猪瘟病毒石门株特异cDNA片段的扩增与序列分析

以猪瘟病毒感染细胞中提取的细胞总ＲＮＡ为模板,应用反转录─聚合酶链反应,在化学合成的两对特异引物引导下,成功地扩增出了两个石门株的ｃＤＮＡ片段。电泳证明它们的大小与预计的３４６ｂｐ和１２０ｂｐ完全一致。酶切分析证实了它们应有的酶切位点。随后对这两个片段进行了克隆和序列测定,并与国外株的序列进行了比较。结果证明本实验扩增的两个ｃＤＮＡ序列与Ａｌｆｏｒｔ株和Ｂｒｅｓｉａ株的同源性分别是９５．２％和９８．５％。     

Isolation of 24 novel cDNA fragments from microdis—sected human chromosome band

INTRODUCTIONTheprocedure0fhu1nangenecl0ningandidentificationhasbeengreatlypro-pelledbytherapidprogress0fhumangen0memappingandsequencing[1].P0sitionalcloningisthemainstrategyusedinhumangenecl0ning,especiallyindiseaJse-relatedgenecloning.Is0latillggenesfr0l…     

狗肝脏苯甲二氮Zhuo结合抑制因子的cDNA克隆及序列分析

在研究狗抗吗啡活性肽ＰＰＣ过程中,发现它与牛的ＤＢＩ的氨基酸序列有很高的同源性,但尚未见到有关狗的ＤＢＩ的文献报道,为了更好的探讨ＰＰＣ和ＤＢＩ相互间的关系,对狗的ＤＢＩ的ｃＤＮＡ进行了克隆和序列分析。本研究利用大鼠ＤＢＩ的基因片段为探针,从狗肝脏ｃＤＮＡ文库中,筛选得到了一个阳性克隆,并进行了全自动和手工测序,得到了ＤＢＩ的全长基因。根据ＥＢＭＬ ｂａｎｋ序列检索,发现狗的ＤＢＩ核酸序列与牛的同     

水稻中编码甘油—3—磷酸转酰酶部分cDNA的克隆及序列分析

参照国外报道的几种双子叶植物的甘油－３－磷酸转酰酶的相对保守的氨基酸序列,设计并合成了一对简并引物,提取抗冷性强的水稻品种“丽梗２号”的ＲＮＡ,采用ＲＴ－ＰＣＲ技术,扩增出３１５ｂｐ的一般ｃＤＮＡ片段。扩增产物经纯化后直接克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体系统中,经ＰＣＲ法鉴定,所得的重组质粒中含有３１５ｂｐ的片段。     

柱孢菌细胞色素P－450nor2cDNA克隆与表达

在真菌的反硝化作用中,一种独特的细胞色素Ｐ－４５０起着一氧化氮还原酶（Ｐ－４５０ｎｏｒ）的作用。用ｇｔｌｌ构建了柱孢菌（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎｔｏｎｌｅｉｎｅｎｓｅ）ｃＤＮＡ文库。纯化的柱孢菌Ｃ。Ｐ－４５０ｎｏｒ２免疫兔,制备抗体。并用抗体筛选出阳性克隆。回收插入片段（Ｐ－４５０ｎｏｒ２ｃＤＮＡ）克隆到表达载体ｐＹＥＳ２中,并在酵母系统中表达。经Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ分析验证,表达产物能与抗体反应产生特异性杂交带。酶分析结果表明：表达产物具有一氧化氮还原酶细胞包素Ｐ－４５０ｎｏｒ２的活性,能以ＮＡＤＨ或ＮＡＤＰＨ为供体,使ＮＯ还原先成Ｎ２Ｏ。     

柱孢菌细胞色素P—450nor2cDNA克隆与表达

在真菌反硝化作用中,一种独特的细胞色素Ｐ－４５０起着一氧化氮还原酶的作用。用λｇｔｌｌ构建了柱孢菌ｃＤＮＡ文库。纯化的柱孢菌Ｃ．Ｐ－４５０ｎｏｒ２免疫兔,制备抗体。并用４抗体选出阳性克隆。