椎管内注射牛肾上腺髓质22肽差异性翻转吗啡耐受作用

牛肾上腺髓质22肽（bovine adrenal medulla22,BAM22）是脑啡肽原A的一种降解产物,与阿片受体和感觉神经元特异性受体（sensory neuron-specific receptor,SNSR）均有亲合力。本研究的目的是探讨BAM22对吗啡耐受的影响。连续7d对大鼠椎管内注射20μg吗啡形成吗啡耐受后,分为吗啡组、盐水组和BAM22组,第8天三组大鼠椎管内分别注射吗啡、生理盐水和BAM22,第9天三组大鼠椎管内均注射吗啡后,运用撤足反射、福尔马林实验和免疫组织化学等方法观察吗啡的作用效果。结果显示：在撤足反射实验中,BAM22组的吗啡能延长撤足反射潜伏期最大可能作用的48．5％,并持续约1h：在福尔马林实验中,BAM22组的吗啡能分别缩短福尔马林引起的第一期和第二期疼痛行为变化3．2min和24min,比盐水组分别减少45％和82％（P〈0．05,P〈0．001）;此外,在免疫组织化学实验中,BAM22组的吗啡能显著减少热刺激引起的脊髓背角c-Fos蛋白表达,其Ⅰ-Ⅱ层、Ⅲ-Ⅳ层和Ⅴ-Ⅵ层均减少约80％（P〈0．001）。本研究从整体和细胞水平表明,BAM22能翻转吗啡的耐受,这种作用在持续性疼痛模型中的表现要比急性痛中更为明显,显示BAM22对吗啡耐受的差异性调制;同时也提示感觉神经元特异性受体可能参与吗啡耐受的调制。     

人骨形成蛋白-7成熟肽基因在巴斯德毕氏酵母中的分泌表达

目的:利用甲醇酵母表达系统,构建重组人骨形成蛋白-7(rhBMP-7)成熟肽的基因工程菌,并实现其分泌表达。方法:采用PCR方法,依据GenBank数据库中hBMP-7成熟肽序列(AccessionNo.NM_001719)设计并合成一对引物,从已构建的含hBMP-7的克隆载体中扩增获得人骨形成蛋白-7成熟肽基因片段,并以pPIC9K为表达载体构建重组表达质粒,电转化巴斯德毕氏酵母SMD1168,于30℃进行甲醇诱导分泌表达,经筛选获得rhBMP-7成熟肽表达株,并进行了表达产物的活性测定。结果:表达产物存在于培养上清中,约占分泌蛋白总量的8%。经Western印迹分析可以检测到重组表达产物,ELISA检测其具有特异性结合活性。结论:构建了重组人骨形成蛋白-7成熟肽的基因工程菌并在甲醇酵母中实现了分泌表达,为进一步的活性及功能研究奠定了基础。     

兔病毒性出血症病毒基因组结构与功能研究进展

兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)是一种对兔具有高度致病性和致死性的病毒,所引发的疫病俗称"兔瘟",其病死率高达100%,是一种对养兔业危害性比较严重的重要传染病.RHDV在分类地位上属于杯状病毒科(Caliciviridae),兔病毒属(Lagovirus).     

利用15肽随机肽库确定抗TNF单抗表位的研究

利用抗ＴＮＦ的Ｔ５单抗作为筛选配基,对经ＤＮＡ碱基组成分析证明具有良好随机性的１５肽库进行亲和筛选．经过三轮筛选后,以硝酸纤维素膜斑点印迹法观察到良好的富集效果．由第三轮挑选出的３１个克隆进行ＤＮＡ测序,结果推出的优势克隆的短肽为ＣＹＲＲＰＡＧＧＬＰＧＩＣＳＡ等,竞争性ＥＬＩＳＡ实验证明带有以上短肽的噬菌体与ＴＮＦ能竞争性地与Ｔ５单抗结合．该多肽可能是Ｔ５单抗所识别的模拟表位     

用改进的寡核苷酸诱导突变法改造人胰岛素前体基因

我们用改进了的寡聚核苷酸诱导突变法,将两个单一限制性内切酶位点引入人胰岛素前体B链与C链连接处附近,及C链与A铁连接处附近。用含U模板法将B链第30个残基密码子ACC改成ACG,从而引入MluⅠ位点。用修改了的缺口双链DNA突变法,将A链第4个残基密码于GAG改成CTG,引入了一个PstⅠ位点。突变效率的为17％-36％。这个突变体在人胰岛素前体结构及蛋白质折叠的研究中,将有利于更换不同的C-肽。     

兔2‘,5’—寡聚腺苷酸合成酶的诱导形成

通过对兔血细胞内２‘,５’－寡聚腺苷酸合成酶诱导形成的研究,发现聚肌苷酸与聚胞苷酸双链复合物只能诱导单核型细胞产生２‘,５－ＯＡＳＥ,而新城疫病毒（ＮＤＶ）、红细胞生成素（ＥＰＯ）可同时刺激ＰＢＭＣ和总红细胞中２’,５‘－ＯＡＳＥ的上升。实验证明总红细胞中２’－５‘－ＯＡＳＥ定位于网织细胞中,苯肼、ＮＤＶ和ＥＰＯ引起总红细胞中２’,５‘－ＯＡＳＥ活性的增加与外周血中网织细胞的增加有直接关系。注射ｐ     

纳米山药多糖结肠靶向微生态调节剂对菌群失调大鼠胃肠激素的影响

目的研究纳米山药多糖结肠靶向微生态调节剂对肠道菌群失调模型大鼠胃肠激素的影响。方法以i.g盐酸林可霉素造成肠道菌群失调模型,将大鼠随机分成正常组,阳性对照组,纳米山药多糖高、中、低剂量组,自然恢复组和模型组。以水合氯醛对大鼠进行麻醉,应用放射性免疫法对各组大鼠的血清及结肠组织的血管活性肠肽、胃动素、生长抑素和P物质四种胃肠激素进行测定。结果与模型组相比较,纳米山药多糖高、中剂量组能够降低血管活性肠肽、胃动素、生长抑素和P物质的含量,差异具有统计学意义(P0.05),且恢复到正常水平。结论纳米山药多糖结肠靶向微生态调节剂能够恢复血管活性肠肽、胃动素、生长抑素和P物质四种胃肠激素的正常水平,具有调节胃肠道动力,促使胃肠道的正常收缩和改善胃肠道对水和电解质运输的能力。     

降钙素基因相关肽参与运动诱导的心脏保护作用

目的：探讨降钙素基因相关肽（CGRP）在运动诱导的心脏保护中的作用和机制。方法：64只健康雄性SD大鼠随机分为4组（n=16）,经耐力训练和力竭运动后,观察心肌CGRP的分布与表达、血清心肌肌钙蛋白I（cTnI）、心肌缺血低氧改变、心肌NO、SOD、MDA的变化。结果：TG心肌CGRP免疫反应和SOD总活性较CG显著增强,TEG和EG组CGRP免疫反应减弱,SOD总活性降低,MDA增加,且EG组血清心肌肌钙蛋白I显著升高,心肌出现明显的缺血低氧改变,NO含量下降。结论：CGRP参与耐力训练诱导的心脏保护作用,与上调SOD活性、促进NO合成有关。     

微生物脂肽的结构

根据结构特征,将脂肽分为环状脂肽和线形脂肽;按脂肪酸链和肽链的连接方式不同,进一步将环状脂肽分为3类。在此基础上,对脂肽的产生菌和脂肽结构进行了综述,并对脂肽的活性、作用机理及其应用进行了展望。     

抗真菌肽对真菌作用机制研究进展

20 世纪 90 年代初, Iijima 等从麻蝇幼虫血淋巴分离出一种具有抗真菌活性、能抑制 C.albicans 生长的蛋白质 . 到目前为止,已发现 150 多种肽具有抗真菌的特性,随着被发现的抗真菌肽数目不断增多,人们对抗真菌肽的抗真菌机理也进行了大量的研究,抗真菌肽对真菌的作用方式主要有：阻止、破坏真菌细胞壁的合成;与膜作用,在质膜上形成孔洞,使重要的内容物外泄;与真菌细胞内线粒体、核酸大分子等重要细胞器相互作用;最终导致真菌的死亡 .