浅谈克隆动物技术

浅谈克隆动物技术徐存拴（河南师范大学生物系,４５３００２）图１绵羊的生活史１克隆动物技术１１动物细胞结构生物体是由一个个具有相同和不相同功能的细胞构成,例如,人体约由１５０亿个细胞构成、绵羊约由１３０亿个细胞构成。细胞的基本结构包括细胞膜、细胞质和...     

大鼠7s RNA顺序的分子克隆、其基因结构和细胞内分布的分析

我们通过体外多聚腺苷酸化的大鼠正常肝7 s RNA,克隆了它的cDNA片段。其中一个克隆p 24的7 s cDNA插入顺序为180个碱基对,其顺序与大鼠Novikoff肝癌7 s RNA顺序比较,存在一个碱基的置换。用这个克隆提供的探针我们比较了大鼠肝细胞和肝癌细胞7 s RNA的基因拷贝数,基因组结构和在细胞内分布。结果表明:7 s RNA基因是多拷贝基因家族;7 s RNA在细胞癌变后含量下降;大约40%7 s RNA分布在细胞核内。我们还就7 s RNA具有调控基因表达功能的可能性进行了讨论。     

ES cells derived from cloned embryos in monkey--a jump toward human therapeutic cloning

Therapeutic cloning refers to the derivation of embryonic stem cells （ntESC） from embryos derived from somatic cell nuclear transfer （SCNT） also known as cloning. Cloning involves transplanting a differentiated cell into an oocyte that has had its nucleus （DNA） removed. The reconstructed oocyte can be activated to divide and develop into an embryo. The process that allows this to happen is termed nuclear reprogramming, and is defined as the mechanism through which a differentiated cell de-differentiates or returns to a totipotent state （capable of giving rise to any cell type, including extra-embryonic） and directs embryonic development [1]. Cells from blastocyst stage cloned embryos can be used to generate ntESC lines. Such cell lines can differentiate into any adult cell type, and have tremendous potential for patient-specific disease therapy [2].     

动物克隆技术研究进展及产业化

国家科技部八六三高技术领域办公室１９９８年７月出版的Ｎａｔｕｒｅ杂志报导美国夏威夷大学Ｗａｋａｙａｍａ等人用小鼠成体细胞去除了２７只成活个体,其中７只是由克隆小鼠再次克隆的后代,掀开了动物克隆技术的新篇章。１动物克隆技术研究进展１９９７年２月苏格兰Ｒ...     

基因工程技术在基础与临床医学上的应用

前言 基因工程的核心技术是分子克隆,它是70年代后期发展起来的新技术。通过分子克隆技术,可以把任何一种外源基因经过剪切,与适当的运载体(质粒或噬菌体)重组,再转化到细菌中,即可使这一外源基因得以纯化与扩增。     

第21人类染色体长臂DNA的YAC克隆及重叠排序

人类基因组的研究已在全世界主要发达国家展开。由于YAC(YeastArtificialChromosome)克隆技术的建立及广泛采用,已使人类及其他生物基因组的研究迈出了成功的第一步。以DanielCohen(CEPH,Paris)为首,联合法国、西班牙、美国和日本12家实验室的35名 合作者,已完成了人类第21染色体长臂DNA的YNC克隆及重叠排序(Nature359,380-387,1992)。     

中国生物克隆技术之父——童第周

在中国,童第周(T.C.Tung)是个家喻户晓的名字,在小学课本中就有一则关于他的故事。故事讲述了他由于家庭贫困直到17岁才进入中学,以及他如何依靠毅力和勤奋而最终成为一位成功的生物学家。但是在科学界,他之所以被人们铭记和尊敬,则是由于他在     

无缝克隆技术的研究进展

DNA克隆技术是分子生物学和基因工程研究必备的工具之一,但传统的以限制性内切酶酶切/连接为手段的克隆技术存在依赖限制性内切酶、连接效率低、耗时长和引入额外序列等缺点。近年来,无缝克隆技术发展迅猛,大量商业化克隆试剂盒也趋于成熟并在实验室被广泛应用,有力推动了蛋白质工程以及合成生物学的发展。本文从无缝克隆原理出发,对近年来发展出来的基于外切酶、PCR技术、同源重组、热稳定的连接酶等原理的无缝克隆技术进行了分类和讨论。特别是新酶资源的不断发现,如核酸外切酶XthA、FnCas12a突变体,与现有技术的相互融合,如Rec/ET重组和核酸外切酶共同使用,将有力推动无缝克隆技术的发展。     

适用于Nimble Cloning系统的pCambia载体改造

为了适用于Nimble Cloning这种新型的DNA分子克隆技术,本研究以pCambia1304载体作为改造对象,采用突变碱基的方式去除载体中的5个Sfi I酶切位点,并且对改造后的载体在农杆菌中的稳定性以及在植物中的表达进行分析,结果表明5个Sfi I位点突变对载体的稳定性和表达没有影响。本研究为Nimble Cloning系统提供了配套载体,也为其他pCambia系列载体改造成Nimble Cloning系统载体提供了模板和参考。     

全基因组蛋白质的标签细胞和小鼠资源库建设

小鼠是最广泛使用的模式生物,构建基因改造的小鼠模型是研究基因功能和疾病发生机制的重要手段.从20世纪80年代发展至今,小鼠基因改造技术更新迭代,主要包括胚胎干细胞介导的同源重组策略、配子介导的转基因策略、以及最新基于CRISPR/Cas9技术的遗传改造策略等.由我国科学家自主研发的全新小鼠基因改造技术——"人造精子细胞...