封闭带毒素

封闭带毒素（ZOT）是霍乱弧菌编码的第二个毒素,相对分子质量约45000,zot基因位于鞭毛噬菌体CTXΦ基因组中,ZOT通过激活复杂的细胞间一系列级联反应来调节紧密排列的上皮细胞结构,可逆地调节上皮细胞的通透性,从而影响大分子物质的吸收,ZOT及其人类组织类似物zonulin受体广泛存在于多种组织以及传代细胞中,ZOT与其上皮细胞受体的结合位点位于ZOT的118～299氨基酸之间,由于其独特的生物学性质,使用ZOT有可能开辟一种新颖的生物大分子药物口服给药新途径,给制药工业及疫苗工业展示了光明的前景。     

复合益生菌制剂"海生元"急性毒性试验研究

目的 :观察复合益生菌制剂“海生元”(HSY)及其核心成分 益生菌 (M9、T9)经两种途径给药的急性毒性反应 ,评价其安全性。方法 :以健康小鼠为对象 ,将HSY、M9、T9三种受试物按i.p(腹腔注射 )和p .o(口服灌胃 )两种给药方式进行急毒试验。每种给药方法分 5个剂量组。i.p小鼠用Bliss法测得受试物的LD50 和 95 %可信限 ,p .o小鼠用安全限度试验测得受试物的最大耐受量。 结果 :1)i.p法测得各受试物LD50 和 95 %可信限 :M9为 898.31mg/ml(770 .18～ 92 5 .79) ;T9为 185 6 .95mg/ml(15 2 1.4 8～ 2 0 10 .36 ) ;HSY为 76 0 5 .2 3mg/ml(6 980 .5 2～ 830 4 .11)。 2 )p .o法测得各受试物最大耐受量及耐受倍数 :健康小鼠最大耐受量分别为M9>4 0 0 0mg/ml,T9>6 0 0 0mg/ml,HSY >15 0 0 0mg/ml;最大耐受量倍数 (即耐受成人每日用量的倍数 )分别为 133倍、2 0 0倍和 5 0 0倍。结论 :HSY、M9、T9口服给药均非常安全。三种受试物比较 ,又以HSY安全程度最高。     

N-糖基化修饰在髓性白血病耐药中的作用

目的研究N-糖基化修饰、糖基因表达调控在髓性白血病耐药中的作用,明确N-糖基化修饰、糖基因与白血病耐药的相关性,从而为预测和诊断髓性白血病耐药性,寻求逆转药物提供新策略和靶点。方法通过修饰白血病耐药细胞株的N-糖基化（衣霉素Tunicamycin和PNGase F处理）,Western Blot检测Pgp、CD147糖蛋白的表达水平;MTT法检测N-糖基化修饰前后髓性白血病耐药细胞株的生长情况及对化疗药物的敏感性,观察上述细胞膜型N-糖基化修饰后对化疗药物耐药性的影响;进一步通过RNA干扰技术干预差异表达的糖基因,MTT法检测干扰前后白血病耐药细胞株的生长情况及对化疗药物的敏感性,观测糖基因的表达调控对髓性白血病耐药的影响。结果 NB4/ADR细胞经N-糖基化修饰后,P-gp、CD147糖蛋白的表达水平发生改变,同时该细胞的药物敏感性也增强（P〈0.05）;当通过RNA干扰技术特异性使NB4/ADR细胞中B3GNT8和ST8SIA4表达下调时,该细胞的药物敏感性增强（P〈0.05）。结论髓性白血病细胞株中N-糖基化修饰、糖基因的改变均与白血病多药耐药具有相关性,为预测和诊断髓性白血病耐药性,寻求逆转药物提供新策略和靶点。     

混菌状态对新菌系产生VC前体KGA的影响

通过测定氧化葡萄糖酸杆菌产酸变化,研究了新菌系混菌状态对产酸的影响。结果显示：新混菌体系中,种液KGA为4.1-5.5mg/ml,混合菌菌群氧化葡萄糖酸杆菌/掷孢酵母为26-35：1,混菌生物量达0.46-0.60(OD值）,有利于二菌在发酵中相互协调,促进产酸,调节接种生物量可增加产酸速度,缩短产酸周期,但不影响最终产酸量。     

苦参-蛇床子药对提取物对白念珠菌VVC临床株的抑制作用研究

目的本文着重研究苦参-蛇床子药对提取物(Extract of Sophorae Flavescentis Radix — Cnidii Fructus Couplet medicines,ESCC)对白念珠菌VVC临床株的抑制作用。方法 实验通过微量液基稀释法检测ESCC对白念珠菌的MIC 80;XTT减低法检测ESCC对白念珠菌VVC临床株细胞增殖活性的影响;倒置显微镜分别在4 h、8 h、12 h观察ESCC对白念珠菌VVC临床株酵母-菌丝二相性转换的影响;扫描电子显微镜观察ESCC对白念珠菌VVC临床株生物膜形成的影响;微孔板观察ESCC对白念珠菌VVC临床株成熟生物膜的影响;qRT-PCR检测ESCC对白念珠菌VVC临床株菌丝和生物膜形成相关基因的影响。结果 实验结果显示,ESCC具有一定的抗真菌作用,MIC 80 在512~1024 μg/mL之间,可显著降低白念珠菌VVC临床株细胞增殖活性;ESCC可抑制白念珠菌VVC临床株酵母-菌丝二相性转换,并可影响成熟生物膜的完整性。PCR结果显示ESCC可显著降低 ALS1 、 ASL3 、 HWP1 等基因转录水平。结论 本实验研究表明,苦参-蛇床子1∶1药对水提物可通过下调白念珠菌菌丝和生物膜形成相关基因转录水平,从而抑制酵母-菌丝二相性转换,影响其代谢活性,抑制生物膜的形成,并可破坏完整生物膜的完整性,从而起到抗真菌作用。     

生物酶法催化技术在纺织工业中的应用

本项目针对棉织物传统碱法处理工艺存在的纤维损伤大、水耗和能耗高、废水处理难等问题,立足“研制棉织物前处理所有环节所需的四种酶制剂,通过应用这些酶制剂实现棉织物的全酶法清洁处理”的研究目标,通过首先筛选获得具有自主知识产权的高产酶微生物,进行酶基因克隆和酶生产工程菌构建,确定酶发酵机制和过程优化方法,研究酶发酵放大和产品分离提取技术,     

黄体酮对3T3-L1脂肪前体细胞成脂分化后细胞中UCP2基因表达的影响

目的：观察体外培养条件下3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化成的成熟脂肪细胞中解偶联蛋白2（UCP2）mRNA表达水平及黄体酮对其表达的影响。方法：体外培养3T3-L1脂肪细胞,在诱导3T3．L1脂肪细胞分化成熟后,经不同黄体酮浓度10μm／25μM／50μM／75μM/100μM刺激后,抽提总RNA,用RT—PCR检测UCP2mRNA的表达。结果：黄体酮会促进成熟脂肪细胞中UCP2mRNA的表达,（P〈0．05）其中25μM浓度刺激下UCP2mRNA表达量最高。结论：体外培养中,黄体酮对成熟脂肪细胞中UCP2mRNA的表达与调控具有一定的影响。     

小鼠MKP4基因组织、细胞表达谱研究

为了探讨MKP4基因mRNA在正常雄性C57小鼠的组织表达分布及其在3T3-L1脂肪细胞诱导进程中的表达谱。采用经典诱导分化方案诱导3T3-L1前脂肪细胞,分别收集前脂肪细胞、诱导分化day0、day2、day5、day8和day9的细胞,同时取正常C57雄性小鼠(鼠龄12周,数量n=3)多处组织如心、胰、肝、脂肪、脑、肾及睾丸等,并提取组织、细胞总RNA,RT-QPCR(荧光染料法)检测MKP4基因mRNA表达水平。结果显示MKP4基因在C57小鼠体内存在较广的表达谱,在肝脏、脂肪的表达量最高,其次为脑组织,其它组织存在低度表达;在3T3-L1前脂肪细胞、诱导分化day0、day2中表达极低,在day5中表达骤然升高,随后表达相对增高,于day9表达水平趋于平稳。MKP4基因组织表达谱结果表明其在维持正常生理功能可能发挥一定的作用,在胰岛素敏感相关组织肝脏、脂肪中表达量较高,提示可能参与胰岛素抵抗(IR)的发生与发展过程。此外,MKP4在3T3-L1前脂肪细胞诱导进程中表达上调,表明MKP4可能参与了脂质积累、肥胖等代谢疾病的发生与发展。     

三氧化二砷对K562/A02 细胞的凋亡及细胞周期的影响

目的:研究三氧化二砷对多药耐药急性白血病细胞株K562/A02凋亡与细胞周期的影响及可能机制。方法:取阿霉素(Adr)的耐药白血病细胞株分为未加药的对照组及加入不同浓度的三氧化二砷(其终浓度为4.0μmol/L、5.0μmol/L)组,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布,Western blot方法检测不同浓度三氧化二砷对K562/A02细胞核NF-κBp65蛋白水平。结果:与对照组比较,三氧化二砷可显著增加Adr对K562/A02细胞凋亡率,阻滞细胞于G0/G1期,降低K562/A02细胞胞核中NF-kB p65的表达(P均<0.05)。结论:三氧化二砷可能是通过抑制NF-kB的胞内活化转位,从而促进K562/A02细胞凋亡及抑制细胞增殖。     

猪前体脂肪细胞的分离培养

在比较组织块法和消化法分离培养猪前体脂肪细胞的基础上,通过对前体脂肪细胞增殖与分化过程中细胞的形态学变化、生长曲线、油红O染色以及脂肪细胞特异性标志基因脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）和过氧化物体增殖剂活化受体γ（peroxisome proliferators-activated receptor γ,PPARγ）表达的研究,证明用消化法可从猪的脂肪组织中分离获得大量的前体脂肪细胞,其生长旺盛,可见自发充脂;传代细胞经诱导培养后,充脂率大幅度提高,脂肪特异性标志基因表达增强。这为深入研究脂肪细胞增殖与分化以及猪体脂肪沉积提供了一个较好的模型。