并利用该体系进行了单拷贝基因分析,Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交     

槲皮素的抗活性氧作用

本文在体外测定了槲皮素对白细胞吞噬发光体系、黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶发光体系及碱性连二亚硫酸钠发光体系的影响,结果表明槲皮素对上述三个发光体系均有不同程度的抑制作用,其ＩＣ５０分别是１７．８,２．２４和２２．３μｍｏｌ／Ｌ。提示槲皮素既可抑制白细胞吞噬产生的活性氧,又可减少黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶系的Ｏ－２形成,或兼有直接清除活性氧的作用     

多形核白细胞产生的NO和O2-自由基主要形成 ONOO-

用ESR自旋捕集技术研究了人多形核白细胞(PMN)受促癌剂佛波醇(PMA)刺激产生O₂^-和NO自由基的相互作用.发现加L-精氨酸使在PMA刺激PMN体系中捕捉到的O₂^-明显减少,加N^G-甲基精氨酸(NGMA)使在PMA刺激PMN体系中捕捉的O₂^-明显增加.用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶和光照核黄素体系证明,加L-精氨酸使PMA刺激PMN产生NO^-·自由基与O₂^-结合生成ONOO^-是加入L-精氨酸使PMA刺激PMN体系捕捉的O₂^-减少的主要原因,并且推算了加入不同浓度L-精氨酸PMN产生NO^-·自由基的量.用羟基自由基清除剂和ONOO^-氧化DMPO和DMSO及其对pH的依赖关系,证明了ONOO^-分解并没有直接生成羟基自由基.用依赖鲁咪诺的化学发光法研究了人多形核白细胞受促癌剂PMA刺激产生NO^-·自由基动力学过程.另外,用化学合成的NO^-·自由基和过氧亚硝基在模型体系研究了它们的ESR和化学发光特征.说明PMA刺激PMN生成的NO^-·和O₂^-自由基反应形成的ONOO^-是引起化学发光的主要形式.     

化学发光和发光标记技术

化学发光免疫分析是继放射免疫分析和酶联免疫分析后建立起来的一种高灵敏、高特异性的免疫分析技术。化学发光标记是化学发光免疫分析的关键技术,不仅在小分子、大分子物质的标记分析中用于标记物的制备,而且在基因探针标记、肿瘤标记和诊断以及导向药物研究中广为采用。本简要介绍了化学发光和发光标记技术。     

16种伞形科药用植物对超氧自由基的清除作用

采用Ｎａ２Ｓ２Ｏ４ＮａＯＨＬｕｍｉｎｏｌ发光体系,应用智能化学发光法对１６种伞形科药用植物提取物的自由基清除能力和对酪氨酸酶的抑制能力进行筛选。实验结果表明这些伞形科药用植物大都具有清除自由基的作用,其中羌活（ＮｏｔｏｐｔｅｒｙｇｉｕｍｆｏｒｂｅｓｉｄｅＢｏｉｓ．）的“ＳＯＤ样作用”达到２９６７Ｕ／ｍｇ（原生药量）,提示这些植物具有稳定的非酶类清除自由基物质,并且“ＳＯＤ样作用”强弱与其对酪氨酸酶的抑制能力呈明显正相关。     

一种测定CuZn—SOD总量的新方法：化学发光免疫分析法

通过探索,用ABEI发光剂标记人CuZn-SOD,用液相竞争结合法测定样品中CuZn-SOD含量。此法试剂稳定,结果重复性好,批内CV=2.6～6.0％,批间CV=6.9～7.9％,回收率97.7—106.1％,可测范围为1—500ng,适合测定血清及体液中微量CuZn-SOD。     

研究百草枯除草机理的化学发光法

百草枯(Paraquat,PQ)化学名二氯化1,1'-二甲基-4,4'-双吡啶(1,1'-dimethyl-4,4'-bipyridylium dichloride),是一种触杀型灭生性除草剂。PQ~(2+)表示百草枯的阳离子。 Farrington等利用脉冲射解(pulseradiolysis)技术研究PQ与氧分子的反应,从理论上指出PQ对绿色植物的毒性,是上述反应的中间产物超氧阴离子自由基