家蚕蜕皮液蛋白质双向电泳及质谱分析

蜕皮液是存在于新旧表皮之间的一层液体,在昆虫蜕皮和变态发育的过程中发挥了重要的作用。为进一步探究家蚕蜕皮液的功能,利用双向电泳技术对家蚕预蛹期及羽化前期的蜕皮液的蛋白质进行了分析,结果表明,预蛹期及羽化前期的蜕皮液中分别可以检测出超过200个蛋白点,它们主要分布在等电点4-9、分子量10-180 kDa之间。利用MALDI TOF/TOF对羽化前期蜕皮液的42个蛋白点进行了鉴定分析,结果表明34个蛋白点成功得到了鉴定,它们主要包括载脂蛋白类、蛋白酶与蛋白酶抑制剂、免疫相关蛋白、几丁质结合蛋白等,部分蛋白在预蛹期的蜕皮液和羽化前的蜕皮液之间存在明显的差异表达。为了进一步验证蛋白质组分析的结果,对其中1个差异表达明显的蛋白质Apolipoprotein D进行了进一步的分析,Q-PCR的结果表明,该蛋白主要在化蛹第1–4天存在高表达,其在羽化前蜕皮液中的高度累积暗示了它可能参与了家蚕羽化变态的过程。以上研究结果进一步丰富了人们对蜕皮液蛋白质的认识,为深入研究蜕皮液蛋白质的功能提供了一些参考。     

分枝杆菌细胞裂解液催化甾体激素C_(1,2)位脱氢反应的研究

9β,11β-环氧-17α,21-二羟基-16β-甲基孕-1,4-二烯-3,20-二酮(Ⅳ)是生产9-氟甾体激素的关键前体,以9β,11β-环氧-17α,21-二羟基-16β-甲基孕-4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯(Ⅰ)为底物合成Ⅳ是工业化生产Ⅳ的重要方法。通过比较分枝杆菌全细胞转化法与细胞裂解液转化法,发现分枝杆菌全细胞只能将Ⅰ转化为9β,11β-环氧-17α,21-二羟基-16β-甲基孕-4-烯-3,20-二酮(Ⅱ),而细胞裂解液可以有效地将Ⅰ转化为Ⅳ,其反应机制为底物Ⅰ自发水解为中间体Ⅱ,Ⅱ在C_(1,2)位脱氢酶(KSTD)的催化作用下发生C_(1,2)位脱氢反应生成产物Ⅳ。为进一步提高产物Ⅳ的转化率,利用基因工程手段在分枝杆菌中分别过表达编码KSTD的关键基因:kst D、kst D3和kstD_M,提高脱氢反应效率,结果表明1 g/L底物Ⅰ在pH7.0的重组菌株MS136-kst D_M细胞裂解液中反应45h,Ⅳ的转化率为78.4%,比出发菌株提高了38.9%;并优化缓冲液pH,提高反应速率,结果表明1 g/L底物Ⅰ在pH7.5的重组菌株MS136-kstD_M细胞裂解液中反应45 h,Ⅳ的转化率为92.8%,比出发菌株提高了63.4%。     

虎斑游蛇颈背部皮下腺液致动物死亡观察

多年来 ,在捕蛇中经常发现虎斑游蛇颈背部在挣扎过程中挤压出一种乳黄色粘液 ,手触感粘滑液体。解剖虎斑游蛇发现颈背部背鳞皮下长有两串米粒大小腺囊 ,充盈时带有乳黄色腺液 ,腺液排空后肉色囊状 ,长约 3.0 cm,宽 0 .8cm,左右对称两排似葡萄样腺体 ,无腺导管与口腔牙基连接 ,口开在脊鳞鳞片之间绞合区 ,经挤压分泌出乳黄色或带有血丝样乳白色不透明粘稠状液体 ,用生理盐水稀释振摇后不易起泡沫。作者用虎斑游蛇的这种皮下腺体分泌液做动物试验 ,现报告如下。1　实验材料与方法　　实验于 2 0 0 2年 4月 1日上午 9:0 0在龙岩市黄晓军中医外…     

Gas7在大鼠关节软骨中的表达及意义

目的探讨生长休止蛋白7（Gas7）在成年大鼠关节软骨中的表达及意义。方法雄性SD大鼠（3个月、12个月）各12只。取膝关节和股骨上端关节部分,经脱钙石蜡包埋并切片,采用HE染色和免疫组化SABC法检测。检测各关节软骨组织中Gas7的表达及其定位。结果关节软骨切线层与移行层Gas7的表达呈现强阳性,而在辐射层及软骨钙化层则弱阳性或阴性。结论Gas7在成年大鼠关节软骨各层细胞的表达不同,可能与各层软骨细胞的生长发育及代谢状况有关     

草履虫活体观察——体积定量法的进一步完善

尾草履虫Paramecium caudatun,属于原生动物纤毛纲,一直是动物学实验中不可缺少的实验材料.由于虫体游动快速,给活体观察实验带来了困难.近年来有一些关于草履虫观察方法的报导(黄丽清,2000;龚军辉,2003;吴美仙,2003;马惠钦等,2006;杨丽红,魏开,2007),但是这些方法仍具有一定的局限性.本研究室在前人工作的基础上,总结并报告了活体观察草履虫的一套方法,包括体积定量法、矿物油封闭法和脱纤毛法(杨仙玉等,2008).体积定量法中,使用了22×22 mm2规格的盖玻片,观察效果良好.但是利用体积定量法对草履虫进行观察时,使用不同规格的盖玻片所需草履虫培养液的体积不同.本文针对4种规格的盖玻片,对所需最适草履虫培养液的体积进行了研究,扩充了体积定量法,为观察活体草履虫带来了更大的方便.     

MR水激励序列显示膝关节软骨的临床应用研究

目的：探讨三维快速梯度回波水激励膝关节软骨成像序列（3D-FFE-WATS）相对于三维快速梯度回波预饱和反转恢复法脂肪抑制序列（3D-FFE-SPIR）在显示膝关节软骨方面的优势,选择显示膝关节软骨的最佳序列。方法：应用3D-FFE-WATS及3D-FFE-SPIR序列组合对20名志愿者及30例疑诊关节软骨损伤的单膝关节进行检查,获得膝关节各软骨的3D图像,并利用3D最大密度投影法（MIP）进行横断面和冠状面3D重建。分析上述2种序列对软骨病变的显示及检出能力,计算其对关节软骨的信噪比（SNR）和对比噪声比（CNR）,并进行统计学分析。结果：两序列在显示膝关节软骨SNR方面,无统计学意义（P〉0.05）;两种序列在显示软骨与关节液的CNR、软骨与骨皮质的CNR、软骨与骨髓的CNR、软骨与肌肉的CNR差异方面t值分别为（-30.619;2.348;-2.408;2.216）,有统计学意义（P〈0.05）。结论：3D-FFE-WATS序列可作为膝关节软骨成像的首选序列。     

柠檬烯复合液对油桃采后保鲜效果的影响

用柠檬烯复合液浸泡油桃3min,研究柠檬烯复合液对油桃采后贮藏期间鲜食品质及营养指标的影响。试验结果表明,各处理与对照相比,均能明显地抑制油桃的腐烂变质,减缓油桃维生素C、可溶性固形物、可滴定酸的消耗和分解,使油桃原有营养指标缓慢减少的情况下,延长油桃鲜食的供应期,提高其耐贮藏性。     

蚯蚓野外采样方法评述

蚯蚓作为土壤生态系统的关键组成部分,不但可以改善土壤结构,而且与许多生物化学养分循环直接相关,对土壤质量改善和土壤生产力提高起到至关重要的作用.然而,蚯蚓野外采样方法的系统研究和评估还比较缺乏,在国内尤其少见.本文综述了目前国内外常见蚯蚓野外采样方法的操作过程、优缺点、有效性以及对蚯蚓种群特征研究结果可能产生的影响,认为在允许扰动土壤的区域,利用驱虫剂与手拣法相结合进行蚯蚓采样能够较为准确地反映蚯蚓种群和生物量的真实特征;在不能扰动土壤的区域异硫氰酸烯丙酯(AITC)溶液方法是最佳选择.     

再谈叶绿体色素提取及分离实验的原理与改进

叶绿体色素的提取分离实验是高中生物学的一个重要实验,学生进行实验时成功率不是很高。简介了该实验的原理,对常见问题进行分析并提出解决办法,特别是在色素提取过程中进行了较大改进,增加了乙酸乙酯溶解胡萝卜素和色素萃取步骤,既提高了实验的成功率．又体现了不同学科知识之间的横向联系。     

睡眠剥夺对大鼠行为学及咀嚼肌肌电图的影响

目的：颞下颌关节紊乱病是口腔科的一种常见病和多发病,精神心理因素是颞下颌关节紊乱病的一个主要病因。本文通过观察睡眠剥夺对大鼠行为学及咀嚼肌肌电图的影响,探讨睡眠剥夺在颞下颌关节紊乱病发病中的作用。方法：35只Wistar大鼠,随机分为5组：睡眠剥夺1d组、5d组、9d组、正常对照组和大平台对照组。采用改良多平台睡眠剥夺法（modified multiple plat—formmethod,MMPM）建立大鼠SD模型,观察大鼠行为学及咀嚼肌肌电图的变化。结果：睡眠剥夺1d组和5d组在旷场实验水平得分和垂直得分上均高于对照组,而睡眠剥夺9d组均低于对照组;睡眠剥夺1d、5d和9d组在松弛状态和紧咬状态时颞肌前后束及咬肌的电位均明显高于对照组,且两侧无明显差别,同时,睡眠剥夺组双侧颞肌和咬肌的肌电图静息期较对照组显著延长。结论：睡眠剥夺可使大鼠行为学发生改变并对咀嚼肌肌电图造成影响,这可能是颞下颌关节紊乱病的病因之一,为我们对颞下颌关节紊乱病的预防和治疗提供了一定的理论指导。