一种新型家蝇蛹凝集素结构的初步探讨*

初步分析了分离出的一种分子量为55kDa,具有免疫活性的新型家蝇蛹D-半乳糖结合凝集素的结构,为深入研究其结构与功能之间的关系提供大量的信息。首先通过凝胶电泳染色确定此新型家蝇蛹凝集素具有糖链结构,借助蛋白质测序仪、分光光度计比色、β-消除反应、红外光谱以及原子力显微镜技术对其结构进行初步分析。此种家蝇蛹凝集素是一种蛋白和糖含量分别为97.36% 和2.1% 的球状单体,直径为75nm左右。肽链与糖链的连接方式为O-糖苷键型,肽链的N-末端封闭,糖环为吡喃型,为进一步分析其结构提供了可靠的依据。     

黑色菜豆(Phaseolus sp.)凝集素的纯化和性质

黑色菜豆(phaseolussp.)种子中含有对人A型血专一凝集的凝集素。用猪胃粘蛋白-Sepharose 4B作亲和吸附剂和Sephadex G-200凝胶过滤,可以纯化这种凝集素。纯化的凝集素在pH8.9,Tris-EDTANa_2-borate缓冲液的PAGE中,呈现单一蛋白带;酚-硫酸法测得总糖含量为3.22％。在SDS-PAGE中发现其分子由两种亚基所组成,亚基分子量分别为38,000和35,000。当凝集素浓度分别为0.98μg/ml和1.95μg/ml时能强烈地凝集人A型和AB型血细胞。在凝集素浓度高达500μg/ml时,B型血细胞能发生弱凝集反应,但对O型血和兔红细胞则完全不发生凝集反应。其凝集活性可被GalNAC、L-Fuc、猪甲状腺球蛋白和卵粘蛋白所抑制。该凝集素对人外周血中淋巴细胞的转化率达80％,细胞分裂比率高达37.1％;氨基组成分析表明,凝集素分子中Asp和Glu含量较高,而cys和Met含量很低。     

白桂木凝集素的纯化与性质的研究

白桂木种子粉经抽提、３０～６０％饱和度硫酸铵沉淀和亲和层析,已获得纯化的白桂木凝集素（Ａｒｔｏｃａｒｐｕｓｈｙｐａｒｇｙｒｂｕｓｌｅｃｔｉｎ）。浓度梯度ＰＡＧＥ,显示基本是均一的蛋白质带,分析表明,它是由分子量为１５０００和１９０００两种亚基组成,Ｎ端为精氨酸和丙氨酸,ｐＩ９．１０、８．４５、８．１０,中性精含量约６．９％,氨基糖约０．４％,能凝集多种动物红细胞和人Ａ、Ｂ、Ｏ和ＡＢ血型红细胞,凝集活力受Ｇａ１ＮＡｃ、Ｇａｌ和棉子糖的抑制,对热较敏感,在ｐＨ４．５～９．５的范围内．ｐＨ的改变不影响它的血凝活力。     

红花菜豆（矮生红花变种）凝集素的生物学作用

红花菜豆（矮生红花变种,Ｐｈａｓｅｏｌｕｓｃｏｃｃｉｎｅｕｓｖａｒ．ｒｕｂｒｏｎａｎｕｓ）凝集素（ＰＣＬ）识别高甘露糖型寡糖并与之结合,它的生物学作用都与其糖结合专一性有关。ＰＣＬ的血凝作用不显示供血动物专一性和和血型专一性。ＰＣＬ除凝集红细胞外亦凝集动物其它细胞,如小鼠脾细胞、人精细胞及某些肿瘤细胞如黑色素瘤细胞Ｍ２１、胄癌细胞等。此外ＰＣＬ亦凝集某些微生物如野生型和Ｈ．Ｂ．１０１大肠杆菌以及面包酵母。ＰＣＬ具有促细胞分裂作用,使小鼠脾细胞和人外周血淋巴细胞转化的ＰＣＬ的最低浓度为２５０μｇ／Ｌ。ＰＣＬ能抑制某些癌瘤细胞的生长,在测试的几种细胞中,对人黑色素瘤细胞Ｍ２１生长的抑制较为明显。ＰＣＬ亦能抑制野生型大肠杆菌和面包酵母的生长,ＰＣＬ的细胞凝集、促淋巴细胞转化和抑制细胞生长的作用,都是首先通过它的糖结合部位与细胞表面的糖基结合导致的。     

胃粘膜肠上皮化生与胃癌关系的组织化学和免疫组织化学研究

应用ＡＢ（ｐＨ１．０）ＫＯＨ／ＰＡＳ粘液组织化学和ＡＢＣ法凝集素标记,对１９０例胃粘膜病变标本进行观察。结果表明,结肠不完全型肠上皮化生多见于肠型癌（ＩＴＣ）及其癌旁组织。两型肠化在弥漫型癌（ＤＴＣ）中无显著差异。５种凝集素受体的含量和分布的差异与胃癌的组织学类型和分化程度有关。ＷＧＡ、ＲＣＡ和ＰＮＡ主要标记在ＤＴＣ中,与ＩＴＣ相比,有非常显著的差异（Ｐ＜０．０１）。其染色水平随肿瘤分化程度的降低而升高。ＣｏｎＡ和ＤＢＡ主要标记在ＩＴＣ和伴有肠化的慢性萎缩性胃炎中。凝集素肠化分型与粘液肠化分型基本相符。我们认为结肠不完全肠化与ＩＴＣ的发生关系密切,而小肠型和结肠完全型肠化可能与ＤＴＣ的发生有关。     

爪哇稻(Java14)原生质体培养与植株再生

在NBL中建立初始悬浮培养物,再转移到AA2中建立原生质体分离用的胚性细胞悬浮系,利用这个方法成功地建立了Java14、毫梅、D.V.85、0242 8等的胚性细胞悬浮系。从Java14中分离的原生质体在KPR培养基中获得大量再生细胞团,并成功地实现了植株再生。通过渗透压的调整和培养过程中的加液处理,获得了0.8%较高的植板率。 Abstract:Embryogenic cell suspensions of Java 14,Haomei,D.V.85,02428 etc.were established via suspension methods of first establishing primary suspension cultures on NBL and then establishing embryogenic cell suspension for protoplast isolation on AA2 medium.A large number of clones were obtained when protoplasts of Java14 were cultured on KPR medium and plantiets were regenerated from clones.Plating efficiency was up to 0.8% by adjusting osmolality and lowing osmolality in protoplast culture.     

白茯苓凝集素的荧光光谱研究

白茯苓凝集素（ＳＬＬ）分子中含有４个色氨酸（Ｔｒｐ）残基,ＮＢＳ修饰测得这４个Ｔｒｐ残基位于分子表面。ＳＬＬ在天然状态下荧光发射峰位于３３５ｎｍ处,离子强度和温度对其荧光光谱均无明显的影响。ＮＢＳ修饰后的ＳＬＬ失去凝血活性,相应荧光光谱的强度减弱,荧光发射峰发生蓝移,提示ＳＬＬ的构象发生改变。用ＫＩ·ＣｓＣｌ和丙烯酰胺淬灭剂研究ＳＬＬ分子中Ｔｒｐ残基的微环境,发现丙烯酰胺和ＣｓＣｌ能淬灭分子中１００％和５０％的Ｔｒｐ残基的荧光,而ＫＩ完全不能淬灭ＳＬＬ分子中Ｔｒｐ残基的荧光,因此Ｔｒｐ残基周围存在阴离子区,或者Ｔｒｐ残基处于分子表面的疏水环境中。