单颗粒示踪技术及其在病毒侵染机制研究中的应用

病毒侵染宿主细胞是一个复杂的动态过程,且涉及病毒与细胞多种成分的相互作用,病毒侵染机制研究对研制抗病毒药物以及病毒性疾病的预防和治疗至关重要。单颗粒示踪技术是可视化研究生物动态过程的重要工具,能够研究病毒在活细胞中的侵染行为,现已成为病毒侵染机制研究的有效手段。此文综述了单颗粒示踪技术中病毒标记物、标记方法、活细胞成像及分析进展,以流行性感冒病毒和人免疫缺陷病毒为例阐述了该技术在病毒侵染机制研究中的应用,对该技术的应用前景进行了展望。此文旨在为病毒侵染机制研究介绍新的技术手段、推动病毒学研究。     

肺结核患者治愈后复发危险因素分析及耐药状况调查

目的:研究肺结核患者治愈后复发危险因素以及耐药状况。方法:回顾性分析我院于2015年5月～2017年12月期间收治的1000例肺结核患者的临床资料。对所有患者均进行为期2年的随访观察,统计复发情况。将所有患者按照治愈后复发与否分成复发组58例以及无复发组942例,比较两组患者基线资料情况,包括年龄、性别、耐药、吸烟、职业类型、居住情况以及空洞,并对影响肺结核患者治愈后复发的因素作多因素Logistic回归分析,对所有治愈后复发患者的耐药情况进行检验,分析其耐单药、耐2药、耐3药、耐4药人数的占比情况。结果:1000例肺结核患者治愈后复发58例,复发率为5.80%。肺结核患者治愈后是否复发与性别、年龄、吸烟无关(P0.05),复发组耐药、体力型工作、流动人口、空洞患者的比例高于未复发组(P0.05)。经多因素Logistic回归分析可得:耐药、体力型工作、流动人口、空洞均是肺结核患者治愈后复发的独立危险因素。58例患者中发生耐药例数27例,耐药率为46.55%;其中耐单药、耐2药、耐3药、耐4药人数分别为8、10、7、2例,相应占比为13.79%、17.24%、12.07%、3.45%。结论:肺结核患者治愈后复发的风险较高,尤其应注意耐药、体力型工作、流动人口、空洞的患者,以降低疾病复发,且肺结核复发患者的耐药情况不容乐观。     

转基因植物对土壤污染相关研究

随着转苏云金芽孢杆菌基因（Bacillus thuringiensis, Bt）作物（后面全用转Bt基因作物代替）的推广应用，有关转Bt基因作物对土壤中微生物的生态风险尚无统一的结论。丛枝菌根(Arbusular Mycorrhiza, AM）真菌在土壤中分布广泛，是监测转Bt基因作物生态风险评估的重要微生物群落。Bt杀虫蛋白的表达及释放，可能会使AM真菌共生过程中一些重要阶段的生态共生效应受到影响。转Bt基因作物对AM真菌的影响可作为转Bt基因作物生态风险评价的重要指标。文章以紫云英为宿主植物，通过盆栽实验，人为添加提取的Bt蛋白，检测Bt蛋白对AM真菌侵染率、酶的活性以及生物量的影响，以探索Bt蛋白对AM真菌侵染性及共生效应的影响，从而为转Bt基因作物的生态风险评估提供参考。     

烟草甲攻击素基因LsAttacin2的表达及其在抗细菌胁迫中的作用

【目的】本研究旨在阐明烟草甲Lasioderma serricorne幼虫体内攻击素(attacin)基因LsAttacin2在响应细菌侵染过程中的功能。【方法】利用RT-PCR扩增烟草甲LsAttacin2的cDNA全长序列；利用RT-qPCR检测LsAttacin2在烟草甲不同发育阶段(卵、低龄幼虫、高龄幼虫、蛹、低龄成虫和高龄成虫)、4龄幼虫不同组织(头、表皮、前肠、中肠、后肠、脂肪体和马氏管)、大肠杆菌Escherichia coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus侵染及其肽聚糖处理4龄幼虫后的相对表达量；通过注射法利用RNAi沉默烟草甲4龄幼虫LsAttacin2的表达后，检测大肠杆菌和金黄色葡萄球菌侵染烟草甲4龄幼虫后的死亡率。【结果】克隆获得烟草甲LsAttacin2(GenBank登录号：MT635176)的cDNA全长序列，其开放阅读框长504 bp,编码167个氨基酸残基，LsAttacin2 N端存在信号肽，C端具有Attacin＿C超家族的保守结构域。RT-qPCR结果表明，LsAttacin2在烟草甲测试的各发育阶段均有表达，且在高龄...     

苹果锈果类病毒(ASSVd)保定分离物草本寄主鉴定及侵染性cDNA克隆构建

由苹果锈果类病毒(Apple scar skin viroid,ASSVd)引起的苹果花脸病在我国苹果生产上造成了严重的危害,构建侵染性cDNA克隆是研究病毒基因功能、病毒侵染机制的重要手段.我们首先在温室进行了ASSVd保定分离物(BD-1)草本寄主的鉴定,证明了ASSVdBD-1可侵染油菜(Brassica napus)、黄瓜(Cucumis sativus)、扁豆角(Lablab purpureus)、蚕豆(Vicia faba)、长豆角(Vigna unguiculata)、昆诺藜(Chenopodium quinoa)、苋色藜(C.amaranticolar)共7种草本植物,在油菜上病毒接种成功率最高,达80％,新生叶片表面凹凸不平;其次是黄瓜,达到了77.78％,新生叶片皱缩畸形.通过RT-PCR扩增到ASSVd BD-1全基因组,利用引物引入的方法在基因组中引入T7启动子,构建到pMD18-T simple载体上,通过体外转录获得病毒基因组RNA转录本,在油菜上验证了RNA转录本的侵染性.研究结果为利用草本寄主探究ASSVd生物学特性提供了基础材料,为利用反向遗传学方法分析ASSVd基因功能和侵染机理奠定了基础.