利用分子量阵列平台进行特定序列甲基化分析的方法探讨

目的:探讨利用分子量阵列平台进行特定序列甲基化分析的方法。方法:通过对不同扩增条件和扩增效率及不同条件处理的质谱分析比较了MassArray平台进行甲基化分析的特点。结果:本研究通过与重亚硫酸盐测序结果比较证实,MassArray分子量阵列技术平台能够反映甲基化修饰的真实水平;通过不同条件下PCR扩增效率与甲基化分析的结果,发现扩增效率是制约MassArray分子量阵列技术平台甲基化分析的关键因素,而产物的放置时间和不同的处理没有明显影响甲基化分析。结论:Mas-sArray甲基化分析平台是高效快速检测甲基化修饰的平台,在使用过程中应该根据实际的实验条件,进行合理的质控。     

注意缺陷多动障碍低觉醒模型的新证据

注意缺陷多动障碍(Attention Deficit Hyperactivity Disorder,ADHD)是儿童期常见的一种发展性的异常,其病因及发生机理至今未明。低觉醒模型是ADHD成因的一种假设。本文从睡眠障碍导致的低觉醒探讨ADHD发生机理。通过对ADHD儿童的睡眠障碍进行分析以及将ADHD外在表现与睡眠剥夺后的表现进行对比分析,得出ADHD儿童存在的低觉醒是由于外显的或内隐的睡眠障碍引起的,一方面间接证明了低觉醒模型,另一方面为ADHD的成因研究开拓了新的思路。     

风毛菊属雪兔子亚属瘦果形态及其分类学意义

运用扫描电子显微镜观察了风毛菊属(Saussurea)雪兔子亚属及其近缘类群共28种植物的瘦果形态.结果表明:同一种内,瘦果形状、大小、颜色、纹饰等都比较稳定.草甸雪兔子和星状雪兔子具有不同程度的齿冠而与雪兔子亚属其它种类的瘦果不同.雪兔子亚属瘦果表面纹饰主要为条纹型,表现出相对的一致性.条纹可以进一步分为有隔条纹、无隔条纹及过渡类型3亚型,条纹的亚型和组的划分有一定的相关性,并表现出一定的演化关系.其它类群的瘦果表面纹饰有条纹型、网纹型、复合型、胞状纹饰4种类型.麻花头属、牛蒡属、飞廉属代表种的瘦果表面纹饰为条纹型,和雪兔子亚属比较近缘.     

Retromer Subunits VPS35A and VPS29 Mediate Prevacuolar Compartment （PVC） Function in Arabidopsis

Intracellular protein routing is mediated by vesicular transport which is tightly regulated in eukaryotes. The protein and lipid homeostasis depends on coordinated delivery of de novo synthesized or recycled cargoes to the plasma membrane by exocytosis and their subsequent removal by rerouting them for recycling or degradation. Here, we report the characterization of protein affected trafficking 3 （pat3） mutant that we identified by an epifluorescence-based for- ward genetic screen for mutants defective in subcellular distribution of Arabidopsis auxin transporter PIN1-GFR While pat3 displays largely normal plant morphology and development in nutrient-rich conditions, it shows strong ectopic intracellular accumulations of different plasma membrane cargoes in structures that resemble prevacuolar compart- ments （PVC） with an aberrant morphology. Genetic mapping revealed that pat3 is defective in vacuolar protein sorting 35A （VPS35A）, a putative subunit of the retromer complex that mediates retrograde trafficking between the PVC and trans-Golgi network. Similarly, a mutant defective in another retromer subunit, vps29, shows comparable subcellular defects in PVC morphology and protein accumulation. Thus, our data provide evidence that the retromer components VPS35A and VPS29 are essential for normal PVC morphology and normal trafficking of plasma membrane proteins in plants. In addition, we show that, out of the three VPS35 retromer subunits present in Arabidopsis thaliana genome, the VPS35 homolog A plays a prevailing role in trafficking to the lyric vacuole, presenting another level of complexity in the retromer-dependent vacuolar sorting.     

小麦冰重结晶抑制蛋白基因TaIRI5的克隆及分析

为了明确小麦冰重结晶抑制蛋白基因(TaIRI5)在小麦生长发育过程中的作用,该研究以小麦品种‘北京841’为材料,利用RT-PCR方法克隆TaIRI5基因,并对该基因进行生物信息学分析、组织特异性表达分析、启动子活性分析以及亚细胞定位分析。结果显示:(1)成功克隆到TaIRI5基因,该基因全长1203 bp,开放阅读框为858 bp,编码285个氨基酸,蛋白质分子量为70.7 kD,等电点为5.07,属于疏水性蛋白。(2)实时荧光定量PCR结果显示,TaIRI5基因在小麦的根、茎、叶片、雌蕊、雄蕊、护颖、种子中均有表达,其中根部的相对表达量最高,在雌蕊中表达量最低,表明该基因在小麦的生长发育过程中起重要作用。(3)TaIRI5基因的启动子分析表明,该区域除CAAT-box和TATA-box启动子核心元件外,该序列还包含9个光响应元件和6个激素应答元件及其他元件;利用TaIRI5基因不同长度(498 bp、999 bp、1500 bp)的3个候选启动子,构建了含有GUS基因的pCAMBIA1301融合表达载体;烟草转化实验表明,3个候选启动子都能启动该基因的表达,但表达模式略有差异。(4)成功构建含有GFP基因的融合载体pCAMBIA1300-TaIRI5-GFP,亚细胞定位结果显示,TaIRI5定位于细胞膜上。该研究结果为进一步研究小麦TaIRI5基因功能奠定了基础。     

海南岛热带低地雨林攀援竹叶片光合特性季节动态

为探究攀援竹的光合生理特性及其在热带雨林中的生存适应机制,该研究应用LI-6400便携式光合作用测定系统,分别于2、4、7和11月测定了海南岛甘什岭热带低地雨林的无耳藤竹(攀援能力较强)和响子竹(攀援能力较差)光响应曲线和CO2响应曲线。结果显示:(1)无耳藤竹各月份的最大光合速率、光饱和点、光补偿点、暗呼吸效率和气孔导度总体大于响子竹,表观量子效率和胞间CO2浓度总体小于响子竹。(2)两个竹种的最大光合速率、光饱和点、光补偿点、暗呼吸效率、气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率均在7月份较高,表观量子效率和水分利用效率则均在2月份较高。(3)无耳藤竹各月份的羧化效率、饱和最大净光合速率和光呼吸速率均高于响子竹,两竹种4月份的CO2饱和点和CO2补偿点最高,但羧化效率和饱和最大光合速率较低。研究表明,无耳藤竹为阳性植物,其光合能力优于响子竹,对CO2浓度变化的适应能力更强,而响子竹以其耐荫的特性在热带雨林中与其他物种共存;两攀援竹种的光合能力均表现为雨季大于旱季,它们在雨季主要通过提高光饱和点、气孔导度、胞间CO2浓度来提高其净光合速率,在旱季主要通过降低蒸腾速率和提高水分利用效率来维持光合作用;两种攀援竹光合特性季节变化是环境和竹种自身生理特性共同作用的结果,不同的光合生理特性决定了其在热带雨林中不同的生存策略。     

早期肠内营养制剂联合谷氨酰胺、低分子肝素对老年重症肺炎患者炎症程度、T淋巴细胞亚群分布及并发症发生率的影响

目的：探讨早期肠内营养制剂联合谷氨酰胺、低分子肝素对老年重症肺炎患者炎症程度、T淋巴细胞亚群分布及并发症发生率的影响。方法：选取2017年2月-2019年2月本院收治的老年重症肺炎患者90例作为研究对象,经随机数表法分为对照组、研究组各45例。对照组患者在常规治疗同时接受早期肠内营养制剂,研究组患者在对照组基础上加入谷氨酰胺、低分子肝素,持续1周后评估疗效。对比两组患者的治疗效果、血清炎症介质［高迁移率族蛋白（HMGB-1）、白介素-17（IL-17）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）］及外周血T淋巴细胞亚群［CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+比值］分布水平的差异,记录治疗期间药物相关不良反应、严重并发症的发生情况。结果：治疗1周后,研究组患者的总有效率高于对照组患者（P＜0.05）;血清中HMGB-1、IL-17、MCP-1、CRP、PCT的水平低于对照组患者;外周血中CD3+、CD4+T淋巴细胞分布水平及CD4+/CD8+比值大于对照组,CD8+T淋巴细胞分布水平低于对照组（P＜0.05）。治疗期间,两组恶心呕吐、头晕头痛、腹泻便秘、皮疹水泡发生率的差异无统计学意义（P＞0.05）;研究组患者的弥散内血管内凝血、脓毒症发生率低于对照组患者（P＜0.05）;两组间心力衰竭、死亡率差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：老年重症肺炎患者在早期肠内营养制剂应用同时采用谷氨酰胺、低分子肝素进行联合干预,可积极提升疗效并均衡机体炎症反应、免疫紊乱,一定程度减少严重并发症发生。     

基于细胞亚群调控提升生物合成效率的研究进展

采用合成生物学与代谢工程技术设计与构建微生物细胞工厂是实现化学品绿色生物制造的重要方法。微生物发酵过程中低产细胞亚群和非生产细胞亚群由于代谢负担轻,更加具有生长优势,会降低产物合成的综合效率。目前,基于响应产物浓度的生物传感器,偶联产物合成与生长的细胞亚群调控系统有助于解决这个问题。综述了细胞亚群调控系统设计和构建的常用方法,重点讨论了目前细胞亚群调控系统存在的问题及其解决策略。     

亚硒酸钠对矮脚黄白菜农药残留和重金属积累的影响

采用盆栽试验考察了不同浓度和pH的亚硒酸钠溶液对矮脚黄白菜啶虫脒残留和重金属积累的影响。结果表明,亚硒酸钠溶液在浓度为1 mg/L且pH 7.0时对矮脚黄白菜促生效果显著优于对照和其它处理,叶绿素含量最高;在5 mg/L且pH 6.5时,啶虫脒和重金属Cd、Pb含量均显著下降;浓度为10 mg/L时对降低重金属含量的效果不明显。本研究表明,亚硒酸钠在降低植物农药残留和重金属积累方面具有一定的应用潜力。     

亚精胺诱导自噬的作用机制

亚精胺(spermidine)是含有3个胺基的低分子量脂肪族碳化物,是存在于所有生物体中的天然多胺之一。自噬(autophagy)对于降解细胞内受损蛋白质和细胞器是必需的。外源性亚精胺可作为自噬的天然诱导剂,并且是安全和无毒的。新近研究表明,亚精胺可通过AKT/AMPK-FoxO3-Atg途径诱导自噬,还能促进组蛋白脱乙酰基酶4(histone deacetylase 4,HDAC4)向细胞核转运,降低细胞质HDAC4含量,进而增强微管相关蛋白1S(microtubule-associated protein 1S,MAP1S)乙酰化和稳定性以激活自噬。此外,亚精胺可作为乙酰转移酶抑制剂调节EP300活性,进而改变Atg5、Atg7、LC3和Atg12的乙酰化状态。同时,还可通过诱导哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)去磷酸化,激活ULK1/2-Atg13-FIP200复合物参与调控动物机体内的自噬过程。本文就自噬概念和亚精胺诱导自噬作用途径的最新研究进展作一综述。