检测特异性抗体分泌细胞(ASCs)的固相酶联免疫斑(ELISPOT)技术的建立

ＥＬＩＳＰＯＴ技术是目前国外评价疫苗免疫原性和免疫应答机理研究中最常使用的方法。本文用自制的ＮＣ膜２４孔板为固相支持物,建立了检测小鼠脾细胞中特异性ＡＳＣｓ的ＥＬＩＳＰＯＴ技术,在检测方法的特异性、结果的稳定性上均取得了满意的效果。并对该方法的某些实验条件进行了摸索。     

缢蛏碱性磷酸酶胍溶液中分子折叠与活力变化研究

报道了缢蛏碱性磷酸酶（简称ＡＬＰ）经不同浓度盐酸胍处理时酶的分子构象所发生的变化以及酶变化和失活的动力学过程。在胍中酶荧光发射峰强度下降,紫外差光谱在２４６ｎｍ和２８５ｎｍ处出现２个负峰,ＣＤ谱中酶的α螺旋度下降,且随浓度增大,变化程度也加大。动力学研究表明,酶在０．５ｍｏｌ／Ｌ、１．０ｍｏｌ／Ｌ、２．０ｍｏｌ／Ｌ３．０ｍｏｌ／Ｌ、４．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍中的变性速度常数分别为３．２１×１０~（－４）ｓ~（－１）、６．３８×１０~（－４）ｓ~（－１）、２．１７×１０~（－３）ｓ~（－１）、２．３３×１０~（－３）ｓ~９－１）、５．１７×１０~（－３）ｓ~（－１）;而酶在相应盐酸胍中的失活速度常数分别为２．３３×１０~（－４）ｓ~（－１）、３．５７×１０~（－４）ｓ~（－１）、５．８６×１０~（－４）ｓ~（－１）、１．１４×１０~（－３）ｓ~（－１）、３．４５×１０~（－３）ｓ~（－１）;表现为失活与构象伸展变化基本平行。     

人工会成柞蚕杀菌肽D基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

以质粒pWR450为载体,克隆了人工合成的柞蚕杀菌肽D基因(122bp),构建的重组子pWR450-Cec转化大肠杆菌JM103、用限制性内切酶酶切鉴定。产物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示可表达杀菌肽-β-gal融合蛋白。     

氰类和酯类取代基水溶金属卟啉与DNA相互作用的共振拉曼研究

用共振拉曼和紫外－可见吸收光谱研究了水溶金属卟啉４－Ｎ－乙酸乙酯基－吡啶基铜卟啉和镍卟啉［简称Ｃｕ（ＮＥＡＥ）和Ｎｉ（ＮＥＡＥ）］及４－Ｎ－乙腈基－吡啶基铜卟啉［简称Ｃｕ（ＮＡＣＮ）］与小牛胸腺ＤＮＡ的相互作用。分析表明Ｃｕ（ＮＥＡＥ）、Ｎｉ（ＮＥＡＥ）和Ｃｕ（ＮＡＣＮ）分别以外部键联、部分插入和沟槽方式与ＤＮＡ作用;卟啉插入ＤＮＡ时吡啶基团向卟啉环平面转动但不可能转成与之共面;而以非插入方式作用时吡啶基团会向垂直于或者平行于卟啉环平面转动。吡啶取代基的大小和空间位阻是影响相互作用方式的关键因素之一。     

对氨基苯甲酸酯同系物形成细胞色素P_（450）代谢中间体络合物的定量结构与活性关系

细胞色素Ｐ４５０（Ｐ４５０,Ｅｃ１．１４．１４．１）是一种十分重要的催化氧化反应的酶。本文测定了１２个对氨基苯甲酸酯同系物与Ｐ４５０相互作用而形成Ｐ４５０代谢中间体络合物的活性,用半经验分子轨道法ＭＮＤＯ－ＰＭ３计算得到了这些同系物的分子轨道指数,并用逐步多元回归分析法导出了活性与分子轨道指数及正辛醇／水分配系数的对数值（ＬｏｇＰ）之间的定量结构与活性关系（ＱＳＡＲ）。结果表明：对氨基苯甲酸脂同系物形成Ｐ４５０代谢中间体络合物的活性与原子净电荷的绝对值之和（∑Ｑ）和ＬｏｇＰ均具有很好的抛物线型相务性,同时,ＬｏｇＰ与∑Ｑ之间也存在相当好的相关性。     

“气孔开闭”幻灯模型的制作方法

(一) 目的用幻灯的形式把气孔开闭原理的动态生理知识特点表现出来,达到形象直观的教学目的。 (二) 制作方法 1.取一块长15cm×宽9cm的硬纸板,在中央剪取一个φ7cm的圆。再从长的中间剪开硬纸板,平均分成两个相等的半圆(如图1)。然后,在硬纸板的反正面涂上粘合剂,用两块长10cm、宽8cm的透明薄塑料,分别把两个半圆硬纸板,从半圆处包起来,使硬纸板与塑料粘合在一起(如图1右)。把硬纸板3个边缘的塑料折叠好,用透明胶带封合(图1左),使半圆部分呈密闭的透明的气囊。再把两个半圆用胶带连上。     

盐酸胍诱导的α淀粉酶去折叠与再折叠

利用蛋白质内源荧光和酶活性两种信号以及荧光偏振,HPLC和停流等方法研究了盐酸胍诱导的α淀粉酶去折叠与重折叠的平衡转变和动力学。实验结果表明α淀粉酶去折叠与重折叠是两个不同的过程;变性与复性过程中可能伴有聚集体生成;去折叠与重折叠均为双相过程,重折叠大约始于2秒之后。     

我国大麦和性花叶病毒（BaMMV）研究初报

本文根据F(ab′)2－ELISA和ISEM实验,结合病毒粒子长度测定,报道了江苏省如东县农科所大麦黄花病毒源（吕种盐辐矮早3）中除存在大麦花花叶病毒（BaYMV）外,还复合感染大麦和性花叶病毒（BaMMV）,这是我国BaMMV的第一次报道。     

半枝莲中二萜内酯和黄酮化合物的分离和鉴定

半枝莲（Scutellaria barbata D.Don）为唇形科黄芩属植物,全草入药,具有清热解毒,化瘀利尿,消肿止痛和抗癌等功效。国内学者报道从全草中分得红花素（carthamidin）、异红花素（isocarthamidin）、印黄芩甙（scutellarein）、β-谷甾醇（β-sitosterol）、硬脂酸（stearic acid）和生物碱。台湾学者从中分离得汉黄芩素（wogonin）、5-羟基-7,8-二甲氧基黄酮（5-hydroxy-7,8-dimethoxyflavone）、半枝莲素（Rivularin）。我们从全草的乙醇提取液中分得两个化合物,经鉴定为汉黄芩素、新穿心莲内酯,该内酯在本植物中属首次发现。