农杆菌介导的雪花莲凝集素基因转入玉米骨干自交系

以农杆菌AGL0介导,将雪花莲凝集素基因转入玉米骨干自交系齐319和掖515胚性愈伤组织细胞,从筛选后的抗性愈伤组织获得再生植株。农杆菌浓度和共培养时间均能显著影响侵染后玉米愈伤组织的抗性频率。在农杆菌浓度OD600 0．2～0．3,共培养时间3d时,侵染后玉米愈伤组织的抗性频率最高,平均约4％。对再生植株及其子代基因组DNA的PCR及Southern杂交分析表明雪花莲凝集素基因已经整合到玉米基因组中,并遗传给后代。在蚜虫人工接种试验中,转基因植株上蚜虫的繁殖力为非转基因对照植株上的50％,这表明转基因植株抗蚜性显著增强。     

植物凝集素研究进展

植物凝集素广泛分布于植物界,它可以根据不同性质进行分类,按进化及结构相关性可以分为七个家族;豆科凝集素,单子叶植物甘露糖结构凝集素,含橡胶素结构域的几丁质结合凝集素,2型核糖体失活蛋白,葫芦科韧皮部凝集素,木菠萝素相关凝集素和苋科凝集素,在长期的进化过程中,它们形成几种不同的结合模体来识别一些外源多糖,在植物中未发现合适的内源性多糖受体。植物凝集素在生物学研究,农业和医学上有广泛的应用。     

毛头鬼伞（Coprinus comatus）中一种碱性蛋白的纯化及其活性

用离子交换层析（CMsepharose FF）和凝胶层析（SuperdexTM75）方法,从新鲜食用菌毛头鬼伞（Coprinus comatus）子实体中分离纯化出一碱性蛋白y3,经SDSPAGE初步确定其分子量约为14.4kD。活性检测结果显示：当其浓度为12.5μg/mL时,对烟草花叶病毒（TMV）在心叶烟枯斑寄主上的侵染抑制率达83.0%;y3对兔血凝集活性滴度为2.5,对人血凝集活性滴度为26,其浓度分别为1.562μg/mL和0.781μg/mL;利用胃癌细胞株MGC803检测y3体外抗肿瘤活性,其IC50为12μg/mL。y3 N端序列为NRDVAACARFIDDFCDTLTP,为一新的蛋白序列。在SWISSPORT上登录号为P83477。     

大鼠左室壁血管内皮凝集素受体的观察

采用生物素化凝集素ＣｏｎＡ、ＲＣＡ－Ｉ、ＵＥＡ－Ｉ、ＰＮＡ、ＳＢＡ 和ＷＧＡ, 对大鼠左室壁血管内皮的凝集素受体进行了观察, 结果发现, 大鼠左室壁血管内皮存在有ＣｏｎＡ、ＲＣＡ－Ｉ及ＷＧＡ受体, 文中讨论了血管内皮凝集素受体的分布情况及其意义。     

白桦茸凝集素提取工艺的优化

对白桦茸凝集素最佳提取工艺进行了研究.以2%兔血细胞凝血效价为指标,确定了最佳提取缓冲液.通过正交试验对料液比、提取时间、提取液pH值、NaCl浓度等因素进行了优化分析并确定了提取工艺的最佳参数组合.结果表明,以TBS和PBS为提取缓冲液所得的白桦茸凝集素凝集效价分别为64、16;最佳提取工艺:液料比为50:1,提取时间为20h,NaCl浓度为0mol/L,缓冲液pH值为8.0,按该最佳工艺提取白桦茸凝集素凝血效价为256.所优化的提取工艺稳定、可行,为该凝集素进一步在免疫调节方面的开发应用提供一定基础.     

双丁酰环磷酸腺苷耐人肝癌细胞株SMMC－7721表面N－糟链类型及天线数的影响

本文采用系列凝集素柱层析法,并配合外切精苷酶研究了在双丁酰环磷酸腺苷（ｄＢ－ｃＡＭＰ）作用１～５天过程中人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１细胞表面Ｎ－糖链类型及复杂型糖链天线数的变化。结果表明,ｄＢ－ｃＡＭＰ促进３Ｈ—Ｍａｎ参入细胞表面Ｎ－糖链,使高甘露糖型Ｎ－糖链的百分比下降,并促进二天线Ｎ－糖链的生物合成。使多天线特别是四天线和Ｃ２Ｃ２Ｃ６三天线Ｎ－糖链的百分比减少．结果提示,Ｎ－糖链结构的这些变化可能是ｄＢ－ｃＡＭＰ诱导ＳＭＭＣ－７７２１细胞向正常方向分化的结果。     

泥蚶(Tegillarca granosa Linnaeus)血淋巴液凝集素的分离纯化及其性质研究

泥蚶是一种重要的海产经济贝类,其血淋巴液经硫酸铵二步分级沉淀后,再经Sephadex G- 100凝胶过滤和Sepharose 4B亲和层析纯化制得泥蚶血淋巴液凝集素。经测定,该凝集素分子量约为123Kda,为两个亚基的蛋白质,其相对分子量分别为15 KDa和16 KDa,分子中含5．02％的糖。在氨基酸组成中,天门冬氨酸(Asp)含量最高,其次是谷氨酸(Glu)和组氨酸(His),不含蛋氨酸(Met)。泥蚶血淋巴液凝集素对多种天然或经酶修饰的人或动物红细胞具有不同的凝集作用,其中对兔红细胞的凝集活性最大。半乳糖和乳糖对其凝集活性具有抑制作用。凝集活性依赖于Ca2 ,在pH7．0较稳定,热稳定性不高,在30℃-70℃时凝集效价由原来的25下降为21,当温度超过80℃以后,凝血活性完全丧失。     

木糖异构酶在酿酒酵母表面表达及对木糖代谢影响的初步研究

利用α-型酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表面展示系统的载体,将来源于嗜热细菌Thermus thermophilus的木糖异构酶基因xylA,插入到酿酒酵母蔗糖酶信号肽序列与α-凝集素的C端编码序列之间,形成融合表达框,构建重组质粒pSY-xy222,转化酿酒酵母H158。含重组质粒的菌株H158-SXI木糖异构酶活性测定表明,细胞壁上酶活测定值为1.53 U,木糖异构酶在酿酒酵母细胞壁上得到活性表达。木糖葡萄糖共发酵结果显示,重组菌株木糖利用率较出发菌株提高了17.8%。     

登革病毒受体的研究进展

登革病毒(Dengue virus,DENV)是登革热(DF)、登革出血热和登革休克综合征(DHF/DSS)的病原体.根据包膜蛋白的抗原性的不同,DENV可分为4个血清型,即DENV1～4.由于血清型比较复杂,目前关于病毒受体仍未得出明确一致的结论.但近几年取得了一些引人注目的进展,比如研究发现甘露糖受体(MR)、CLEC5A等作为DENV的受体,可能在病毒进入宿主细胞过程中发挥重要作用.为此,就近几年关于DENV受体以及病毒进入细胞的机制作一综述.     

香螺血清、肌肉和唾液腺凝集素凝集性能的初步研究

研究香螺(Naptunea cumingi crosse)肌肉、血清和唾液腺凝集素对7 种脊椎动物红细胞、人的4 种红细胞、4 种单细胞藻类和11 种微生物细胞的凝集性能,同时进行pH敏感性、热稳定性、糖抑制性、EDTA、金属离子以及盐浓度影响试验.结果表明,3 种凝集素对各种细胞的凝集效应存在差异,以家兔红细胞的凝集效果最佳.肌肉和血清凝集素在pH<7.0时均失活,唾液腺凝集素的热稳定性最强,温度为90 ℃仍具有活性.此外,不同的糖溶液对3 种凝集素凝集效果的影响不同,在EDTA浓度为2.00～0.25 mmol/L范围内,3 种凝集素的凝集效价均受到不同程度的抑制.在金属离子影响试验中发现,Zn2+能明显提高肌肉和血清凝集素的凝集活力,而对唾液腺凝集素有抑制的作用.当盐浓度为12～18 g/L时,可增加香螺肌肉凝集素的凝集效价,而当浓度为24～60 g/L时却会抑制肌肉凝集素的凝集活性.