产类胡萝卜素酵母菌原生质体的制备、再生与诱变

确定了1株产类胡萝卜素红酵母Y-35的原生质体最佳制备条件和再生条件,以及在此基础上的诱变育种,通过实验,初步确定Y-35菌株原生质体形成和再生的适宜条件为;菌龄16h,蜗牛酶浓度1%,30℃处理60min。红酵母Y-35原生原体经紫外线诱变后得到18株诱变菌株,分别测定其生物量,类胡萝卜素含量及产量,获得2株类胡萝卜素产量明显提高的变异菌株RY-10和RY-19。其产量分别比出发菌株提高49%和54%。     

添加物影响花生外植体再生及基因转化

取花生上胚轴为外植体,在农杆菌介导的基因载化过程中,在共育时加入一定量的烟草或马铃薯提取物,在共培养基和分化培养基中分别加入0.179mM的还原型谷胱甘肽（GSH）和0.147mM的VC 0.035mM的VE。进行培养,结果表明,添加15%（W/V）的烟草或马铃薯提取物,胚轴生长状况明显好于对照组,分化率较对照组提高10%-23.5%。自由基清除剂能明显减轻外植体褐化现象,促进外植体再生,GUS检测阳性率最高可达10.2%。     

小麦与燕麦不对称体细胞杂交的研究

以小麦品种济南177的悬浮细胞系(长期继代培养已丧失分化能力)来源的原生质体混合同品种胚性愈伤组织(分化能力较强, 约70%)制备的原生质体为受体, 以经300 mW/cm²紫外线照射0.5, 1, 2, 3, 5 min的普通燕麦愈伤组织(分化频率很低, 约10%)原生质体作供体, 用PEG法诱导融合. 可高频率地获得体细胞杂种细胞系, 并分化获得绿色正常的再生植株, 经荧光原位杂交、 同工酶及5S rDNA间隔序列分析, 确认了它们为体细胞杂种. 单独使用小麦胚性悬浮系或愈伤组织为受体获得的杂种克隆均未能得到绿色植株.     

玉龙草胚性愈伤组织的诱导及植株再生

1　植物名称　玉龙草 (Ｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｊａｐｏｎｉｃｕｓｃｖ .“Ｎａｎｕｓ”)。2　材料类别　嫩芽。3　培养条件　胚性愈伤组织诱导培养基为 :(1)ＭＳ 2 ,4 Ｄ 1.0ｍｇ·Ｌ- 1(单位下同 ) 6 ＢＡ 0 .0 1;(2 )ＭＳ 2 ,4 Ｄ 2 .0 6 ＢＡ 0 .0 1;(3)ＭＳ 2     

甘蓝型油菜DH缺瓣变异株的无性繁殖及缺瓣特性

经游离小孢子培养并加倍获得的甘蓝型油菜 95Z192的DH植株群体中的 1株缺瓣变异株 ,于盛花期取其幼嫩花序轴进行无性繁殖后 ,得到 10个株系的 12 2个植株。移栽于大田 ,于初花期逐株统计主花序上每朵花缺瓣的结果显示 ,此种变异株的缺瓣性状可稳定遗传 ,但单株之间缺瓣比率有明显差异     

山葵未成熟胚离体培养和植株再生

1　植物名称　山葵 (Ｅｕｔｒｅｍａｗａｓａｂｉ)日本品种岛根 3号。2　材料类别　开花 2 0ｄ后的荚果中剥出的未成熟种子 (种皮 未成熟胚 )。3　培养条件　基本培养基为自行设计的“贵山”(代号ＧＳ)配方[1 ] 。 ( 1 )诱导愈伤组织培养基为 :ＧＳ 6 ＢＡ 0 .1ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) 2 ,4 Ｄ 1 ;( 2 )芽分化培养基为 :ＧＳ 6 ＢＡ 0 .5 ＺＴ 0 .5 ＩＢＡ0 .0 1 ;( 3)芽增殖培养基为 :ＧＳ 6 ＢＡ 0 .4;( 4 )生根培养基为 :ＧＳ ＩＢＡ 0 .1 ＮＡＡ 0 .1。以上培养基均含 3%蔗糖 [( 1 )含 2 % ]和 0 .6%琼脂粉 ,ｐＨ5 .8～ 5…     

木锉芦荟愈伤组织的诱导和植株再生

1 植物名称木锉芦荟(Aloe humilis). 2 材料类别幼嫩叶片,带腋芽并已木质化的茎段(粗约1 cm). 3 培养条件愈伤组织诱导与分化培养基:(1)MS+KT 2.9～3.1 mg·L-1(单位下同)+IBA 1;(2)MS+KT 3+IBA 2;(3)MS+KT 2+IBA 2.腋芽萌生培养基:(4)MS+ZT 0.4～ 0.7+IBA 1.生根培养基:(5) 1/2MS+KT3+IBA 1.5～2;(6) 1/2MS+ZT 0.5+IBA 1.2～2.以上培养基均附加3%蔗糖,0.6%琼脂,pH 5.4～5.8,培养温度为 (25±2)℃,光照度 1 500～2 000 lx,光照12 h·d-1.     

小黑杨花粉植株的诱导

1　植物名称　小黑杨 (Ｐｏｐｕｌｕｓｓｉｍｏｎｉｉ×Ｐ .ｎｉ ｇｒａ)。2　材料类别　花药 (ａｎｔｈｅｒ)。3　培养条件　 ( 1 )诱导愈伤组织培养基 :ＭＳ 2 ,4 Ｄ 4ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＫＴ 2。 ( 2 )愈伤组织分化培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ 1 ＮＡＡ 0 .5。当愈伤组织分化出嫩芽后 ,将芽切下转入ＭＨ 6 ＢＡ0 .5 ＮＡＡ 0 .1培养基上 ,其中ＭＨ培养基为ＭＳ的大量元素和有机物 ,ＭＨ培养基的微量元素 ,再加叶酸 (ｆｏｌａｃｉｎ)及生物素 (ｂｉｏｔｉｎ)各 0 .1。( 3)生根培养基 :1 /2ＭＳ ＩＢＡ 0 .4。上述培养基均添加 2 %…     

山苍子的离体培养和植株再生

1　植物名称　山苍子 (Ｌｉｔｓｅａｃｕｂｅｂａ) ,又名木姜子。2　材料类别　成年植株带芽茎段。3　培养条件　所使用的培养基为 :( 1 )ＭＳ 6 ＢＡ3.0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＩＢＡ 0 .5 ;( 2 )ＭＳ 6 ＢＡ2 .0 ＩＢＡ 0 .5 ;( 3)ＭＳ 6 ＢＡ 1 .0 ＫＴ 1 .0 Ｎ     

转苏云金杆菌毒蛋白基因玉米植株的获得及其抗虫性分析

玉米 (ZeamaysL .)转化成功与否与基因型密切相关。在转化过程中 ,除少数模式品种能够形成再生频率较高且易转化的Ⅱ型愈伤组织外 ,大多数栽培品种往往只能够形成再生频率较低且不易转化的Ⅰ型愈伤组织。因此探索Ⅰ型愈伤组织的诱导及其转化条件 ,提高转化效率 ,对直接改良玉米优良自交系具有重要意义。应用基因枪转化技术将苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis)cry1Ac3基因导入玉米优良自交系E2 8及 34 0的Ⅰ型胚性愈伤组织中 ,经过膦丝菌素 (PPT)或潮霉素 (HygB)筛选 ,获得了再生植株。经PCR检测、Southernblot分析及Bt毒蛋白ELISA检测证实 ,外源基因已整合到玉米基因组中 ,并已获得表达。抗虫性分析结果表明 ,部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的抗性。还比较了PPT和HygB两种筛选剂的筛选效果 ,表明PPT筛选的抗性愈伤组织的再生频率要高于HygB筛选的再生频率。