谷子茎尖体外遗传转化体系的建立与优化

以谷子(Seteria italica)豫谷一号为实验材料,建立了一套简便、稳定的体外茎尖遗传转化体系。通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的茎尖转化法,对转化受体采取不同的处理方式,待拟转化株长到三叶期后进行PCR鉴定。探明了草丁膦(Basta)喷施处理用于谷子转基因幼苗筛选的最适...     

巴西橡胶树去泛素化酶UCHs基因的克隆及功能分析

为探究去泛素化酶中泛素羧基末端水解酶（UCHs）在巴西橡胶树乳管泛素化过程中发挥的潜在功能,从巴西橡胶树中成功分离2个UCHs家族成员（HbUCH-L3和HbUCH-L5）的全长序列,开放阅读框分别长993、558 bp,编码330、185个氨基酸,具有典型的UCHs结构域;qRT-PCR结果表明HbUCH-L3和HbUCH-L5在各组织中均有表达,且在胶乳中表达丰度较低;HbUCHs重组蛋白的体外泛素化底物切割试验表明,HbUCH-L3和HbUCH-L5均具有水解泛素的功能。HbUCHs显著降低C乳清中总蛋白整体泛素化水平,且HbUCH-L3去泛素化酶活性高于HbUCH-L5。由此推测橡胶树UCHs在乳管中参与维持泛素化动态平衡进而发挥其特定的生物学功能,但具体的作用及调控机制尚不清楚。     

滇西北冷杉属植物结实特性及种子特征研究

探究滇西北冷杉属(Abies)植物的结实特性和种子特征及其变异模式,为促进冷杉林的更新及恢复提供材料支持和理论依据。收集滇西北分布7种冷杉的标本及球果,分析种子形态特征、种子生活力和结实特性,探究其种间及地区间差异。结果发现:滇西北7种冷杉种子的长、宽、厚分别是6.04～10.22、2.03～3.32、1.26～2.24 mm,千粒质量是4.26～30.50 g,千粒质量与种子长度、宽度、厚度均显著相关(r>0.8,P<0.01)。滇西北7种冷杉的种子饱满率、虫蚀粒率和空秕粒率的平均值分别为27.51%、4.92%和67.58%,种子饱满率不高、空秕粒和虫蚀粒严重。野外调查发现大多数云南黄果冷杉(Abies ernestii var. salouenensis)均未结球果,且仅收集得到一棵树的球果,因此在本文中未进行比较分析。滇西北其余6种冷杉的虫蚀粒率在不同种之间(P=0.750)和不同地区之间(P=0.204)均没有显著差异,饱满率(P=0.005)和空秕粒率(P=0.007)均存在种间差异,而种子生活力存在种间(P=0.008)及地区间(P=0.036)差异,因此冷杉...     

核糖体蛋白的核糖体外功能及其在疾病中的作用

糖体蛋白(ribosomal protein,RP)是核糖体的重要组分之一,在生物体内行使蛋白质合成的功能.最近的研究表明,RP除了参与蛋白质合成外,还在细胞增殖、分化、凋亡、DNA修复等细胞过程中发挥作用.RP在进化过程中高度保守,因此当RP基因表达异常时,机体必会产生相应的异常反应.RP的功能障碍与发育、代谢、和癌...     

4种野生植物种子萌发对短期室温干贮藏的响应

了解野生植物种子萌发对短期室温干贮藏的响应,可解释本地野生植物被用于植被恢复中的种子出苗情况,还可以为种子萌发策略及其种群更新研究提供科学依据。本研究以用于飞播的4种野生植物为研究材料,探讨了成熟鲜种子的萌发温度、短期室温干贮藏后种子生活力以及休眠和萌发的变化。结果表明：顶羽菊（Rhaponticum repens）、糙苏（Phlomis umbrosa）和花花柴（Karelinia caspia）成熟鲜种子在25/15℃下萌发率高,分别为27%、98%和100%左右。在三个温度条件下铃铛刺（Halimodendron halodendron）种子萌发率没有明显变化,最高萌发率为46%左右。顶羽菊和铃铛刺绝大部分种子具有休眠现象。经过短期室温干贮藏后,顶羽菊和花花柴种子死亡率极高,分别为72%和88%左右。除糙苏种子萌发率明显降低10%外,铃铛刺、花花柴和顶羽菊种子经短期室温干贮藏后萌发率没有明显变化。基于本研究结果,在飞播中应慎用顶羽菊和花花柴种子,铃铛刺种子播种前需要擦破种皮处理。     

牛耳成纤维细胞的培养

体细胞克隆是一种新型、高效且极具生产潜力的繁殖技术,在家畜改良和育种工作中前景广阔.在进行持续且大量的家畜克隆生产中,保证取材方便并不影响供体动物健康是十分关键的,只有这样才能使优势供体源本基因不会受到损害.     

褪黑素抑制小鼠卵母细胞的体外成熟

目的:探讨褪黑素(MT)对小鼠卵母细胞的体外成熟的影响.方法:通过卵母细胞自发、次黄嘌呤(HX)阻滞和激素诱导成熟三种体外培养模型研究了褪黑素(MT)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响.结果:①0.1 g/L、0.02g/L、0.004 g/L及0.0008 g/L浓度的MT均能显著抑制小鼠卵丘卵母细胞复合体(CEOs)自发成熟过程中第一极体(PB1)的释放(P＜0.01);②动力曲线分析表明,MT对自发成熟的CEOs的GVBD和PB1有显著的推后作用,与对照组相比,处理组的GVBD和PB1分别被推后8～10 h和3～4 h;③0.1 g/L和0.02 g/L两有效浓度的MT还能显著抑制促性腺激素(FSH)诱导的HX阻滞的CEOsGVBD的发生(P＜0.05),对PB1的排出虽有一定的抑制作用,但没有统计学意义;④MT和次黄嘌呤(HX)对CEOs的自发成熟有协同抑制作用(P＜0.01),但在裸卵(DO)自发成熟的阻滞中没有协同效应.结论:MT是调节哺乳动物卵母细胞成熟的重要激素之一,其作用机制可能是通过卵丘细胞实现的.     

小鼠2-细胞胚胎单个卵裂球体外培养及其发育形成囊胚的玻璃化冷冻保存技术的研究

单个卵裂球分离和培养是生产同卵双胎或一卵多胎动物的一种有效方法。在羊和牛已经获得了来源于2-细胞和4-细胞期胚胎的单个卵裂球的活体后代;在兔也获得来源于4-细胞胚胎的单个卵裂球后代;在猪已获得8-细胞单个卵裂球的后代。但多数的研究者发现,小鼠单个卵裂球培养后的体外发育率、移植妊娠率和产仔率都很低。上述均为新鲜胚移植结果,至于分离后卵裂球发育成的囊胚再进行玻璃化冷冻保存尚未见报道。本实     

体外缺血/再灌注神经元DNA损伤的初步研究

目的和方法：应用胎鼠皮层细胞原代培养,建立神经元的体外“缺血／再灌注”模型,观察神经元缺血／再灌注后DNA链的损伤。应用PANT和TUNEL染色分别检测缺血／再灌注后DNA单链和双链损伤。结果：神经元缺糖缺氧２h引起极少量细胞死亡,4h引起少于30％的细胞死亡,而6－8h的缺糖缺氧引起的细胞死亡数量达到80％以上,6h缺糖缺氧再灌注10－18h,细胞死亡达高峰,而在8h缺糖缺氧再灌注2h细胞死亡已经达高峰。在缺糖缺氧2,4,6,8h灌注5min,PANT阳性细胞分别达30％,50％,80％,90％。而在同样的情况下,TUNEL染色阳性细胞数没有明显增加。结论：体外神经元缺糖缺氧再灌注早期即出现DNA链的损伤,且以单链损伤为主。     

生物体衰老与复制衰老--体内与体外研究

体外连续培养的细胞在有人数的细胞分裂后,更新换代合成ＤＮＡ及分裂的能力,最后导致增殖能力的丧失,但基本代谢过程仍能维持,这种现象称为复制衰老。本文讨论了复制衰老现象存在的普遍性,描述了衰老细胞伯特征,对复制衰老和生物体衰老之间的联系进行了重点分析。现有的研究虽然还不完全,但都提示复制衰老是生物体衰老在细胞水平上的反映,并充分肯定了复制衰老是一个较好的研究机体衰老的模型。