全文获取类型
收费全文 | 2184篇 |
免费 | 80篇 |
国内免费 | 603篇 |
出版年
2024年 | 11篇 |
2023年 | 49篇 |
2022年 | 67篇 |
2021年 | 56篇 |
2020年 | 54篇 |
2019年 | 65篇 |
2018年 | 50篇 |
2017年 | 55篇 |
2016年 | 51篇 |
2015年 | 63篇 |
2014年 | 125篇 |
2013年 | 84篇 |
2012年 | 107篇 |
2011年 | 143篇 |
2010年 | 126篇 |
2009年 | 126篇 |
2008年 | 152篇 |
2007年 | 97篇 |
2006年 | 117篇 |
2005年 | 114篇 |
2004年 | 158篇 |
2003年 | 105篇 |
2002年 | 99篇 |
2001年 | 104篇 |
2000年 | 72篇 |
1999年 | 74篇 |
1998年 | 43篇 |
1997年 | 67篇 |
1996年 | 61篇 |
1995年 | 29篇 |
1994年 | 37篇 |
1993年 | 44篇 |
1992年 | 63篇 |
1991年 | 53篇 |
1990年 | 31篇 |
1989年 | 44篇 |
1988年 | 12篇 |
1987年 | 15篇 |
1986年 | 9篇 |
1985年 | 16篇 |
1984年 | 5篇 |
1983年 | 5篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 4篇 |
1980年 | 1篇 |
1966年 | 1篇 |
1963年 | 2篇 |
排序方式: 共有2867条查询结果,搜索用时 15 毫秒
991.
人免疫球蛋白中肠道病毒71型中和抗体效价的测定 总被引:5,自引:0,他引:5
采用经典微量细胞病变法,应用近两年分离自中国手足口病(HFMD)高发区的3株肠道病毒71型(EV71)病毒株,对中国不同血液制品厂家生产的35批人免疫球蛋白制品进行抗-EV71中和效价检测。结果显示,3株不同EV71病毒株间的抗-EV71中和效价差异均在4倍以内,差异无显著的统计学意义(F=2.323,P0.05)。根据这3株毒株检测结果判定,35批人免疫球蛋白的抗-EV71均为阳性,肌肉注射用免疫球蛋白(简称肌丙)的抗-EV71-GMTs(525.9)显著高于静脉注射用免疫球蛋白(简称静丙)的GMTs(252.3,F=66.518,P0.01)。30批静丙的抗-EV71-GMTs中和效价分布在128.0~384.0之间。应开展原料血浆中抗-EV71中和效价的筛选,研制高效价的EV71特异性免疫球蛋白制品,用于HFMD的治疗和预防。 相似文献
992.
993.
棉铃虫单核衣壳核多角体病毒3个bro基因的原核表达与抗体制备 总被引:1,自引:0,他引:1
根据棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(HaSNPV)基因组全序列,设计引物,用PCR的方法扩增得到bro-a、bro-b和bro-c三个全长基因.将这三个基因的片段分别克隆至原核表达载体pProExHTb,经IPTG诱导,在E.coli DH50菌株中得到了目的基因的高效表达.表达的目的蛋白大小分别为32kDa、64kDa和58kDa,经SDS-PAGE分离纯化,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体.抗体经12500倍稀释后用于WestemBlot分析,获得特异性显色信号,所制备的三种抗体适合用作bro基因的功能的进一步研究. 相似文献
994.
着-COP蛋白是真核生物分泌途径中COP玉有被小泡的一个亚基。本研究利用PCR技术扩增水稻着-c op基因(Os着-c op 1)的ORF(开放阅读框),并克隆到原核表达载体pET-23d上,将表达载体pET-Os着-cop1转入大肠杆菌BL21(DE3),以1.0 mmol/L的IPTG (isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导表达重组蛋白,然后以重组蛋白作为抗原免疫家兔,制备多克隆抗体。SDS-PAGE电泳分析结果表明,成功诱导表达了分子量约为35 kD的重组蛋白,Western blot检测表明,免疫家兔的抗血清与水稻幼穗总蛋白杂交信号较好。Os着-COP1抗体的制备有助于研究该基因及COPI小泡在水稻中的功能。 相似文献
995.
为筛选用于我国HIV疫苗的候选基因,利用痘苗病毒载体构建表达HIV-1 B′亚型中国流行株RL42的Gag蛋白的重组病毒rVV-RL42gag,并免疫BALB/c小鼠,检测其诱导的特异性抗体及中和抗体,同时检测其诱导的特异性CTL及与中国流行株C(B′/C重组)亚型和国际流行株A亚型之间的CTL交叉反应.结果显示:重组病毒能很好地表达Gag蛋白,它具有与7株单克隆抗体结合的抗体表位;电镜下可观察到Gag蛋白形成的颗粒.rVV-RL42gag免疫小鼠后能诱导产生高滴度的特异性抗体和CTL,抗体具一定的中和活性,且检测到与C(B′/C重组)亚型和国际流行株A亚型之间的CTL交叉反应.这些结果表明,rVV-RL42gag具有良好的免疫原性,可进一步构建表达HIV B′亚型中国流行株RL42的Gag蛋白的重组痘苗病毒作为候选疫苗. 相似文献
996.
HIV感染早期病毒p24蛋白的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立敏感、特异的检测血清中HIV-p24蛋白的方法,作为HIV感染早期即窗口期的监测手段。方法:用纯化的p24蛋白免疫小鼠及家兔,获得单克隆及多克隆抗体,经DEAE-52阴离子交换柱纯化后,标记辣根过氧化物酶,建立ELISA双抗体夹心及间接双抗体夹心方法,检测HIV-p24蛋白。结果:包被单抗、标记多抗或包被多抗、标记单抗,均能特异地检出系列稀释的p24蛋白,包被混合单抗较包被多抗更敏感;经标记的抗种属抗体放大可明显提高检测的敏感性。结论:建立了敏感、特异的检测p24蛋白的双抗体夹心法,间接放大方法可检出50pg/mL的HIV-p24蛋白,检测敏感性与国际同类产品相似。 相似文献
997.
水稻类受体激酶OsCR4的抗体制备及特异性检测 总被引:3,自引:0,他引:3
运用生物信息学的方法对水稻类受体激酶OsCR4的抗原性进行分析,选取胞外部分片段与GST融合,在细菌大规模诱导该融合蛋白,利用GST sepharose进行亲和层析纯化,所得蛋白使用SDS-PAGE结合KCl/DTT染色切胶的方法得到收集。以此融合蛋白作为抗原免疫新西兰兔,获得了1:512,000效价的多克隆抗体,该抗体可特异识别水稻叶片微粒体组分中的OsCR4蛋白。 相似文献
998.
抗茉莉酸甲酯单抗制备及小麦和黑麦草颖花中茉莉酸含量的测定 总被引:4,自引:0,他引:4
本文报道了识别茉莉酸甲酯(MeJA)的单克隆抗体的制备。该抗体源于以茉莉酸的C-1位羧基为偶联位点,钥孔娥血蓝蛋白为载体合成的免疫原。该抗体对甲酯化茉莉酸的识别力明显强于对茉莉酸(JA)的;JA分子中戊烯侧链的完整性对该抗体的识别力有很大影响。于该侧链的C-9和C-10位加氢(形成Dihydro-JA),或除去C-12(形成JAS-25),都会大幅度降低该抗体的结合活性。该抗体对亚麻酸、南瓜酸、冠毒素及Theobroxide均无识别力。用该抗体建立了定量检测JA的固相抗体型酶联免疫吸附定量测定法,检测范围为2.06-500 pmol MeJA。并探查了小麦及黑麦草开颖前后颖花的JA含量。发现随着开颖时间的临近,JA含量显著升高;颖花开放时达到最大值,随后急剧下降。 相似文献
999.
目的表达猴B病毒糖蛋白D(BVgD)并对其抗原性进行初步研究。方法应用体外原核表达BVgD,继而进行Ni离子亲和层析纯化。采用Western blotting对蛋白抗原性进行分析,评估其抗原潜力。结果完成了对BVgD的小量表达和纯化。Western blotting结果表明表达出的重组蛋白BVgD具有特异性结合猴B病毒抗体的能力。结论BVgD重组蛋白具有良好的抗原性,与HSV-1抗体无交叉反应。具有进一步开发的潜力,也为BVgD免疫原性等方面的进一步研究提供了条件。 相似文献
1000.