HRCA技术检测中华鳖虹彩病毒

[目的]中华鳖虹彩病毒(STIV)是甲鱼重要的病毒性病原之一,建立特异性好、灵敏度高的中华鳖虹彩病毒超分支滚环扩增体系(HRCA),对STIV进行快速、准确地检测.[方法]根据中华鳖虹彩病毒(STIV)独有的基因序列和锁式探针公共连接序列分别设计特异性的锁式探针及其扩增引物,对HRCA的系列反应条件进行优化,验证该方法的特异性和灵敏度,并用该方法对感染STIV显症和未显症的甲鱼组织进行检测.[结果]10 nmol/L探针经T4 DNA连接酶作用20 min环化,Bst DNA聚合酶大片段扩增20 min即可获得很好的检测效果.特异性试验表明,在多种待检病毒样中,HRCA能特异地检测出STIV,同时HRCA具有极高的灵敏度,能检测出的最低模板量为101拷贝,而常规PCR的检测下限为103拷贝,对显症和尚未显症的感染早期甲鱼组织的检测结果均为阳性.[结论]建立的中华鳖虹彩病毒HRCA检测体系具有灵敏、快速、简便等特点,能从组织样品中准确地检测出STIV,可以用于该类疾病的早期诊断,具有较好的推广前景.     

发根农杆菌诱导甘薯发根条件的优化

通过诱导甘薯(徐薯18)发根的条件进行优化,分别时侵染时间(10min、20min和30min)、培养基[MS、MSJ(MS BA0.1mg/L NAA0.2mg/L)和MSS(MS BA0.2mg/L NAA0.1mg/L)]、诱导材料(叶片、叶柄和茎切段)和除菌药物剂量(羧苄青霉素浓度0.5mg/L、1.0mg/L和1.5mg/L)进行优化.试验按L9(34)正交设计,每个处理3次重复.然后通过PCR检测徐薯18和其发根中的rol基因.结果表明用发根农杆菌A4经20min侵染,通过MSJ活化的徐薯18的茎切段生成发根的发根诱导率最高,最佳的除菌羧苄青霉素浓度为1.0mg/L.PCR检测证明得到的发根是发根农杆菌诱导产生的.在此优化条件下诱导的发根诱导率高,得到发根的可靠性强,且生成的发根粗壮、生长迅速、分支众多.     

《中国比较医学杂志》稿约

一、本刊的性质、报道范围和栏目设置 本刊是中国实验动物学会主办的全国性学术刊物（月刊）,征稿范围是与人类生命与健康密切相关的实验动物与动物实验等生命科学各分支学科,重点刊载比较医学成果和进展。本刊开设研究报告,综述与专论,研究快报,技术方法,经验交流,管理科学,国外研究进展,学术信息,简讯等。     

Rpf结构域及其突变体对MTB感染小鼠的免疫治疗作用

目的:观察复苏促生长因子Rpf结构域(Rpfd)及其突变体E54K (Rpfd1),E54A (Rpfd2)和E54K+ D48A (Rpfd3)对MTB感染小鼠的免疫治疗作用.方法:表达、纯化Rpfd及其突变体Rpfd1,Rpfd2和Rpfd3.结核毒株H37RV从尾静脉感染BALB/c小鼠,剂量为1× 105C F U.感染4w后,随机分为6组,在感染后4w、6w和8周分别腹部皮下注射含50 μg/ml相应蛋白Rpfd、Rpfd1、Rpfd2、Rpfd3的生理盐水,同时设异烟肼(INH,54.25 mg/L)联合利福平(RFP,52.5 mg/L)治疗组.在感染后11w和13w,分别取一侧肺脏计数荷菌数.将各时间点的感染小鼠另一侧肺脏固定后进行组织学观察.结果:表达产物均可与抗-Rpf结构域单抗特异性结合,相对分子量约为32 kDa.感染后11w和13w,Rpfd、Rp fd1、Rpfd2治疗组肺部荷菌量明显少于Rpfd3治疗组和生理盐水组(P＜0.05),但其对肺部MTB的控制未达到INH+RFP联合治疗的效果(P＜0.05).结论:MTB感染小鼠后,利用Rpfd蛋白进行免疫治疗,发现Rpfd及其突变体Rpfd1和Rpfd2蛋白能够显著的降低肺脏荷菌数,并且诱导淋巴细胞的增值.为利用Rpf结构域突变体制备MTB的免疫治疗疫苗提供了理论依据和实验基础.     

《中国比较医学杂志》稿约

一、本刊的性质、报道范围和栏目设置 本刊是中国实验动物学会主办的全国性学术刊物（月刊）,征稿范围是与人类生命与健康密切相关的实验动物与动物实验等生命科学各分支学科。重点刊载比较医学成果和进展。本刊开设研究报告,综述与专论,研究快报,技术方法,经验交流,管理科学,国外研究进展,学术信息,简讯等。     

由微分方程所描述的微生物连续培养动力系统(II)*

该文为论文 [1 ]的继续 ,主要介绍具有时间滞后的微生物连续培养模型。     

重组酶聚合酶扩增技术检测结核分枝杆菌

目的 利用重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification,RPA）技术检测结核分支杆菌。方法 采用Axxin T8-ISO扩增仪（TwistDX公司）,反应温度设置为39℃,反应时间20 min。检测分为实验组、阳性对照组和空白对照组。实验组模板DNA从痰液中提取。阳性对照模板DNA为H37Rv标准菌株样本DNA及卡介苗提取的DNA。空白对照为蒸馏水。结果 RPA技术可在20 min内明显区分103~106 copies/mL的阳性质粒与阴性对照。对分离培养的结核杆菌（H37Rv）DNA及卡介苗提取的DNA,阳性克隆质粒进行等温扩增,结果结核杆菌分离株DNA、卡介苗DNA、阳性克隆质粒均有阳性扩增反应,而非结核分枝杆菌分离株和阴性对照无阳性扩增反应。灵敏度为100%,特异性为82%。结论 RPA技术利用了重组酶、单链结合蛋白、DNA聚合酶代替了传统PCR变性、退火、延伸的热循环过程,在常温25℃~42℃、15~30 min内即可实现痕量核酸的快速扩增,可应用于快速检测人结核分枝杆菌,是一种全新的检测方法。     

由微分方程所描述的微生物连续培养动力系统(Ⅰ)

陆续介绍微生物连续培养(Chemostat)的基本原理,以单种微生物连续培养模型为基础,较详细地介绍几类由微分方程所描述的微生物连续培养动力系统模型,涉及的问题有解的稳定性,系统的持久性,周期解和Hopf分支等．     

专论与综述的撰写要点

专论与综述是本刊重要栏目之一，主要反映国内外微生物学各分支学科研究最新成果和进展，其内容要求新颖丰富，观点明确，论述恰当，最好包含作者自己的工作内容和见解。因此，作者在动笔之前必须明确选题，一般原则上应选择在理论和实践中具有重要意义的学科专题进行论述。围绕专题所涉及的各个方面，在综合分析和评价已有资料基础上提出其演变规律和趋势。即掌握其内在的精髓，深入到专题研究的本质，论述其发展前景。作者通过回顾、观察和展望，     

蜜环菌菌索形成及分支过程中钙离子流的非损伤微测

为研究蜜环菌Armillaria mellea菌索形成及分支与钙离子的关系,以菌株Armillaria mellea 541为试验材料,采用离子非损伤微测技术,对在马铃薯琼脂糖培养基(PDA)、含0.2 g/L CaCl2的PDA和NADPH氧化酶抑制剂200 μmol/L氯化二亚苯基碘鎓(Diphenyleneiod...