Saposin C下调LNCaP细胞雄激素受体的多泛素化降解（英）

本研究旨在证实鞘脂活化蛋白C(saposin C)对雄激素受体（AR）多泛素化降解的影响及其机制. 通过将真核表达载体saposin C转染LNCaP细胞,发现saposin C上调AR的蛋白水平和转录激活活性. 进一步将野生型和突变型泛素质粒Ubwt和UbK48R分别与saposin C 共转染LNCaP细胞发现,saposin C能够促进AR蛋白的单泛素化形式的稳定性,抑制AR的多泛素化修饰及其在蛋白酶体中的降解. 其分子机制是saposin C、Ub和AR三者形成复合体,抑制了AR的进一步多泛素化过程. 同时还发现,在这一机制中,细胞内低浓度的雄激素（0.1 nmol/L）与saposin C具有协同作用.     

Construction of Y376C-FGFR4 eukaryotic expression plasmid and its biological activity in HEK293 cell

Fibroblast growth factor receptor （FGFR）, a member of tyro- sine kinase family, is composed of three domains, including a three-extracellular Ig-like domain, a transmembrane domain, and a tyrosine kinase domain. FGFR4 is a member of the FGFR family, which plays a pivotal role in tumorigenesis. It has been found that FGFR4 plays an important role in melan- oma, prostate cancer, head and neck cancer, and primary liver cancer malignant development [1,2]. The poor response of FGFR4 to chemotherapy has been associated with its over-expression [3].     

前列腺癌内分泌治疗现状

前列腺癌(prostatecancerPC)是欧美国家男性发病率最高的恶性肿瘤,近年来其在我国的发病率也逐年升高。雄激素在PC的发生、发展过程中扮演着重要的角色,所以内分泌治疗一直是前列腺癌研究领域的重点,但是其可能诱发激素非依赖型PC这也是临床医学面临的一大问题。本文就前列腺癌内分泌治疗的分类、作用机制、用药策略及临床效果等作一综述。     

TMSG-1基因功能的初步研究

TMSG-1是用mRNA差异显示技术克隆的转移相关基因, 它在高转移肿瘤细胞系和有转移的肿瘤组织中表达下降. 以高转移的前列腺癌细胞系PC-3M-1E8为受体细胞, 通过基因转染技术观察了TMSG-1基因表达对细胞V-ATPase活性、细胞内pH值和细胞凋亡情况的影响, 同时利用GFP对TMSG-1细胞内定位进行了分析. 结果表明, V-ATPase在PC-3M-1E8细胞系, 转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系的活性无明显差异. 在转染正义TMSG-1的细胞系中, V-ATPase的活性比PC-3M-1E8细胞系, 转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系均有明显增高(P < 0.001). 利用pH敏感性荧光探针BCECF测定细胞内的pH值, 结果显示转染正义TMSG-1组的pHi值有明显提高. 细胞凋亡的检测结果表明, 转染正义TMSG-1组细胞凋亡明显增多(P < 0.01), BCL2的表达显著下降. TMSG-1蛋白的细胞内定位分析表明, TMSG-1是一个跨膜蛋白, 定位于内质网、线粒体等细胞质膜系统. 实验结果表明, 前列腺癌细胞系中TMSG-1的上调可以提高细胞V-ATPase的活性, 增加细胞内的pH值, 同时TMSG-1的上调还可抑制BCL2的表达, 促进细胞凋亡的发生.     

miR-126 调控前列腺癌机制研究

miR-126通过靶向作用于表皮生长因子域7(EGFL7)、同源框A9(HOXA9)、胰岛素受体底物-1(IlLS-1)、p85-B基因等,在转录后水平调控靶基因表达,在肿瘤形成中起重要作用。前列腺癌细胞中高表达miR-126,能明显下调VEGF-A、EGLF7、HOXA9、VCAM-l等与肿瘤生长、转移密切相关的蛋白分子。miR-126作为抑癌因子,在多种肿瘤中均下调。其抑癌作用及机制在肺癌、白血病、乳腺癌、宫颈癌等中均已得到证实。本课题拟对miR-126调控前列腺癌机制做一综述。     

CK34βE12、P63和P504S在前列腺良恶性病变中的表达

目的探讨CK34βE12、P63和P504S在前列腺良恶性病变中的表达及鉴别诊断意义。方法应用免疫组化S-P法对57例前列腺癌及49例良性前列腺增生组织中CK34βE12、P63和P504S的表达水平及鉴别诊断意义。结果CK34βE12、P63和P504S在57例前列腺癌中的阳性表达率分别为1．7％及96．4％,P63为100％阴性表达;CK34βE12和P63在49例良性前列腺增生中阳性表达率分别为100％及100％,P504S为100％阴性表达。结论在前列腺增生性病变组织中联合检测CK34βE12、P63和P504S的表达对于前列腺良恶性病变鉴别诊断有重要意义。     

术前中性粒细胞绝对值/淋巴细胞比值联合血清瘦素、睾酮对前列腺癌根治术后生化复发的评估价值

摘要 目的：探讨术前中性粒细胞绝对值/淋巴细胞比值（NLR）联合血清瘦素、睾酮对前列腺癌（PCa）根治术后生化复发的评估价值。方法：选取2018年1月～2020年1月于我院接受根治性切除术治疗的82例PCa患者。术前均检测NLR、血清瘦素、睾酮水平。术后对所有患者均进行2年随访观察,按照是否发生生化复发分为复发组（n=34）以及无复发组（n=48）。比较两组NLR、血清瘦素、睾酮水平差异。收集患者临床资料,采用多因素Logistic回归分析PCa根治术后生化复发的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析NLR以及血清瘦素、睾酮预测PCa根治术后生化复发的评估价值。结果：复发组术前NLR以及瘦素水平均高于无复发组（P＜0.05）,而睾酮水平低于无复发组（P＜0.05）。复发组术前前列腺特异抗原（PSA）≥10 ng/mL、TNM分期T2期人数占比以及Gleason评分均高于无复发组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,术前PSA≥10 ng/mL、TNM分期T2期、Gleason评分较高、术前NLR较高、瘦素水平较高、睾酮水平较低是PCa根治术后生化复发的危险因素（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,联合检测术前NLR、血清瘦素、睾酮水平预测PCa根治术后生化复发的ROC曲线下面积为0.897,高于三项指标单独检测的0.678、0.712、0.733。结论：PCa根治术后生化复发受术前PSA、NLR、血清瘦素、睾酮水平、TNM分期、Gleason评分等因素影响,术前NLR联合血清瘦素、睾酮对PCa根治术后生化复发的预测价值较高。     

PSP94融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗前列腺癌活性分析

在从成年人正常前列腺组织中获得人９４个氨基酸的前列腺分泌蛋白（ＰＳＰ９４）ｃＤＮＡ基础上,利用ＰＬ表达系统,实现了人ＰＳＰ９４成熟肽Ｎ－末端带有１９个列源氨基酸的融合蛋白在大肠杆菌中的表达。目的蛋白在细胞中主要以包涵体形式存在。表达量约占菌体总蛋白的３０％,分子量约为１６．５ｋＤ。表达产物在人前列腺癌细胞ＰＣ－３上活性分析表明,该融合蛋白能明显抑制前列腺癌细胞的生长。     

雄激素非依赖性前列腺癌细胞中差异甲基化基因的初步筛选

应用全基因组DNA甲基化芯片(Illumina Infinium HumanMethylation27 BeadChip)杂交技术以及转录组RNA测序技术,检测了雄激素依赖性前列腺癌(androgen-dependent prostate cancer,ADPC)细胞株LNCaP和雄激素非依赖性前列腺癌(androgen-independent prostate cancer,AIPC)细胞株LNCaP-AI(androgen independent)中的差异甲基化基因。发现与LNCaP细胞株相比,LNCaP-AI细胞株有990个CpG位点表现为高甲基化,涉及855个基因;2 305个CpG位点表现为低甲基化,涉及1 970个基因。结合转录组mRNA表达结果,筛选出6个超甲基化基因:FAM111B、RAB36、PCDH7、COL6A2、IGF1R、GULP1;8个低甲基化基因:EPHA3、TM4SF1、IGFBP5、FAM105A、RASD1、ITPR2、CYP27B1、UBE2E3。这些差异甲基化基因涉及钙离子信号通路、Wnt信号通路等多个信号通路,参与了细胞的基因表达、信号传导、细胞通讯、细胞运动、细胞黏附以及血管生成等功能,为探讨这些差异甲基化基因在前列腺癌雄激素非依赖性转化过程中发挥的作用奠定了基础。     

去甲基化酶JARID1D在前列腺癌侵袭和转移中的作用与机制

目的 探索去甲基化酶JARID1D在前列腺癌侵袭和转移中的作用与机制,以期为前列腺癌的转移防治提供新的预测指标及治疗靶点。方法 选择前列腺癌细胞系22RV1和DU145转染慢病毒,以敲低JARID1D的表达,获得细胞系sh-JARID1D,并通过qRT-PCR及Western Blot检测转染后22RV1和DU145细胞中JARID1D的表达情况。通过Transwell实验检测JARID1D低表达后细胞侵袭能力的变化。通过裸鼠尾静脉注射sh-JARID1D细胞系建立体内实验转移模型,观察敲低JARID1D表达后体内肿瘤细胞的转移能力的变化。通过qRT-PCR及Western Blot检测JARID1D对转移相关基因基质金属蛋白酶2(MMP2)表达的影响。结果 Transwell实验显示JARID1D低表达的前列腺癌细胞侵袭能力增强(22RV1细胞系P<0.01,DU145细胞系P<0.001);体内实验显示JARID1D低表达可显著增强肿瘤细胞的体内转移潜能(22RV1转移模型P<0.01,DU145转移模型P<0.01)。进一步实验表明降低JARID1D表达,...