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21.
The sequence encoding an E2 main antigen glycoprotein of the C strain of classical swine fever virus (CSFV) was highly expressed in the host cell E. coli BL21-CodonPlus (DE3)-RIL using the pGEX-4T-1 expression vector and the soluble recombinant product was purified with Glutathione Sepharose TM<'4B> by centrifugation. The soluble recombinant protein showed good immune reactions and was confirmed by Western blot using anti-CSFV-specific antibodies. Then an indirect ELISA with the purified E2 protein as the coating antigen was established to detect antibody against CSFV. The result revealed that the optimal concentration of coated antigen was 0.6 μg/well and the optimal dilution of serum was 1:80. The positive cut-off value of this ELISA assay was OD<,tested serum>/OD<,negative serum>≥2.1- The E2-ELISA method was evaluated by comparison with the indirect hemagglutination test (IHAT). When a total of 100 field serum samples were tested the sensitivity and specificity were 90.3% and 94.7% respectively. Specificity analysis showed that there were no cross-reactions between BVD serum and the purified E2 protein in the E2-ELISA. 相似文献
22.
目的 酶联免疫吸附测定(ELISA)被广泛用于抗体或抗原的检测,并被视为临床实践中的金标准,可提供相对可靠、灵敏和特异的检测结果.ELISA的本质是抗原与相应抗体之间的特异性相互作用.然而,天然抗体固有的不稳定性是ELISA的一个难以克服的弱点,并可能导致检测结果的重现性差甚至错误的诊断结果.本课题组先前应用构象工程方... 相似文献
23.
24.
合成肽抗原在戊型肝炎病毒感染诊断中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
An ELISA for the detection of anti HEV using synthetic peptide antigens was developed. The synthetic antigens were encoded by OFR2 and OFR3 genes of HEV. The purpose of this study was to determine the applicability of the synthetic antigens in the serodiagnosis of hepatitis E. The anti HEV detection using synthetic antigens was carried out in 47 healthy subjects and 89 patients with acute or chronic viral hepatitis. The results showed that the positive rate of anti HEV IgG in healthy subjects was 4.2%(2/47), and no IgM antibody to HEV was found. The positive rates of IgG and IgM antibodies to HEV in the hepatitis patients were 8.9% and 10% respectively. In addition, we compared the detecting efficacy of the synthetic antigens with that of the market reagent in 57 serum samples, the total coincident rate was 87.7% (50/57). All of the results accorded with the literatures reported. This study suggests that the ELISA based on the synthetic peptide antigens was specific, sensitive and convenient in diagnosis of HEV infection, it can be widely used in both clinical and epidemiological reseaches. 相似文献
25.
目的探讨郑州地区不同人群乙肝五项标志物模式的分布及特点。方法采用ELISA法对血样进行HBV血清学指标检测,收集2012年9月28日至2017年9月27日在我院检查的乙肝五项定性检测结果,进行不同模式分析。结果 212 831例检测者中HBsAg阳性者有6 103例,其中男性3 177例,女性2 926例,男女HBsAg阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=43.26,P0.01)。乙肝主要模式"1,3,5阳"、"1,4,5阳"和"1,5阳"分别占17.88%、56.81%和23.12%,"1,5阳"模式按性别比较,差异有统计学意义(χ~2=7.31,P0.01),其他乙肝模式按性别比较,差异无统计学意义(χ~2=0,3.43,0.35和1.91,Ps0.05);不同年龄组HBsAg阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=1 396.48,P0.01)。受检人群中抗-HBs阳性有79 222例(占37.22%),不同年龄组和不同性别人群抗-HBs比较,差异有统计学意义(χ~2=1 220.18,353.03,Ps0.01);受检人群中乙肝全阴模式91 819例(占43.14%)。结论郑州地区男性HBsAg阳性率略高于女性,而女性抗-HBs阳性率略高于男性。郑州乙肝全阴模式比例较高,提示主动免疫工作有待加强。 相似文献
26.
光周期对光敏核不育水稻光敏色素A含量及其mRNA丰度的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
光敏核不育水稻(农垦58S)是我国特有的水稻(Oryza sativa L.)种质材料,光敏色素是光周期诱导其育性转变的受体。报道了育性转换敏感期间的光周期处理对农垦58S及对照“农垦58”叶片中光敏色素A(Phy A)含量及其mRNA丰度的影响。在10个光周期处理的最后一个暗期结束前,收获每株水稻的上部两片叶,用酶联免疫吸附测定法测定Phy A。和长日照(LD)相比,短日照(SD)处理导致农垦58SPhy A相对含量增加38.5%;而“农垦58”只增加18.5%。显然,在较长的暗期中,农垦58S中Phy A的积累比对照快。在水稻幼苗中也得出相似的结果。以光敏色素A基因(phy A)的特异性片段RPA3作探针,用RNA斑点杂交的方法对叶片中Phy A mRNA丰度进行分析的结果表明,光周期处理5d和10d时,两品种水稻的Phy A mRNA丰度都是SD处理的比LD的高,而且SD下农垦58S Phy A mRNA的丰度均比“农垦58”的高。这些结果表明,甲基化水平较低的农垦58S phy A可能比“农垦58”的phy A更活跃地表达。另外,在育性转换敏感期每日主光期结束时(EOD)进行10次短暂的远红光(FR)照射。结果表明,农垦58S植株抽穗和开花期比SD处理推迟2d,而花粉败育率、种子结实率却无变化。暗示农垦58S开花和育性转变过程的光周期反应可能不同。 相似文献
27.
为调查转基因棉花种植地区边际水体中的Cry1Ab/c蛋白残留情况, 在华东地区的山东、江苏、安徽三省棉田设置采样点, 连续3年在棉花的花铃期和收获季节, 对棉区地块内部及周围边际水体随机采样, 进行去杂及纯化处理后, 利用ELISA (酶联免疫吸附测定)方法检测水样中的Cry1Ab/c蛋白含量。结果表明: (1)在花铃期和收获季前后两周, 分别在5个布控点边际水体中检出Cry1Ab/c蛋白, 其中1个布控点阳性蛋白残留浓度最高达到0.4 ppb, 另外4个布控点检测出的阳性蛋白量均在0.04 ppb以下; (2)距离棉田越近, 蛋白检出阳性率越高, 其中棉田内水渠阳性率为13.3%; (3)连续种植时间超过7年的田地周围水体中蛋白阳性率为12.4%。在所有取样时间点中, 与花铃期相比, 收获季更容易检测到阳性结果。这表明在转基因棉花产区, 应在收获季进行适当的指导和监控, 以预防和降低转基因棉花中Cry1Ab/c蛋白对边际水体的潜在影响。 相似文献
28.
目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中甘露糖结合凝集素(MBL)水平与SLE的临床表现、经典的血清学指标及疾病活动性指数的相关性。方法:应用固相酶联免疫吸附(ELISA)法检测54例(其中活动期39例、缓解期15例)SLE患者和45名健康志愿者外周血MBL水平,同时检测SLE患者外周血抗dsDNA抗体、C3补体、白细胞计数及循环免疫复合物(CICs)水平,并记录SLE患者主要临床症状(肾脏系统受累、神经系统受累、严重感染等),疾病活动度用SLEDAI记分。结果:系统性红斑狼疮患者外周血MBL水平显著低于健康志愿者(P〈0.01);特别是活动期SLE患者血清MBL水平明显降低,与缓解组比较差别具有统计学意义(P〈0.01);SLE患者血清MBL水平与SLEDAI、抗dsDNA抗体、CICs水平呈负相关,与白细胞计数及C3补体水平呈正相关;并发严重感染的SLE患者组血清MBL水平显著低于无受累组(P〈0.01)。结论:SLE患者血清MBL水平明显降低,血清MBL水平与SLEDAI、抗dsDNA抗体、C3水平、CIC水平、白细胞水平之间明显相关,血清MBL水平较低的患者更易发生比较严重的感染,血清MBL水平可能是SLE潜在生物学标记。 相似文献
29.
30.
目的:建立重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)鉴别试验的方法。方法:取重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)以1:10比例加入lmol/L盐酸调节pH值,采用ELISA双抗体夹心法检测,同时设以氢氧化铝、未处理的重组乙型肝炎疫苗、狂犬疫苗、出血热疫苗,以及试剂盒的阴、阳性作为对照。结果:狂犬疫苗、出血热疫苗及氢氧化铝对照为阴性,直接检测重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)呈弱阳性,加入盐酸调节pH值后原倍样品呈弱阳性,10倍稀释后呈强阳性。采用该方法检测5批疫苗均呈强阳性。组内平行试验,组间重复试验。结论:将重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)调节pH值后10倍稀释,用ELISA双抗体夹心法检测呈阳性,而且稳定可靠,该方法可用于该疫苗的鉴别试验。 相似文献