血管内皮生长因子和抗肿瘤血管新生药物研究进展

肿瘤的生长与迁移离不开新血管的形成,这使得抗血管新生成为肿瘤治疗的重要途径之一。血管内皮生长因子（VEGF）是针对内皮细胞作用最强、特异性最高的血管新生促进因子,因而VEGF是抗肿瘤治疗的重要靶点。我们简要介绍了VEGF的一些生物学特点及肿瘤血管新生,着重介绍了一些抗血管新生药物的最新研究成果及其临床应用。     

禽网状内皮组织增生病病毒gp90全长蛋白的原核表达、纯化及其免疫原性分析

摘要：【目的】原核表达免疫原性良好的禽网状内皮组织增生病病毒（( Reticuloendotheliosis virus, REV )gp90蛋白,并制备抗gp90蛋白高效价多克隆血清。【方法】利用PCR技术,以pMD18T-env为模板,扩增得到REV的gp90蛋白编码基因,将其克隆入表达载体pET-28a(+)中,将构建的原核表达质粒pET28-gp90,转化大肠杆菌（Escherichia coli ) BL21 (DE3) 感受态细胞,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后进行gp90蛋     

子宫内膜异位症患者血清VEGF和CRP水平变化及其相关性

目的：探讨子宫内膜异位症患者血清血管内皮生长因子（VEGF）和C-反应蛋白（CRP）的水平变化及其相关性。方法：采用ELISA的方法测定30例III～Ⅳ期子宫内膜异位症患者（其中增生期13例、分泌期17例）和22例非子宫内膜异位症患者（其中增生期10例、分泌期12例）血清VEGF和CRP的水平,并分析两者相关性。结果：子宫内膜异位症组分泌期血清VEGF水平明显高于对照组（P〈0．05）;子宫内膜异位症组增生期血清CRP水平明显高于对照组（P〈0．05）;子宫内膜异位症组增生期和分泌期血清VEGF与CRP水平存在显著的正相关（F0．52,P〈0．05;r=0．44,P〈0．05）。结论：子宫内膜异位症患者血清VEGF、CRP水平的升高说明了过度血管生成和异常炎症反应是子宫内膜异位症的显著特征。     

VEGF与缺血缺氧性脑损伤

缺血缺氧可造成全身多个系统受损,尤其是中枢神经系统,缺血缺氧对脑损害最严重,血管内皮生长因子(VEGF)的血管生成作用、神经保护作用、神经再生作用能在一定程度上改善缺血缺氧性脑损伤,是一种潜在的缺血缺氧保护剂,本文就近年来VEGF在缺血缺氧性脑损伤方面的相关研究综述如下.     

脱细胞牛颈静脉内皮细胞黏附实验研究

目的:探讨去细胞处理后牛颈静脉血管片表面改性方法,增加内皮细胞在材料表面的黏附生长.方法:选取三种表面预衬组分:纤维连接蛋白(Fibronectin)单纯组,纤维连接蛋白+Ⅳ型胶原+明胶混合组,磷酸缓冲液空白组,采用物理包裹法.剪取多步骤去垢剂-酶消化法脱细胞处理的牛颈静脉片,无茵下静态培养7天,标本血管片表面细胞记数,切片染色,扫描电镜检测,比较不同组分预衬对细胞黏附生长的影响.结果:混合组在选取时间点表面细胞数目最多,单纯组次之.第7天HE染色结果显示混合组细胞连接成片,呈单层排布;单纯组表面细胞少量细胞黏附;对照组基本无细胞.扫描电镜显示:单纯组血管片表面细胞稀疏,细胞间无桥接,与下方的纤维结构联结不明显,数目较少;混合预衬组铺连成片,细胞间长梭形有桥接和突起,与去细胞的血管片纤维之间形成连接.结论:去细胞处理的牛颈静脉血管片可生长内皮细胞.经过纤维连接蛋白单独预衬处理的血管片表面,可增强内皮细胞黏附和贴壁生长,三组分混合预衬增强细胞黏附性及贴壁生长方面效果更好.     

红景天对儿茶酚胺损伤大鼠心肌以及对HIF-1α表达的影响

目的:观察红景天对儿茶酚胺损伤大鼠心肌以及对HIF-1α mRNA表达的影响.方法:SD大鼠45只,随机分为异丙肾组(n=15),红景天组(n=15)和对照组(n=15).第六天大鼠处死,测定血清CK-MB、NO,组织病理学检查.RT-2PCR法检测损伤心肌HIF-1α、VEGF、eNOSmRNA的表达.结果:红景天组心肌坏死病理积分较异丙肾组明显降低(P＜0.01),可减轻异丙肾上腺素所致大鼠CK-MB升高(P＜0.05)并且可使异丙肾上腺素心肌损伤大鼠血清NO升高93.8%(P＜0.01).与对照组相比,异丙肾组HIF-1α、VEGF、eNOSmRNA的表达明显增加(P＜0.001);红景天组与异丙肾组比较,HIF-1α、VEGF、eNOSmRNA表达增高(P＜0.001).结论:红景天对儿茶酚胺所致的心肌损害具有明显保护作用,机制可能与上调HIF-1α表达,促进下游VEGF、eNOS等基因的表达,增加血清NO的释放有关.     

外源性雌、孕激素对裸鼠人子宫内膜异位症病灶中MMP-2、TIMP-2及VEGF蛋白表达的影响

目的:探讨雌、孕激素对异位内膜及MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白表达的影响.方法:将育龄妇女正常分泌晚期子宫内膜注入裸鼠盆腹腔,建立EMs裸鼠模型,随机分为四组,分别予雌激素(E)、孕激素(P)、雌激素+孕激素(E+P)及对照(C)组生理盐水肌肉注射.术后18天处死裸鼠,取异位组织,采用免疫组化方法(PV6001/6002法)检测各组异位内膜MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白表达水平,与种植前子宫内膜比较.结果:异位内膜较正常内膜MMP-2、VEGF蛋白表达增强,TIMP-2蛋白表达减弱(P均<0.01);E组、P组、E+P组MMP-2/TIMP-2比值及VEGF蛋白表达均高于C组(P均<0.01).E+P组同E组相比MMP-2/TIMP-2比值及VEGF蛋白表达无差别(P均>0.05).结论:异位内膜的侵袭性和血管新生能力增强,且对激素的反应不同于正常内膜.     

凹顶藻萜类化合物对小鼠H22肿瘤生长及VEGF、PCNA表达的影响

目的:观察凹项藻提取物(Laurenciaterpenoid extract,LET)对接种H22细胞小鼠的肿瘤生长及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.方法:昆明小鼠随机分为5组(10只,组),即模型组、LET低中高剂量组(25、50、100 mg/kg·d-1)、环磷酰胺组(CTX对照组).各组小鼠左前腋下皮下接种H22肝癌细胞,第二天除模型组外,其余4组分别以不同剂量的LET、CTX灌胃,于15天后处死,完整剥离出肿瘤,称重,计算抑瘤率.免疫组化法测定肿瘤组织中VEGF、PCNA的表达.结果:LET低、中、高剂量组小鼠H22肿瘤质量增长均较模型组缓慢(P<0.05),抑瘤率分别为27.5%、34.9%、41.4%;同时LET中、高剂量组VEGF阳性表达较模型组显著减少(P<0.05),低剂量组未见明显变化,但LET各剂量组PCNA阳性表达较模型组显著减少(P<0.05).结论:LET各剂量组可以抑制小鼠H22肿瘤的生长,具有较高的抑瘤活性,且中、高剂量组能抑制VEGF的表达(P<0.05),低、中、高剂量组能抑制PCNA的表达(P<0.05).LET对肿瘤组织VEGF、PCNA表达的抑制作用可能是其抗H22肿瘤及抗血管生成的一个重要原因.     

血管内皮生长因子受体-2所介导信号通路的研究进展

血管新生是许多生理和病理进程发生的重要机理．在生物体内,血管新生需经过多步精细调控历程,现有研究表明,血管内皮生长因子(VEGF)及其受体蛋白酪氨酸激酶,尤其是血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)所介导的信号级联通路是其中关键性的调节途径．VEGF/VEGFR-2所介导的信号级联通路可以调控血管内皮细胞的增殖、迁移、存活和通透性的改变,促进血管的新生．VEGF与VEGFR-2的胞外区特异性结合后,引起受体的二聚化和自身的交互磷酸化,使胞内特定的酪氨酸残基磷酸化．下游信号蛋白可以通过其Src同源结构域-2(SH2)与VEGFR-2结合,随后激活下游的效应蛋白,调控内皮细胞的生物学活性．此外,VEGF/VEGFR-2信号通路还可以下调树突细胞(DC)的活性．对VEGF/VEGFR-2信号通路作用的深入了解,将有助于新药的研发．     

大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立及内皮一氧化氮合酶的表达

非酒精性脂肪肝是一种以肝细胞脂肪变性和脂肪储集为特征的综合症,有潜在发展成终末期肝病的危险,但目前该病病因和发病机制仍然不清楚,体外有效动物模型的构建对于研究疾病的发生、发展及防治都十分重要。本实验通过高脂、高胆固醇饮食喂养SD大鼠,探讨高脂、高胆固醇饮食在诱导非酒精性脂肪肝中的作用,