为何越减越肥?

正一边是诱人的美食广告,一边是减肥瘦身的招牌!它们经常会出现在美国公路两旁的广告牌上。更具有讽刺意义的是,每年在减肥领域的科研投入不计其数,且相关的科研成果也是占据各大期刊的榜首。可是,在这个地球上仍然有超过5亿人饱受肥胖的困扰,很多减肥者在尝试了各种减肥与塑身方法后,却以前功尽弃而告终。整个地球人都在变胖,为什么我们越减越胖呢?大多数进化生物学的科学家都认为,21世纪的人类身体     

家族性阿尔茨海默病相关研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是老年人中最常见的神经系统退行性疾病,给家庭和社会带来了十分沉重的负担。淀粉样蛋白级联反应假说是AD发病机制的重要学说之一,近年来备受关注。同时家族性老年痴呆(Familial Alzheimer’s Disease,FAD)在AD发病机制的研究中,起着至关重要的作用,其相关的FAD致病基因导致了AD的遗传性。本文将结合Aβ假说、产生过程和FAD的遗传因素进行讨论,浅析FAD的发病原因。     

人脑乙酰胆碱酯酶(hAChE)基因在毕赤酵母中的分泌表达与鉴定

研究了hAChE基因在毕赤酵母中的表达。设计并合成引物Pb1和P2,以18周龄引产胎儿大脑组织mRNA为模板,经AMV逆转录和高保真PCR,扩增出序列正确的hAChE成熟肽完整基因约1．8kb,经鉴定获得正确构建的分泌型酵母表达栽体pHIL-S1(hAChE),BglⅡ线性化后回收的酵母表达单位经电穿孔法转化入毕赤酵母GS115中,经MD／MM营养表型筛选、提取酵母基因组进行PCR鉴定和含3-酰基吲哚培养基进行表达产物的显色反应,初步筛选出分泌表达有hAChE活性的P．patstoris菌22株。依据hAChE酶活性与3-酰基吲哚显色深浅成正比,在平皿和微量反应板上快捷地筛选出高效表达菌pHIL-S1(AChE)(Ⅰ)-7株,SDS-PAGE分析和Western印迹试验表明,产物分子量约为65kDa,经甲醇诱导摇瓶培养,发酵上清原液rhAChE相对酶活性高达4．0mU／ml,表达量占分泌蛋白总量的23．6％。     

奶牛α干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性测定

提取经新城疫病毒诱导培养的奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛α干扰素成熟蛋白基因,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,扩增片段为牛α干扰素成熟蛋白序列,与Genebank上发表的α1干扰素序列同源性为98%。然后将特异性片段连接到含分泌信号肽序列的Pichiapastoris表达载体pPICZαA上,将重组质粒经SacI酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。转化子经PCR分析鉴定后利用甘油增菌和甲醇诱导,实现了BoIFN-α在毕赤酵母系统中的分泌表达。SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为23kDa,比其推导结果(20kDa)略大,推测可能是因为表达产物发生了一定程度的糖基化。细胞病变抑制法结果表明,重组牛IFN-α具有较高的干扰素活性,约为4.1×10⁵U/ml,经微量蛋白测量仪测得,其表达量约为80μg/ml,比活为5.1×10⁶U/mg。     

扁豆绒毡层发育的超微结构研究

应用透射电镜对扁豆绒毡层发育过程进行了研究,主要结果如下：１）首次发现扁豆绒毡层在发育过程中,经历了二交胞质重组（第一次始于减数分裂末期Ⅱ,第二次始于小孢子发育早期）,使绒毡层细胞的活动呈现３个高峰期（即小孢子母细胞减数分裂期、小孢子四分体期一小孢子早期、小孢子晚期－二胞花粉中期）。２绒毡层细胞的分泌作用有３种形式（渗透分泌、胞吐分泌和自溶）。３．首次观察到绒毡层细胞的内切向壁和径向壁经历了两个周     

磷饥饿对番茄幼苗H^＋分泌及Pi吸收的影响

磷饥饿条件下番茄幼苗的Ｈ＾＋分泌速率明显提高,质膜质子泵专一性抑制剂钒酸盐能显著抑制番茄幼苗的Ｈ＾＋分泌,也能显著抑制其Ｐｉ吸收。此结果表明,磷饥饿时番茄幼苗Ｐｉ吸收速率的变化与Ｈ＾＋分泌速率的变化之间可能具有一定的相关性,并进一步暗示质膜Ｈ＾＋－ＡＴＰａｓｅ可能参与其中,本文结果还表明,Ｐｉ／Ｈ＾＋的准量关系约为１：１。     

人PSP94的分泌表达及其表达产物抗前列腺癌作用

将编码人 94个氨基酸的前列腺分泌蛋白 ( PSP94) c DNA与酵母整合载体 p PICZαA重组 ,构建的重组质粒线性化后转染酵母细胞 GS1 1 5,获得了 PSP94在酵母细胞中遗传性稳定表达酵母工程细胞 .诱导后的培养物中 ,rh PSP94表达量约为 0 .9mg/L,分子量约 1 6.5k D.培养上清经离子交换层析纯化后 ,目的蛋白的纯度为 92 % .体外在人前列腺癌细胞上活性分析表明 ,rh PSP94以1 0 0μg/L ,对该细胞的抑制率 2 0 .4% ;单纯新型 TNF,以 1 0 3 U/ml,抑制率 2 9.8% ;rh PSP94和新型 TNF以上述同样剂量联合应用 ,抑制率为 86.3% .提示 PSP94在体外对抗前列腺癌细胞有杀伤作用 ,但不明显 ;PSP94与新型 TNF联合应用 ,可使抑制率明显提高 ,可能 PSP94与新型 TNF有协同抗前列腺癌的作用 .     

IL—1诱导小鼠胸腺上皮细胞（MTEC1）克隆分泌化学趋化因子

To analyze the capability of IL-1 and IL-6 in the induction of chemokine (CF) production by mouse thymus epithelial cell (MTEC1) clones, MTEC1 cells were cloned through one cell culture and individual cell clones were established in long term culture referred to as MTEC1-DW clones. The constitutive production of IL-1, IL-6 and CF by MTEC1-DW clones was evaluated and the patterns of the cytokine production determined. Addition of exogenous IL-1 or IL-6 or both to the cultures of those MTEC1-DW clones that are unable to produce CF, and incubated for 2 days, then, to assess the chemotactic activity in the cell culture supernatants (SNs). In the opposite, addition of anti-IL-1 mAb(s) to the cultures of those MTEC1-DW clones that can produce IL-1 and CF to neutralize secreted IL-1 then, to test chemotactic activity in the SNs after 2-day incubation. The results showed that in the MTEC1-DW clones which were unable to constitutively produce IL-1 or CF, addition of IL-1 could induce these cloned cells to produce CF with high chemotactic activity. By constrast, addition of anti-IL-1 mAb(s) to those MTEC1-DW clones that constitutively produce IL-1 and CF could significantly inhibit them to produce CF. IL-6 only exhibited weak activity in the induction of CF production by those cloned cells. Therefore, in the cytokine network regulation, CF production is mainly induced by endogenously produced IL-1 in MTEC1 cells.     

羊布鲁氏菌的分泌蛋白质组分析

分泌蛋白是指那些分泌到细胞外的蛋白质。布鲁氏菌的分泌蛋白可能介导了病原与宿主之间的相互作用, 在布鲁氏菌的毒力方面发挥一定的作用, 但是研究方法的局限性限制了分泌蛋白的研究。本文报道了利用蛋白质组的方法来寻找羊布鲁氏菌的分泌蛋白。首先用TCA-丙酮法提取布鲁氏菌培养上清中的分泌蛋白, 双向电泳进行分离, 然后用质谱来鉴定这些蛋白, 最终鉴定到40种蛋白。通过生物信息学分析, 发现这些蛋白主要是ABC转运系统的底物结合蛋白、外膜蛋白和热休克蛋白。这些蛋白的识别不仅有助于对布鲁氏菌致病机制的理解, 而且也可为     

细菌成孔毒素研究进展

细菌成孔毒素是一类由成孔蛋白分泌、直接侵袭细胞膜并在细胞膜上形成孔结构、导致在正常情况下不能进入细胞内的离子和其他毒性细胞因子进入细胞内、引起细胞膨胀和细胞溶解的毒素,又名溶细胞毒素.