泛素连接酶APC/C参与的泛素化与细胞周期调节

后期促进复合物/细胞周期体（anaphase promoting complex/cyclosome,APC/C）是一个多功能的泛素连接酶,参与细胞周期、代谢、DNA损伤修复、细胞自噬、凋亡、衰老及肿瘤发生等多种生物学过程。泛素化作为一种重要的翻译后修饰,可通过泛素-蛋白酶体系统（ubiquitin-proteasome system, UPS）调控蛋白质的降解。APC/C的分子量巨大,由多个亚基组成,在细胞周期调控中具有重要地位,可以通过介导细胞周期相关蛋白质的泛素化降解从而精确调控细胞周期的转换,并受共激活分子CDC20或CDH1的调控。了解APC/C的结构和功能,对于研究细胞周期及蛋白质翻译后修饰等生物学事件至关重要。近年,对APC/C分子结构和组成的解析工作取得了极大的进展,其在肿瘤中的作用及潜在的治疗应用也受到了关注。本文将着重对APC/C的组成和结构、参与泛素化的具体过程、在细胞周期中的调控和被调控机制以及参与肿瘤生成的最新研究进展进行综述。     

聚乙二醇20k修饰与转铁蛋白偶联睫状神经营养因子的生物活性对比研究

为了延长重组睫状神经营养因子在体内的保留半衰期,基于CNTF中天然的游离半胱氨酸残基,在前期工作中采用聚乙二醇修饰和转铁蛋白偶联的两种方式对CNTF进行了改造。此后又采用常规分析手段对PEG20k-CNTF和Tf-PEG5k-CNTF进行对比表征。高效凝胶过滤和动态光散射分析结果显示两者拥有相近的表观分子体积。细胞试验结果显示两种耦合物的活性分别下降至未修饰CNTF的50.6%和65.8%。抗体CNTF抗体亲和力结果显示PEG20k修饰后亲合力下降至原蛋白的3.8%,转铁蛋白偶联后保留89.9%原蛋白亲合力。药代动力学结果显示PEG20k-CNTF和Tf-PEG5k-CNTF在SD大鼠血液中的保留半衰期分别为5.34±0.26和8.65±0.60小时,与未修饰rh CNTF相比延长了约21.4倍和34.6倍。药效学结果显示在每周两次每次1.0 mg/kg(rh CNTF等量)的给药频率和剂量下,PEG20k-CNTF比Tf-PEG5k-CNTF更显著地降低实验小鼠体重。     

硫化氢介导的S-巯基化修饰及其化学检测技术

硫化氢(hydrogen sulfide, H₂S)是继一氧化氮和一氧化碳之后的第3种内源性气体信号分子,通过影响细胞信号通路调节机体各个系统,具有广泛的生理和病理作用。近年的研究发现,H₂S的作用主要通过对靶蛋白进行S-巯基化修饰,改变其结构,影响其活性、稳定性以及蛋白质之间互相作用,进而调控细胞内信号通路及相关生物学过程。本文基于国内外对S-巯基化修饰的研究,主要综述了：S-巯基化修饰的研究现状,详细总结了目前已揭示S-巯基化修饰及其具体半胱氨酸(cysteine, Cys)位点的研究,并进一步总结了S-巯基化修饰与S-亚硝基修饰之间的关系;S-巯基化修饰的反应类型,3种化学检测(马来酰亚胺法、改良生物素转换法和标记转换法)方法的检测原理和特点,通过S-巯基化修饰检测的条件和应用范围,将这3种方法进行对比,并对各方法在检测过程中应注意的事项进行了讨论。根据作者在S-巯基化修饰研究方面积累的经验,重点阐述马来酰亚胺法检测过程中,细胞和组织样品的制备及其较详细的实验步骤。此外,本文还讨论了当前S-巯基化修饰检测方法存在的不足及该领域未来亟待解...     

同一课题组两篇Nature文章解释组蛋白修饰调节转录的新机制

DNA的转录有赖于两大对立力量的较量,一种为激活因子,通过乙酰化修饰组蛋白,它们可以松散DNA的螺旋结构,有利于RNA聚合酶的结合;另一种是抑制因子,它们可以修饰组蛋白,主要是组蛋白的甲基化修饰,从而招募去乙酰化酶,去掉激活类修饰,进而增加染色质的屏障作用。这种平衡一旦被打破就会导致     

类黄酮化合物防治动脉粥样硬化的研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)可导致一系列心脑血管疾病,如冠心病和中风等,严重威胁人们的健康。在AS早期病变中,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)的氧化修饰起着关键作用。已知类黄酮化合物是优良的活性氧自由基清除剂和生物抗氧化剂。类黄酮化合物能防止LDL-c的氧化修饰,主要通过:清除自由基;螯合金属离子;保护内源性抗氧化物质,调节细胞抗氧化状态起作用。在AS发病过程中伴随炎症,类黄酮化合物有抗炎和抗血小板凝集的作用,进而抑制炎症因子的生成。不同种类的类黄酮化合物结构差异对AS作用有着明显差异,存在特定的构效关系。本文就植物类黄酮化合物防治AS的机理进展做一综述。     

Purification of lipase from Aspergillus niger and its characterization analysis

从黑曲霉发酵液中经硫酸铵分级沉淀,Phenyl-Sepharose疏水柱层析,DEAE-Sepharose 4B阴离子交换柱得到电泳纯的脂肪酶,纯化倍数达10倍,回收率50％.对脂肪酶的性质分析表明:该酶分子质量约为35 kDa,最适温度和最适pH分别为37℃和9.5,50℃以下和pH6.0～11.0之间保持稳定,属于碱性脂肪酶.Mg2+、Ca2+、Cu2+、Zn2+、Co2+、Mn2+对该酶有激活作用,而Al3+、Fe2+、Fe3+对酶有严重抑制作用.变性剂盐酸胍和脲对其未见显著影响,而SDS强烈抑制其酶活.用不同氨基酸修饰剂对酶进行修饰,其中NBS和PMSF强烈抑制该酶活性,NBSF和DTT在低浓度下对酶活影响不大,2,3-丁二酮在高浓度下影响其活性.外加稳定剂如NaCl、PEG、甘油、山梨醇、海藻酸钠,均可不同程度的延长脂肪酶的半衰期.在一定质量比条件下,该酶有良好的抗蛋白酶性质.     

木香药材活性成分及其结构修饰研究进展

本文基于木香的主要化学成分,重点考察了木香中具有明显抗菌、抗肿瘤等药效作用的去氢木香内酯和木香烯内酯的药理研究成果,并以增加药效为目的,综述了去氢木香内酯和木香烯内酯结构修饰和衍生方法的研究进展。     

一氧化氮的功能及其作用机制(Ⅱ)——蛋白质巯基亚硝基化修饰

一氧化氮的功能多样,其作用机制也是复杂而相互关联的,是多靶点、多机制同时作用的调控网络。除了经典的cGMP依赖的信号通路外,一氧化氮还能通过对蛋白质的半胱氨酸巯基进行蛋白质翻译后修饰而起作用。蛋白质巯基亚硝基化修饰(protein S-nitrosation)是活性氮对蛋白质半胱氨酸巯基的一种蛋白质翻译后修饰,在一氧化氮的作用机制中占有重要位置。本综述简要总结蛋白质巯基亚硝基化修饰的功能及作用机制。     

“第二届模式生物与人类健康研讨会”通知

模式生物在生物学研究中具有不可替代的重要作用。遗传修饰模式植物和模式动物的广泛应用极大地促进了人类对动植物基本生物学过程遗传调控机制的认识。中国遗传学会定于2012年3月29-31日在杭州市举办主题为"模式生