SYBR Green实时荧光定量PCR快速检测口腔幽门螺杆菌

目的建立一种快速、灵敏、特异的鉴定幽门螺杆菌实时荧光定量PCR方法。方法利用SYBR Green实时荧光定量PCR反应体系对口腔幽门螺杆菌进行检测。鉴定结果与临床常规鉴定方法相比较,评价其敏感度、特异度及重复性。结果通过48例样品的检测,结果显示实时荧光定量PCR法检测标本的鉴定结果与常规PCR鉴定方法的结果对比,特异度为100%,敏感度为100%;最小能检测到102个拷贝数的重组质粒;批内重复试验和批间重复试验结果均与常规鉴定方法结果相符。结论实时荧光定量PCR法鉴定口腔幽门螺杆菌,特异度和敏感度高,重复性好,且快速、简便。该方法有望成为检测口腔幽门螺杆菌感染的一种快速有效的方法。     

RT-PCR方法同步检测兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)两种主要病毒

建立并优化了以18S rRNA为内参照的特异性检测兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)两种主要病毒:黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)的三重RT-PCR体系。结果表明,52.5°C的退火温度、0.025 U/μL的Taq DNA聚合酶、0.6 mmol/L的dNTP浓度、4 mmol/L的Mg2+浓度、0.4μmol/L的各引物浓度以及30个循环等是三重PCR体系扩增的最佳条件;同时用该优化体系检测了兰州百合不同取样部位的病毒差异,发现LSV在不同取样部位的特异扩增条带的强度比较一致,而CMV差距相对较大,外鳞片CMV相对含量在整个感病植株中最高。为兰州百合主要病毒检测、脱毒组培快繁提供了技术支撑。     

追思田崎一二（Tasaki Ichji）先生

世界著名神经生物学家田崎一二先生于2009年1月4日在美国马里兰州与世长辞,享年98岁。先生逝世的讣报当即由日本滨松医科大学的寺川进教授用e-mail传送给我了。因我正在住医院治疗期间,而未能致电吊唁。     

百合生殖细胞和精细胞的大量制备及其蛋白组成的比较

新鲜的或低温贮存的兰州百合(Lilium davidii Duch.)花粉,在BKS15中萌发,分别收集萌发5h和30h的花粉管,采用低渗冲击胀破和percoll密度梯度离心纯化等方法,获得批量纯化的生殖细胞和精细胞。用10%三氯乙酸和丙酮沉淀制备生殖细胞和精细胞的蛋白质,用SDS-PAGE对两种细胞蛋白质进行比较。结果表明,二者在蛋白质组成成分上没有明显差异;但在蛋白质的含量上有两种成分差异显著,即:精细胞中的40KD蛋白多于生殖细胞;而98KD蛋白又少于生殖细胞。对40KD和98KD蛋白质的可能生理功能进行了讨论。     

兰州城区大气细菌污染分布及区系组成

对兰州城区２１０．５６ｋｍ￣２的范围近地面空间大气细菌污染的分布及区系组成进行了检测。根据城区地形及生态环境的特点设置六个采样点,在不同采样点挑取不同培养基上的细菌菌落做鉴定,共鉴定１１４株细菌,分属于八个属,球菌及部份杆菌鉴定到种。兰州城区大气优势菌为微球菌属、芽孢杆菌属和葡萄球菌属。     

兰州百合精细胞特异蛋白的研究

通过低渗冲击及Percoll密度梯度离心的方法,成功地分离并纯化了兰州百合(Lilium davidiiDuch.)生活的生殖细胞及精细胞。从精细胞、生殖细胞及叶片中提取了全蛋白,并通过双向电泳技术对它们进行了比较。在双向电泳图谱上精细胞比生殖细胞显示更多的蛋白斑点,特别是在碱性端。通过混合酶解及离心,分离了生活的叶肉原生质体。用生物素的琥珀酰胺酯衍生物(NHS-biotin)对精细胞、生殖细胞及完整的叶肉原生质体质膜蛋白进行标记,然后进行Western blot分析,用辣根过氧化物酶酶标链霉抗生物素蛋白及其底物4-氯-1-萘酚反应显色,比较了3种质膜蛋白。发现分子量为46kD及50kD的两种蛋白是精细胞质膜特异的。在双向电泳图谱上也可找到与这两种蛋白相对应的斑点,它们很可能与受精过程中精卵的识别有关。     

兰州百合的胚囊母细胞

采集田间生长良好的兰州百合 (Lilium davidiivar.unicolor)幼小花蕾 ,剥去 6片花被 ,留下 6个幼小的雄蕊和夹生于其中的幼嫩子房一起固定 ,经整体染色、石蜡包埋后进行横切 ,最后制成玻片标本。镜检后 ,选择最理想的胚珠原基和胚囊母细胞的纵切面 ,用彩色胶卷进行显微拍照。封面图 :显示胚珠原基凸起的一团珠心组织 ,是细胞经过多次有丝分裂长大而成的 ,但由于珠心组织左右生长不均衡 ,左侧生长快于右侧 ,使之向右弯曲 ,以后将发育为倒生胚珠。珠心组织先端表皮内的大型孢原细胞已直接长大发育为大型的大孢子母细胞 (又称胚囊母细胞 ) ,胞…     

记兰州盆地第三纪中期的爪兽(奇蹄目)化石

记述了兰州盆地新发现的三种爪兽化石：Schizotheriumordosium,Phyllotillonhuangheensissp．nov．和Chalicotheriinae亚科未定属种的一类。在咸水河组下段南坡坪地方动物群（早渐新世晚期）中发现S.ordosium。这个种的材料较多,其中有保存完好的下颌吻部。这使我们第一次了解了这个属的吻部的构造：吻部很长、具大的铲形下门齿和双叶形的下犬齿．在咸水河组中段（早中新世）张家坪地方动物群中发现了Phyllotillonhuangheensis和Chalicotheriinaegen．etsp．indet。前者比巴基斯坦Bugti层中的P.naricus个体稍小,形态上也更原始些。这可能表明,张家坪地方动物群在时代上比Bngti稍早。后一类爪兽的性质还不很清楚,但Chalicotheriinae亚科在我国早中新世的出现则无疑义。     

兰州百合器官离体培养外植体位置效应观察

探讨兰州百合 (Liliumdavidiivar.unicolor)鳞茎鳞片、叶片和根的不同切段的培养效应。结果表明 :其切段不定芽的分化速度和数量是下段 >中段 >上段。芽的诱导和增殖的最适外植体为鳞茎鳞片 ,兰州百合离体培养中鳞片不定芽诱导和快速繁殖的培养基为MS BA2mg L NAA 0 2mg L ,增殖培养基与诱导培养基相同 ,3周左右不定芽开始分化。叶和根不同部位中不定芽的发育能力大体与鳞茎鳞片一致 ,但低于鳞片 ,较适宜的培养基为MS BA2mg L NAA 0 4mg L ,生根培养基为 1 2MS NAA 0 3mg L ,约 15d生根 ,生根率大于95 %。月增殖率为 1∶4 ,整个繁殖周期约需 3个月。     

兰州百合小孢子母细胞减数分裂异常现象的观察

对兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)小孢子母细胞减数分裂异常进行了研究,发现存在不等二价体、同源染色体早分离、染色体桥、不均等分离、滞后染色体、核外染色体、微核等。分析了这些异常形成的可能机制及对正常小孢子形成的影响。人工花粉萌发实验表明：小孢子母细胞减数分裂异常是导致花粉败育的主要原因。认为兰州百合长期行无性繁殖引起染色体结构变异,导致减数分裂异常。