疏水层析结合冷乙醇沉淀纯化人血清白蛋白

将层析技术与冷乙醇工艺相结合用于人血清白蛋白的纯化 ,对各过程所采用的层析介质及层析条件进行了探索 ,得到了一条从人血浆中制备血清白蛋白的新路线 :将一步冷乙醇沉淀后的血浆上清进行脱盐除乙醇 ,用阳离子交换介质CMSepharoseFF以透过式层析的模式吸附非白蛋白组分 ,最后选用ButylSepharoseFF一步疏水层析后所得样品经SDS-PAGE银染显示一条单带 ,分析其纯度大于 99% ,计算工艺收率为 81.2%。与传统冷乙醇工艺相比较 ,该工艺最终样品纯度更高 ,且层析可以在常温下操作 ,易实现自动化控制.     

京津冀地区生态用地稳定性格局及其影响因素

探索生态用地稳定性格局对动态背景下区域生态规划与管理具有重要意义。本文基于2000、2010、2020年京津冀地区生态用地数据基础,提取2000—2010和2010—2020年间稳定性生态用地,借鉴并应用生态用地稳定性指数予以衡量区域生态用地的时空稳定效应,并利用ArcGIS平台空间统计工具对生态用地稳定性空间格局进行分析,最后基于地理探测模型对生态用地稳定性的影响机制及其区域差异进行探索。研究结果显示,(1)2000—2010年和2010—2020年,京津冀地区稳定性生态用地有所减少,集中分布在内蒙古草原生态区和燕山-太行山山地林生态区。(2)两时期生态用地稳定性指数分别为90.85%和83.86%,呈现“西北高、东南低”。生态用地稳定性指数等级结构显示前期极低稳定性和极高稳定性面积占绝对主导,后期极低、高和极高稳定性面积共同主导。生态用地稳定性指数空间格局呈现显著冷热点效应,热点区汇集在燕山-太行山山地林生态区和内蒙古草原生态区,冷点区集中在京津唐城市生态区和华北平原生态区。(3)整体研究区高程、坡度、地貌和土壤类型等地理要素解释力较高;平原区内温度因子解释力度最为突出,地理因素和...     

BMJ:饮用水砷暴露与心血管死亡相关

美国学者的一项研究表明,饮用水砷暴露与心血管死亡率有相关性,并且在吸烟者中尤为显著。论文于2011年5月5日在线发表于《英国医学杂志》(BMJ)。此项前瞻性队列研究共纳入11746例孟加拉受试者,并于2000年测定了受试者尿液和饮用井水中的砷含量。平均随访时间为6.6年。主要     

异色瓢虫成虫冷驯化反应及体内几种酶活力的相关变化

为明确冷驯化反应对异色瓢虫Harmonia axyridis (Pallas) 实验种群成虫耐寒性及其生殖能力的影响, 本研究测定了成虫低温存活率、过冷却点(supercooling point, SCP)、体内含水量及雌虫繁殖能力等。结果表明: 冷驯化（在5℃下诱导3 d, 5 d）后, 成虫再在-5℃下暴露3 d的存活率由对照（预先未进行冷驯化）的46%分别提高至60%和67%, 而诱导10 d后的存活率(51%)反而下降。冷驯化效应在其成虫转移至饲养条件下7 d后就消失。随着低温诱导时间的延长过冷却点及体内含水量均呈现下降趋势, 短时间(5, 10 d)的诱导不能使成虫的SCP明显降低, 但可以使含水量极显著下降。冷驯化后异色瓢虫雌虫产卵前期延长; 虽然冷驯化对雌虫首次产卵量没有影响, 但是随着诱导时间的延长连续观察72 h内单头雌虫累计产卵量却降低。冷驯化过程中成虫体内几种酶活力的检测结果表明: 两种细胞保护酶超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)活性升高, 与新陈代谢有关的乳酸脱氢酶(LDH)及Na⁺, K⁺-ATP酶活性却降低。结果显示, 低温胁迫前异色瓢虫成虫经过不同时间的诱导后有可能提高其低温抵抗能力, 而且冷驯化诱导成虫耐寒性增加是一种复杂的生理生化过程, 这一过程对其生存和繁殖具有重要的适应意义。     

冷应激条件下猪睾丸细胞中RNA结合基序蛋白3过表达对Caspase 3表达的影响

目的：探讨冷应激（32℃）条件下,猪睾丸（ST）细胞系中RNA结合基序蛋白3（RBM3）过表达时凋亡蛋白半胱天冬酶3（Caspase 3）表达量变化情况。方法：利用本实验室成功构建的携带绿色荧光蛋白（GFP）的RBM3过表达慢病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-RBM3和空病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-DEST分别感染ST细胞,作为过表达病毒（OEV）组和空载体病毒（EVV）组,此外还设立野生型细胞（WTC）组作对照,利用实时荧光定量RCR（qPCR）法和Western blot分析法检测各组中RBM3 mRNA和蛋白的表达情况。然后对各组细胞进行37℃以及32℃（2 h、4 h,8 h）的冷应激处理,利用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测各组Caspase 3表达量的变化。结果：OEV组RBM3基因和蛋白相对表达量高于EVV组和WTC组。在37℃以及32℃冷应激实验（2 h、4 h,8 h）中,OEV组Caspase 3表达量显著低于EVV组和WTC组。结论：冷应激ST细胞中RBM3过表达能够显著地降低Caspase 3的表达程度,为RBM3基因具有抵抗低温诱导ST细胞凋亡作用提供实验依据。     

两种方法分离纤维蛋白原效果的比较

为了比较冷乙醇沉淀法和离子交换层析法在分离止血胶成分中的纤维蛋白原的效果,本实验将灭活病毒的步骤加在溶解Nitschmann组分I中进行,结果发现0．3％磷酸三丁酯／1％吐温-80不仅具有灭活病毒的作用,而且还能促进纤维蛋白原的溶解;分别用冷乙醇沉淀法和离子交换层析法分离纤维蛋白原,结果两种方法分离的纤维蛋白原均符合止血胶要求。冷乙醇沉淀法分离虽然凝血因子Ⅷ有一定损失,但纤维蛋白原纯度和回收率均高于离子交换层析法的分离效果,这提示冷乙醇沉淀法较离子交换层析法更适于分离止血胶用纤维蛋白原。     

硫化氢信号能够通过生物钟调控拟南芥对冷胁迫的响应

硫化氢(hydrogen sulfide, H_2S)是继一氧化氮(nitric oxide, NO)与一氧化碳(carbon oxide, CO)之后的第3种气体信号分子,在动植物中均发挥着重要的生理功能。生物钟是生物体的内在计时器,对动植物适应环境和生长发育至关重要。鉴于H_2S与生物钟调控的生理过程有较大的相关性,本文以拟南芥(Arabidopsis thaliana)为实验材料,对二者之间的关系进行了探索。结果发现,外源NaHS(H_2S供体)处理能够上调生物钟相关基因CCA1(circadian clock associated 1)和PRR9(pseudo-response regulator 9)的表达,而且在H_2S生成关键酶编码基因缺失的双突变体lcd/des1中,CCA1与PRR9的峰值表达时间明显滞后。CBFs(c-repeat binding factors)是受CCA1调控的冷胁迫响应基因,其表达也受H_2S的调控。lcd/des1中CBF1和CBF3的峰值表达时间延迟,同时在lcd/des1中CBF1、CBF2和CBF3都下调表达。lcd/des1幼苗对冷胁迫表现出更高的敏感性。本文也对拟南芥内源H_2S生成关键酶L-半胱氨酸脱硫基酶(L-cysteine desulfhydrase, LCD)与脱硫基酶1(desulfhydrase 1, DES1)编码基因的转录水平节律性进行了初步的探索。LCD的表达在1 d内未见明显的变化,而DES1的表达有明显的节律性,在早上8:00达到峰值。综上所述,H_2S能够通过调节CCA1与PRR9基因的表达调控生物钟,进而影响下游靶标CBFs基因的表达以增加拟南芥对冷胁迫的耐受性。     

应用冷Schiff组织化学法检测人体组织脂质过氧化反应的研究

自由基引发的生物膜不饱和脂肪酸脂质过氧化反应涉及多种疾病过程,多年来检测脂质过氧化反应一直沿用生物化学（如硫代巴比妥酸法测定丙二醛）或生物物理技术（如分光光度法测定共轭双烯）。自从冷Schiff组织化学染色技术用于自由基研究以来,使形态学方法研究脂质过氧化反应成为可能,当前,应用冷Schiff组织化学法进行组织细胞的脂质过氧化反应检测大多限于动物实验研究,本研究对多种人体离体新鲜组织的冰冻切片应用冷Schiff组织化学法进行检测,未发现被组织存在组织化学水平上的脂质过氧化反应;胆对被测组织人为施加氧化攻击（用Fe-NADPH促氧化剂孵育）后,肝、肾及胃的泌酸细胞与其它组织相比呈现较明显的脂质过氧化反应;皮肤、脂肪组织几科不出现脂质过氧化反应;甲状腺C细胞、肌肉、骨骼等与钙代谢、贮存及利用相关的组织也出现较明显的脂质过氧化反应。结论：冷Schiff组织化学方法检测人体组织脂持过氧化反应具有简便易行、同时可以形态学定位的优点,在医学生物学、肿瘤学及老年医学研究中具有应用前景。     

核磁共振磁场照射对子代大鼠海马突触形态的影响

研究观察了孕期磁共振磁场照射对子代大鼠海马突触超微结构的影响。SD孕鼠妊娠第12-18d给予0．35T核磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)磁场照射。测量1、2和5月龄雌性仔鼠海马CAl区和齿状回的突触结构参数,用立体计量学方法进行定量测定。结果显示,磁场照射可引起2月龄子代大鼠海马CAl区突触间隙增宽．齿状回突触活性区长度变短、突触界面曲率和活性区面密度减小;5月龄子代大鼠CAl区突触间隙增宽,突触后致密物变薄,突触界面曲率减小,齿状回突触间隙增宽。结果提示,妊娠期接受MRI磁场照射可引起海马突触超微结构的改变。对这些结构变化与行为损害之间的关系进行了讨论。     

冷习服大鼠血管内皮细胞适应性改变与抗冻能力的研究

本文观测了冷习服大鼠及其冻伤后血管内皮细胞（ＶＥＣ）的某些功能的变化。结果表明,与未习服组比,冷习服鼠循环血中ＶＥＣ计数显著增加,血中６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α和ＴＸＢ２含量明显升高,而Ｔ／Ｐ比值接近,血清血管紧张素Ⅰ转换酶（ＡＣＥ）活性减低。冻伤后未习服组这些指标除ＡＣＥ显著降低外,其余均急剧升高;而冷习服组仅见短暂轻微的改变或改变不明显,且其冻足组织活存面积亦显著增加。表明冷习服后,ＶＥＣ发生了代谢更新率加快、功能增强的适应性改变,有利于提高机体对寒冷损伤的应激和修复能力