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211.
212.
为抑制肿瘤细胞增殖和防治有关病害提供基础理论依据,将孔石莼(Ulva pertusa)经磷酸盐缓冲液抽提,20%~75%硫酸铵分级沉淀,牛甲状腺球蛋白-Sepharose 4B亲和层析,可以从绿藻孔石莼中纯化出孔石莼凝集素(UPL),在PAGE上显示单一蛋白染色带,在等电聚焦电泳上显示单一蛋白染色带,其pI为8.40.纯化后的UPL的最大紫外吸收峰在285 nm,用Sephadex G-200分子筛层析测得其分子量为11 047.该凝集素可以凝集人的A、B、AB、O型红细胞,且凝集活性相同,在对人(A、B、AB、O)兔、鲤、鲫的红细胞的凝集作用中,兔的凝集作用最强.该凝集素凝集兔红细胞的作用不被D-半乳糖、D-果糖、葡萄糖、蔗糖、甘露聚糖、γ球蛋白、卵清蛋白所抑制,仅被牛甲状腺球蛋白抑制,最小抑制浓度为6.20 g/L.该凝集素在pH4.0~10.14范围内均有活性,但在pH6.50~9.51范围内活性较高,该凝集活性在85℃加热1 h,活力仍未改变,说明具有很强的耐热性. 相似文献
213.
根据孔石莼(Ulva pertusa)凝集素(Lectin)蛋白cDNA全长序列(GenBank登录号:AY433960)设计引物,以其总DNA为模板,采用PCR技术扩增蛋白DNA序列,经克隆、测序获得基因序列。结果表明,孔石莼凝集素蛋白(UPL)基因序列长约为670 bp,含有一个大小为56 bp的内含子。此外,设计带酶切位点的引物,以UPL-cDNA为模板,扩增其开放阅读框,并与表达载体pGEX-2T连接,构建原核表达载体pG2T-UPL,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达大小约为47 kD的目的蛋白。 相似文献
214.
215.
MBL与Raji细胞结合特性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
甘露聚糖结合凝集素(MBL)作为关键的天然免疫模式识别分子已得到共识,但其在获得性免疫应答中是否发挥作用目前尚不清楚.采用酶联免疫吸附试验分析MBL能否与Raii、THPI/CDl4、Jurkat和红细胞结合,并采用流式细胞术着重研究其与Raji细胞结合特性.结果显示:MBL以浓度依赖方式结合Raji、THP1/CDl4、Jurkat细胞,红细胞则否.MBL与Raji细胞结合是Ca2 依赖的,且能被甘露糖、葡萄糖、N-乙酰葡糖胺所抑制;Clq或抗ClqR单克隆抗体能部分抑制MBL与Raji细胞结合;重组人MBL-CRD蛋白或MBL-CLR蛋白均能抑制MBL与Raji细胞结合,两者联合应用则可完全阻断这种结合.研究资料表明,B淋巴细胞系Raji细胞表达Ca2 依赖性、糖敏感的MBL受体,包括对CLR特异和CRD特异的两种受体,前者为MBL和Clq的共同受体.进一步的功能研究显示,高浓度MBL(10-50mg/L)对Raji细胞的生长具有显著抑制作用,且呈剂量依赖关系.提示MBL作为一种重要的模式识别分子,不仅发挥天然免疫功能,而且可能在调节获得性免疫应答中起一定作用. 相似文献
216.
黄精凝集素Ⅱ的纯化及部分性质研究 总被引:5,自引:0,他引:5
囊丝黄精(PolygonatumcyrtonemaHua.)的根状茎,经浸取、用硫酸铵分级沉淀、猪甲状腺球蛋白-Sepharose4B柱亲和层析、CM-Sepharose柱离子交换层析和SephadexG-100凝胶过滤,可以分离纯化出黄精凝集素Ⅱ(PCLⅡ).纯化的PCLⅡ在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示单一蛋白染色带;在快速高效液相色谱中亦为单一蛋白峰,经分子筛层析测得分子量为15.9kD,最大紫外吸收值在278nm,PCLⅡ只凝集兔红细胞,当浓度为0.25μg/ml时,即可发生凝集反应,此凝集兔红细胞的能力可被D-甘露糖和猪甲状腺球蛋白所抑制.氨基酸组成分析表明PCLⅡ分子中富含酸性氨基酸,N末端为丙氨酸.经测定PCLⅡ分子中含有3个色氨酸和2.4%的中性糖.原子发射光谱分析表明,该凝集素分子中含有Mg和Ca两种金属元素. 相似文献
217.
218.
从半夏(Pinellia ternata)块根中,经95%硫酸铵沉淀和固定化猪甲状腺球蛋白柱亲和层析分离得到一种凝集素,称为半夏凝集素(PTL)。凝胶过滤、SDS-PAGE和免疫双扩散鉴定PTL是均一的样品,分子量约44kD,由四个约12kD的亚基组成。PTL主要存在于半夏的块茎中,茎中也有少量存在。 相似文献
219.
半夏凝集素(PTL)可与甘露聚糖结合。本文以PTL与~(125)I标记的甘露聚糖的结合活性为指标,观察了一些金属离子对PTL的糖结合活性的影响,井对PTL的糖结合专一性作了较系统的研究。结果表明常见的金属离子或EDTA对其糖结合活性无显著影响,但K~+可明显增加PTL的糖结合活性。大多数单糖,二糖不抑制PTL与甘露聚糖的结合,但一些疏水配基形成的糖苷可产生显著的抑制效应。PTL专一与高甘露糖型糖链结合。 相似文献
220.
免设印迹表明,水稻 ES—CBP(en—dosperm chitin—binding Protein)是胚乳专一性蛋白。蛋白休用NaCl提取后再用TritonX—100提取,所得的两个组份在作免疫印迹时,均能与抗ES—CBP的抗血清起反应,表明这种细胞器的衬质(matrix)和膜部分部有ES—CBP存在。免疫印迹还表明,在开花后7d(7DPA)的水稻种于胚乳中已经累积了相当多的 ES—CBP。在7~30 DPA之问.ES—CBP在胚乳总蛋白中的相对水平随着种子发育而下降。这些结果表明,ES—CBP在7DPA以前的胚乳中的累积是相对活跃的。水稻种子贮藏蛋白在7DPA以后累积最快,这时胚乳中已经累积了相当多的ES—CBP。种子萌发后2d(2DPG)时,ES—CBP已有明显的降解。到7DPG,胚乳中只剩下少量的甲壳素结合蛋白。ES—CBP这样的累积和降解模式支持了该甲壳素结合蛋白是水稻胚乳中蛋白体组织者的假说。 相似文献