蚯触圈源啶虫脒降解菌D35的分离鉴定及其降解条件优化

【背景】啶虫脒等新烟碱类杀虫剂的残留易对非靶标生物造成伤害,投加高效降解细菌进行生物强化,可促进其快速降解。【目的】从蚯触圈中分离筛选啶虫脒降解菌并优化其降解条件,提高降解效率。【方法】制备蚯触圈基质富集筛选降解菌;通过生理生化特征和16S rRNA基因序列分析对其进行鉴定;利用单因素筛选、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及Box-Behnken design试验优化菌株降解条件。【结果】分离得到1株啶虫脒降解菌D35,可在72 h内降解55.46%初始浓度为50 mg/L的啶虫脒,将其鉴定为一株假单胞菌(Pseudomonas sp.)。优化得到菌株降解啶虫脒的最佳环境条件为：胰蛋白胨10.19 g/L、温度为30℃、接种量为5.24%,pH 7.0、初始农药浓度50 mg/L,在此条件下72 h内菌株降解率为80.21%,较未优化前提高了24.75%。【结论】本研究对分离筛选新烟碱类杀虫剂降解菌的方法进行了探索,获得的菌株D35可高效降解啶虫脒,为快速消除环境中啶虫脒污染提供了新的微生物资源。     

茶树内生真菌CSN-4产漆酶培养基及培养条件研究

从茶树内生真菌筛选产漆酶的菌株,分析不同营养因素和培养条件对菌株漆酶酶活力的影响。采用6种显色底物的平板初筛和酶活测定的复筛方法,从15株茶树内生真菌菌株中筛选获得1株产漆酶酶活较高的菌株CSN 4。单因素分析结果显示,液态发酵条件下菌株CSN-4适宜的主要培养基成分是麸皮和蛋白胨;菌株CSN-4分别在麸皮30 g/L、蛋白胨2.5 g/L、CuSO₄·5H₂O 0.015 g/L和茶水6 g/L时发酵产漆酶酶活最高。发酵条件试验结果表明,菌株CSN-4分别在接种量为6个菌饼（直径6 mm）、装液量60 mL/250 mL、pH 4.8、摇床转速120 r/min,培养温度为28 ℃时产漆酶酶活较高。在培养基中添加麸皮和茶水对菌株CSN-4产漆酶有明显的促进作用。经过培养基成分及培养条件优化后,菌株CSN 4产漆酶酶活显著升高,达到2 417 U/L。     

黑皱鳃金龟甲壳素提取工艺研究

通过单因素试验和正交试验探讨从黑皱鳃金龟中提取甲壳素的最佳工艺条件。利用氢氧化钠溶液和柠檬酸溶液依次对黑皱鳃金龟干粉进行处理后,用紫外吸收法和干法灰化法分别测定提取物中残余蛋白质和灰分含量以检验脱除效果,并在最佳工艺条件下,提取甲壳素样品,对其进行定性和定量分析。试验结果表明:利用酸碱法提取甲壳素的最佳工艺条件为:氢氧化钠浓度8%、固液比1∶10、温度85℃、时间4 h,柠檬酸浓度1.6 g/L、时间25 h、固液比1∶12、室温,对在此工艺条件下提取得到的甲壳素样品进行红外光谱检测并计算其得率为24.82%。     

红树林细菌G1产抗菌活性物质发酵条件的优化

目的:对一株从广西山口红树林保护区筛选得到的具有广谱抗菌活性的红树林细菌G1进行发酵条件的研究.方法:采用单因素实验法对G1产抗菌活性物质的发酵培养基及培养条件进行研究.结果:确定了红树林细菌G1的最佳发酵培养基为:蔗糖2.0％、酵母粉1.5％、NaCl1％.最佳发酵培养条件为:装液量40％、接种量5％、发酵时间84h、初始pH值8.0,优化后G1发酵液的抗菌活性提高了2倍.结论:初步确定了G1发酵的条件,为工业化生产抗菌活性物质提供了理论依据.     

淋巴因子和干扰素

<正> 853728 抗人β-干扰素的合成多肽抗体[英]/Chow,T.P.…∥J.Biol.Chem.-1984,259(19).-12220～12225[译自 DBA,1985,4(2),85-00719]作者制备了与人β-干扰素 N-末端1-21和18-45氨基序列相一致的合成多肽。将此     

兔肠道厌氧菌的分离培养条件研究

兔肠道厌氧菌的分离培养条件研究牛钟相朱瑞良张绍学常维山唐珂心徐海花柴家前（山东农业大学动物科学院,泰安２７１０１８）ＳｔｕｄｉｅｓｏｆｔｈｅＣｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｂｏｕｔＳｅｐｅｒａｔｉｎｇａｎｄＣｕｌｔｕｒｉｎｇｏｆｔｈｅＡｎａｅｒｏｂｉｏｎｉｎＲ...     

洞庭湖区夏季温光条件及被迫迁移对东方田鼠繁殖的影响

在野外 ,从先年的秋初至当年春末被迫迁移前 ,东方田鼠在湖滩上能保持较高的繁殖能力 ;在夏季 ,不论栖息在农田还是岗地 ,都是东方田鼠的繁殖低谷。夏季 (6～ 8月 )在实验室自然温光条件下与人工控制较低温度条件下同时进行观察 ,结果表明 ,前种条件下东方田鼠的繁殖能力明显低于人工降低温度缩短光照条件下的繁殖力 ,此变动趋势与野外观察到的繁殖力季节动态一致 ,可以说明夏季温光条件不利于东方田鼠的繁殖。另一方面 ,东方田鼠的繁殖能力最低的 6月并非全年最热的月份 ,这是因为东方田鼠的被动迁移对体力的消耗加剧了夏季温光对繁殖的影响程度。因此 ,认为洪水引起的东方田鼠被迫迁移和夏季的温光条件共同影响了东方田鼠的繁殖。洞庭湖区东方田鼠主要在冬春季繁殖 ,而分布在高纬度地区的田鼠类动物和分布在高纬度地区的东方田鼠在夏季繁殖 ,在月份上虽不同 ,但其繁殖盛期的气温则相近 ,其实是田鼠类动物喜寒惧热特性的反映 ,乃是对当地的生态环境的适应。     

白脉椒草的组织培养与快速繁殖

1植物名称 白脉椒草（Peperomia puteolata Trel．）。 2材料类别 叶片和茎段。 3培养条件 愈伤组织诱导培养基：（1）MS＋6-BA2mg·L-1（单位下同）;（2）MS＋6-BA2＋2,4-D0．02。不定芽诱导培养基：（3）MS＋6-BA0．5。     

棉铃虫蜕皮调节转录因子在大肠杆菌中的重组表达及其包涵体纯化

蜕皮调节转录因子(hormone receptor 3,HR3)在昆虫蜕皮过程中启动蜕皮相关早期基因簇表达,并抑制蜕皮相关晚期基因簇表达,对昆虫蜕皮级联反应起着关键的调控作用。利用合成的特异性引物通过RT-PCR扩增了棉铃虫 Helicoverpa armigera 蜕皮调节转录因子(HHR3),并与pGEX-4T-1载体连接,在大肠杆菌Escherichia coli DH5α内进行扩增,经过PCR筛选获得了HHR3-pGEX-4T-1重组质粒。 用该质粒转化大肠杆菌表达菌株BL21并进行诱导表达,获得了与谷胱甘肽-S转移酶（GST）融合表达的HHR3包涵体,分子量在94 kD左右,通过无离子去垢剂CAPS（3-［cyclohexylamino］-1-propanesulfonic acid）变性、复性后获得了可溶性GST-HHR3融合蛋白,经凝血酶裂解和SDS-PAGE分离得到纯化的HHR3,经蛋白质N-端测序确认表达正确。用重组表达的HHR3免疫家兔,制备了兔抗HHR3多克隆抗体,免疫印迹检测显示该抗体对HHR3有特异性识别能力, 可以用于HHR3功能与调控等下游研究。免疫印迹检测结果还表明,HHR3在5龄向6龄蜕皮的幼虫脂肪体中高表达,在进入6龄24 h 的幼虫脂肪体中含量明显下降,在6 龄72 h 的幼虫中肠中没有检测到HHR3表达;成虫卵巢中有HHR3表达。