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目的 基于紫外分光光度法,建立一种测定白喉毒素无毒突变体CRM197蛋白含量的方法。方法 在天然折叠状态和非折叠状态(CRM197蛋白经盐酸胍变性)下,分别测定相同含量的CRM197蛋白A280 nm值,再根据朗伯-比尔定律c=A/εL计算其折叠状态消光系数。同时,使用当前建立的方法与BCA法分别测定CRM197蛋白的含量,并对2种方法的差异和检测特点进行比较分析。结果 根据CRM197蛋白的氨基酸一级序列与相对分子质量计算出其理论消光系数为0.934 mL/(mg·cm),在280 nm处的实验消光系数为(0.959±0.006)mL/(mg·cm)。2种方法测定同一蛋白样本的结果一致,分别为(2.17±0.02) mg/mL和(2.14±0.09)mg/mL;本方法检测值的CV为0.70%,BCA法检测值的CV为4.15%。结论 本研究建立的CRM197蛋白含量测定方法准确性高、线性范围宽、获取数据快,可用于CRM197蛋白含量的测定,同时为其他载体蛋白的含量测定提供了参考。 相似文献
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通道病理学是当今国际学术发展中一门新兴学科。本文将针对有关电压门控钠通道的变异所导致的机体疾患,如高血钾性周期性麻痹,先天性肌强直等骨骼肌疾患,LQT3,原发笥心室纤颤等心脏病及其所涉及的钠通道突变体,通道的突变位点和电生理性质等一些研究资料与进展作一概括介绍。 相似文献
24.
T cell activation is dependent upon signals deliveredthrough the antigen-specific T cell receptors and costimula-tory molecules [1,2]. The B7 family of costimulatory mol-ecules provides signals that are critical for both stimula-ting and inhibiting T cell… 相似文献
25.
为了降低野生型葡激酶 (wild- type staphylokinase,wt- Sak)的免疫原性 ,对已构建的葡激酶N端缺失突变体 (ΔNSak) c DNA进行改造 ,将其主要的抗原决定簇编码序列突变为丙氨酸密码子 .该突变体 (ΔNMSak) c DNA与原核表达载体 p LY- 4重组后 ,转化大肠杆菌 JF1 1 2 5.经温度诱导 ,ΔNMSak获得高效表达 ,重组蛋白占全菌总蛋白的 60 % ,以包涵体形式存在 .包涵体经洗涤 ,8mol/L尿素溶解 ,稀释复性 ,离子交换色谱一步分离至电泳纯 ,纯度达 95%以上 ,分子量与理论值相符 ,比活性 8.5× 1 0 4 HU/mg.经 ELISA法、发色底物法测定 ,ΔNMSak与 wt- Sak制备的兔抗wt- Sak抗血清的免疫反应性显著降低 ,经抗血清温育后 ,wt- Sak活性下降程度远高于 ΔNMSak.ΔNMSak、wt- Sak分别免疫豚鼠 ,以 ELISA法测定豚鼠血清中相应抗体的效价 ,ΔNMSak组的抗体效价明显低于 wt- Sak组 ,表明 ΔNMSak的免疫原性显著下降 . 相似文献
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鼠伤寒沙门氏菌嘌呤生物合成的调控研究:VI.超阴遏突变体的分离和遗传 … 总被引:1,自引:1,他引:0
从鼠伤寒沙门氏菌的TT12306(purD∷lac)株出发,对86个对数生长期培养物作了诱变处理,在E+Ado+X-gal平板上得到66个独立的白色或浅蓝色菌落,经测定它们在阻遏和去阻遏条件下的β-半乳糖苷酶活性、回复突变频率、突变位点的转导分析和显性实验。证明其中11株为嘌呤生物合成途径中的超阻遏突变体。 相似文献
27.
28.
突变体大麦Mb1832C的叶绿素蛋白复合体 总被引:3,自引:0,他引:3
用低浓度SDS对突变体大麦Mb1832C的类囊体膜进行增溶,再经不连续的SDS-聚丙烯酰胺凝胺电泳后,按电泳迁移率的增加顺序,分离出CPI,CPal,CPa2和FC4条蓝绿色的带。CPI在红区和蓝区的吸收峰分别位于667nm和438nm处。低温荧光发射光谱表明CPI为含有少量光系统Ⅱ的光系统Ⅰ反应中心复合体。 相似文献
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