RNA的错误剪接影响转基因的表达

利用PCR扩增方法获得1.5 kb人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)基因组基因,将其受控于2.6 kb的鼠乳清酸蛋白(WAP)基因的启动子下,构建成乳腺表达载体.通过显微注射方法建立转基因鼠,PCR及DNA印迹鉴定证实获得两只转基因阳性鼠.在其乳腺表达出极低的G-CSF.为探讨低表达的原因,采用RT-PCR方法,从转基因鼠乳腺获得G-CSF cDNA,序列分析表明,其RNA剪接出现错误,将其第四外显子识别为内含子,由此导致其低水平表达.     

真核生物mRNA二级结构与内含子剪接

对68个外显子-内含子-外显子序列片段以及相应的外显子-外显子序列片段的二级结构进行分析后发现,内含子5′端和3′端的碱基G(剪接位点)中大约90％位于二级结构的环区或是茎区的端部并靠近环,而且位于环区的G也多靠近环的基部;92％的外显子拼接位点也有类似性质. 约82％的分枝点A位于环区或环与茎的连接部位. 折叠结构的形成使剪接位点和分枝点在空间上彼此靠近.     

特异亲和活性蓝染料的小分子RNA的SELIEX筛选

化学合成含有２０个核苷酸随机序列,长度为７３个核苷酸的单链ＤＮＡ随机 ;ＰＣＲ扩增和双链化后,Ｔ７ ＲＮＡ聚合酶体外转录得到单链ＲＮＡ随机库,以活性蓝染料凝胶柱为筛选介质,体外进化方法筛选特异亲和活性蓝染料的ＲＮＡ分子。经８轮循环筛选,ＲＮＡ群体亲和染料的比例从小于０．０３％上升至２２．４％。     

纳豆激酶的研究与应用

纳豆激酶的研究与应用付利,杨志兴（黑龙江省科学院应用微生物研究所）纳豆为日本的传统发酵大豆食品,已食用了２０００年以上。它是由枯草杆菌（ＢａｃｉｌｌｕｓＳｕｂｔｉｌｉｓ）或纳豆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｎａｔｔｏ）发酵大豆制造成的,日本民众十分喜欢食用。同时也被用作民间药品,以预防和治疗心脑血管性疾病。     

体外培养和遗传育种

<正>853162细胞分裂素在玉米雄穗培养成正常小穗的发育过程中的相对效应[英]/Polow-ick,P.L.…//Can.J.Bot.-1984,62,(4).-830～834[译自DBA,1984,3(17),84-08204]     

三个家猪品种和rob易位群染色体分带多态性的比较

对家猪不同品种及家系间的染色体组型、C-带、Ag-NORs多态性进行的研究表明：杜洛克猪、约克夏猪、长白猪体细胞染色体数2n=38,核型2n=10sm+12m+4st+12t, 而13/17易位纯合子猪（36, rob. 13/17）的体细胞染色体数2n=36,核型2n=10sm+12m+6st+8t; 13/17易位杂合子猪（37,rob. 13/17）的体细胞染色体数目为 2n＝37,核型为2n=10sm+12m+5st+10t。5种家猪的C-带在13～18号染色体上存在大、中、小三种类型, 且呈多态性分布。杜洛克猪、约克夏猪、长白猪、13/17易位纯合子猪、13/17易位杂合子猪的Ag-NORs均数分别为2.05、2.06、2.00、1.99、1.98,说明Ag－NORs在品种、个体及细胞间具有多态性。 Abstract:The present experiment is carried out to make comparative stdy on polymorphism of chromosome Karyotypes, C-band ?and Ag-NORs of different breeds and strains in domestic Pigs. The results showed that the chromosome number of somatic cell in Duroc, Yorkshire and Landrace Pig Was 38 and the karyotype was 2n=10sm+12m+4st+12t. But in heterozygous Rob 13/17(37, rob. 13/17) Pig, the chromosome number of somatic cell was 37 andthe karyotype was 2n=10sm+12m+5st+10t, while in homozygousRob 13/17(36, rob. 13/17) Pig, the somatic cell chromosome number was 36 and the karyotype was 2n=10sm+12m+6st+8t. It was also showed that there were three C-band types in size on chromosome No. 13-18 showing polymorphism in three breeds and two strains of domestic Pigs. The average of Ag-NORs in Duroc, yorkshire,Landrace, homozygous Rob. 13/17 and heterozygous Rob. 13/17 Pig was 2.05, 2.06, 2.00, 1.99 and 1.98, respectively. It is suggested that Ag-NORs have polymorphism among strains, which can be used as a genetic index to analyse relationships among domestic animals with high reliability.     

小鼠卵母细胞体外成熟、体外受精的效果观察

目的　研究不同培养条件对小鼠卵母细胞体外成熟及体外受精率的影响。方法　小鼠卵母细胞分别在含有FSH、BSA和胰岛素的培养液中体外成熟,在Whitten 氏液中体外受精,比较体外成熟率、体外受精率。结果　1- 裸卵(DO) 的体外成熟率、体外受精率(81-4% ,31-0 % ) 均高于卵丘卵母细胞复合体(COC)(48-6 % ,27-1% ) 。2- 在培养液中添加FSH、胰岛素和BSA,卵母细胞的体外成熟率为77-9 % ,82-3% 、60-7% ;体外受精率为77-2 % 、72-6 % 、26-7% ;2 - 细胞率为49-2 % 、34-2 % 、10-0% 。胰岛素组的卵母细胞IVM 率最高,但IVF率、2 - 细胞率低于FSH 组。3- 添加BSA的两组的体外受精率只有26-7 % 、25-8 % ,显著低于其他组,其体外成熟率也较添加FSH 和胰岛素的组成。4- 排出第一极体(PbI) 的卵母细胞的体外受精率和2 - 细胞率(85-9 % ,22-4% ) 均高于GV期卵母细胞(71-1 % ,12-9 % ) 。结论　1- 卵丘卵母细胞(COC) 较裸卵(DO) 的体外成熟率、体外受精率都低,差异显著(P成熟< 0-01;P受精< 0-05) 。2-FSH 和胰岛素均能提高小鼠卵母细胞的体外成熟率、体外受精率。3-BSA可以降低小鼠卵母细胞体外受精率,差异极显著。4-GV 期卵母细胞的体外受精率显著低于体外培养的排出第一极体的卵母细胞(P2 - cell < 0-05,P受精<0-05)     

瓦尼桑黄固体发酵产物的化学成分及其生物活性研究

对瓦尼桑黄(Sanghuangporus vaninii)固体发酵产物的化学成分及生物活性进行研究。采用超声提取、柱层析以及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,通过波谱数据鉴定了化合物的结构,并对所得单体化合物进行体外抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶和黄嘌呤氧化酶抑制活性筛选。从瓦尼桑黄固体发酵产物中分离得到17个化合物,分别为(2Z,4E)-γ-ionylideneacetic acid(1)、phellinulin E(2)、phellinulin F(3)、phellinulin G(4)、phellinulin J(5)、phellinulin L(6)、phellinulin M(7)、phellinulin N(8)、elgonenes D(9)、咖啡酸(10)、hispidin(11)、3-hydroxyhispidin(12)、原儿茶酸(13)、4-(3-ethoxy-4-hydroxyphenyl)but-3-en-2-one(14)、丁子香酚(15)、亚油酸甲酯(16)、硬脂酸(17),其中化合物1～9为首次从瓦尼桑黄中分离得到。活性测试结果显示化合物10～13表现出良好的...     

光甘草定抗乳腺癌作用机制的分析

[目的]探究光甘草定抗乳腺癌(Breast cancer, BC)的作用机制。[方法]采用噻唑蓝(MTT)实验考证光甘草定对人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的抑制作用;通过PharmMapper数据库获得与光甘草定具有潜在相互作用的靶点;以“Luminal-A”和“Basal-like breast cancer”为关键词从Gene Cards数据库中下载乳腺癌相关靶点。将交集靶点导入DAVID数据库中进行富集分析,并基于STRING数据库和Cytoscape软件筛选潜在核心基因。利用GEPIA2、UALCAN和Kaplan-Meier Plotter数据库验证核心基因的表达,获取预后生物标志物并分析其泛癌性。[结果]共筛得光甘草定相关靶点286个,Luminal-A相关靶点4 285个,Basal-like相关靶点944个。光甘草定主要通过调节癌症的途径、BC通路以及PI3K-Akt通路等116条通路(P<0.05)。10个核心基因中仅MAPK1在数据库间的表达趋势不一致,且高表达的HSP90AA1与BC生存和预后不良显著正相关,并在多种肿瘤中显著高表达。[结论]光...