c-erbB-2单克隆抗体A18在乳腺癌中表达特性的研究

目的：研究一株自制的c-erbB-2单克隆抗体A18在乳腺癌中表达的特性。方法：应用免疫组织化学SP法、蛋白质印迹分析法和荧光激活的流式细胞分选检测技术检测A18在635例乳腺癌组织、100例癌旁乳腺组织、不表达c-erbB-2的NIH／3T3（鼠成纤维细胞）和NE91（转表皮生长因子受体基因的NR6鼠成纤维面积）细胞株及高表达c-erbB-2的T6－17（转c-erbB-2－基因的NIH／3T3细胞）和SKBR3（人乳腺癌细胞）细胞株中的表达状况,并与市售进口c-erbB-2抗体（MaximBiotech产品）进行了平行对照研究。A18系采用细胞表面区域表位包埋法免疫小鼠制备而成,,结果：A18阳性染色定位于细胞膜,部分伴微弱的细胞浆着色,无明显非特异性染色,A18和进口抗体对NIH／3T3、NE91细胞均呈阴性,T6－17、SKBR3细胞均呈阳性,在乳腺癌组织中,A18的阳性率为60．3％,明显高于癌旁乳腺组织的5．0％,A18与进口同类单抗的阴性、阳性及总符合率分别为84．0％、82．8％及83．2％,与进口同类多抗的阴性,阳性及总符合率分别为88．0％、90．2％和89．5％。A1和进口同类单抗与乳腺癌临床病理特征的关系一致。经反复冻融7次或4℃保存10个月A18效价仍保持在3μg/ml。结论：A18特异性强,定位准确,效价高而稳定、可用于临床乳腺癌的检测。     

小麦黄花叶病毒的分离提纯及其血清学等特性

应用梯度离心和超速离心浓缩获得部分提纯的病毒制剂,产量约为7.45g/kg病叶提纯的病毒制剂的紫外吸收曲线呈典型的核蛋白吸收曲线,OD260/OD242和OD260/OD280的比值分别为1.24和1.38。病毒粒子呈线状,宽13—14nm,长度主要分布于250—300nm和550—700nm之间,1000nm以上的粒子也有检到。病毒外壳蛋白仅由一个分子量约为30Kd的亚基组成。在免疫电镜试验中、病毒粒子与日本WYMV抗血清发生强烈的血清学反应。新鲜病叶的超薄切片中可看到大量风轮体和膜状体。     

登革Ⅱ型病毒在白纹伊蚊体内分布的研究

利用蚊虫连续石蜡切片免疫组织化学技术,对登革Ⅱ型病毒(DEN-2)感染白纹伊蚊Aedes albopictus后的散播时间、程度及组织器官的感染顺序进行监测,以了解DEN-2在媒介白纹伊蚊体内的分布规律。结果表明：大剂量感染登革Ⅱ型病毒后,在蚊虫消化道的主要部位以及大多数组织器官包括神经及内分泌系统在内,如涎腺、脑、神经节等亦检测到病毒抗原。登革Ⅱ型病毒一旦感染并逸出中肠会迅速侵染其它组织。从各组织感染率的高低推断,病毒逸出中肠后通过血淋巴传播到其它组织的顺序通常为：前肠、涎腺、咽部神经节、脑及食管下神经节、后肠及复眼的小眼等。     

The inhibition of lung cancer cell growth by intracellular immunization with LC—1 ScFv

INTRODUCTIONLung cancer remains the leading cause of can-cer mortaIity in the world, accounting for more thanone sixth of cancer deaths in the world[1]. Antibod-ies have been proved to be a powerful tool fOr thestudy of 1ung cancer. A monoclonal IgM antibody,LC-1, was obtained in our laboratory. It can reactat a high rate with all four pathological types of lungcancers, including lung adenocarcinoma, 1ung squamous carcinoma, large cell lung cancer and smaIlcell lung cancert but not wit…     

木本植物内源生长素免疫胶体金定位分析技术的研究

以木本植物杨树(Populus sp.)和核桃(Juglans regia L.)为材料,对内源生长素免疫胶体金定位技术在固定、烤片、免疫染色、显色等关键环节进行了改进优化与验证.结果显示,优化后适合木本植物定位方法的主要技术要点是:在染色中,通过采用尿素-胰蛋白酶联合消化技术和增加牛血清白蛋白处理大大地改善了抗原修复结果,提高了染色的敏感性和特异性.利用优化后的方法对核桃幼胚和杨树嫩茎诱导生根过程中的吲哚乙酸(IAA)进行定位研究,发现杨树试管嫩茎生根过程中,形成层及周缘维管束有很强的IAA信号,核桃子叶生根中,胚中有很强的IAA信号,胚根中有半圆形、胚芽中有>"形强信号区,胚轴信号较弱,胚根信号最强.研究表明,与传统免疫染色方法相比,优化后的方法对木本植物生长素定位具有敏感性高,特异性强,银颗粒明显,背景清晰,耗时少等特点.     

低温驯化对布氏田鼠小肠黏膜结构和黏膜免疫相关细胞的影响

环境温度的变化影响野生啮齿动物的消化道形态与功能。小肠是吸收营养成分的主要部位,其结构和功能具有可塑性。为了解小肠黏膜的结构和功能对环境温度变化的响应机制,以布氏田鼠为研究对象,比较了低温组和常温组动物小肠黏膜的组织结构和小肠黏膜免疫相关细胞的数目。结果显示：（1）低温组布氏田鼠的十二指肠、空肠和回肠的绒毛长度及绒毛长度与隐窝深度的比值均高于对照组;（2）低温驯化使布氏田鼠小肠上皮内淋巴细胞的数量增加;（3）低温驯化使布氏田鼠十二指肠、空肠和回肠的杯状细胞数量均显著增加。结果表明,在低温环境下布氏田鼠的小肠黏膜结构和免疫细胞的数量发生了可塑性变化,这可能与低温环境下的高能量需求和免疫功能的变化有关。     

肿瘤免疫耐受——肿瘤细胞的免疫学特性

肿瘤可以看作是一种免疫性疾病,即病理性的免疫耐受疾病。正常的（生理性的）免疫耐受是人体重要的防御和维护机制,能保证免疫杀伤功能不伤害自身,也就是不会发生冤假错案。例如,免疫耐受可以保证免疫系统不识别自身细胞和抗原、防御超敏性免疫反应及自身免疫性疾病的发生、保护自身生殖细胞和成体干细胞不受周围免疫系统的干扰、保护胎儿不受母体免疫系统排斥等。病理性的免疫耐受是病原体（例如肝炎病毒）为了长期保持在宿主体内的感染状态或肿瘤细胞为了逃逸免疫的监督,     

短间隔连续部分肝切除与细胞增殖相关的TNF－α、c－myc、p53、p21、PCNA、Bcl－2、TGF－β的变化分析

为了阐明短间隔连续部分肝切除模型（SISPH）（0-4-40-76-112h)中各时段与细胞增殖的关系。本文利用Western blot技术,分别检测短间隔连续部分肝切除模型（0-4-40-76-112h)中各时段TNF-α,c-myc,p53,p21,PCNA,Bcl-2,TGF-β在体外的表达情况。结果显示：SISPH4h时,TNF-α和c-myc表达量最高,p53和PCNA表达量无明显变化;SISPH40h和76h时,p53和PCNA的表达量达到峰值,Bcl-2上调表达;SISPH112h,p53,PCNA,TGF-β表达量较对照高,Bcl-2表达较低,因此,SISPH4h时细胞由G0期进入G1期;SISPH40h和76h时细胞分裂旺盛;SISPH112h时,细胞仍然增殖,但不及40和76h旺盛,细胞凋亡增高,可能与肝组织结构重建和功能调整有关。     

饲料β-葡聚糖和灭活乳酸菌的添加对泥鳅幼鱼生长性能、肠脂肪酸组成及免疫性能的影响

为研究饲料中添加β-葡聚糖(BG)和热灭活乳酸菌(HK-LP)对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)幼鱼生长性能、肠道脂肪酸组成及免疫功能的影响,采用2×3双因素设计,设2个BG (0和1%)和3个HK-LP (0.025%、0.05%和0.1%)水平,选择初始均重为(0.17±0.01) g的泥鳅幼鱼,分别投喂6种配合饲料,每种饲料3个重复,饲养期为80d。结果显示,在饲料中分别添加BG和HK-LP显著提高了泥鳅幼鱼的终末体重、增重率、特定成长率,显著降低了饲料系数。然而,2种添加剂的相互作用没有对这些生长指标产生影响。添加BG显著降低了肠道脂肪酸中C16:1n-7和C18:2n-6的比率,同时随着HK-LP添加显著降低了C22:1n-11的比率。BG、HK-LP及两因素的相互作用均显著影响了体表黏液中碱性磷酸酶(AKP)活性,随着BG及HK-LP添加量的增加,溶菌酶(LZM)活性出现升高趋势。添加1%BG和0.05%HK-LP饲料,显著上调了热休克蛋白HSP70和HSP90α的表达水平,同时在BG未添加组,随着HK-LP添加的增加,上调了TLR1的表达水平。综上所述,饲料BG和HK-LP添加可以改善泥鳅幼鱼生长性能,其中BG 1%和HK-LP 0.1%的实验组对泥鳅幼鱼生长的促进作用最为显著。     

人间隙连接蛋白 31 相互作用蛋白Annexin Ⅱ的筛选与证实

间隙连接蛋白 31 (connexin31 , Cx31) 是间隙连接蛋白 (connexin) 家族的一员,目前对于 Cx31 的功能及其调节方式知之甚少 . 采用固相多肽合成的方法合成 Cx31 羧基端一个多肽片段 (250~266) ,经 HPLC 纯化后偶联到匙孔血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血检测、并纯化、经蛋白质印迹、细胞免疫荧光染色、免疫沉淀证实得到的抗体为特异性抗 Cx31 的抗体 . 运用制备的抗 Cx31 多克隆抗体免疫沉淀, SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解, Q-TOF 质谱分析,数据库扫描筛选可能相互作用蛋白,运用抗体 pull-down 实验,筛选到可能相互作用蛋白 annexin Ⅱ,经过免疫共沉淀、细胞免疫共定位等实验证实 annexin Ⅱ与 Cx31 相互作用 .