双重实时荧光PCR法检测食品和饲料中的鸡源性成分

根据鸡线粒体DNA细胞色素b基因序列和内参照基因PUC18质粒基因序列设计特异性引物和以不同荧光素标记的TaqMan探针。通过对反应条件的优化筛选,建立能同时扩增鸡源性成分和内参照基因成分的双重实时荧光PCR检测方法。设置内参照反应是为了监控反应体系中是否含有PCR反应的抑制物,避免出现假阴性结果。分别以鸡、鸭、鹅、火鸡、牛、羊、猪、鱼、兔、驴、鹿、狗、马、鸽子、大豆、玉米、小麦、大米、马铃薯及番茄的线粒体DNA作为模板进行特异性试验,结果表明该方法仅能特异性扩增鸡源性成分,而对其它物种未见有效扩增。通过灵敏度测试,该方法检出限达0.01%。所制定的方法特异性高,灵敏度好,可以作为食品和饲料中鸡源性成分的高效检测方法。     

来航鸡FOXL2蛋白的生物信息学分析

目的:预测来航鸡FOXL2蛋白的结构和功能.方法:生物信息学方法预测来航鸡FOXL2蛋白的组成,基本性质、同时构建其编码产物的系统进化树,并对其抗原表位进行预测.结果:该条氧基酸残基中脯氨酸含量最多,分子量为33 504.8,半衰期为30h,理论等电点为9.04,分子式为C1488H2269N425O432S15,在细胞核内发挥作用,可能具有转录和转录调控功能,与红原鸡的同源性最高,其最有可能的抗原表位位于37 -49、82 -91、133 -147个氨基酸之间.结论:利用生物信息学方法预测其功能和结构,为对其下一步研究奠定基础.     

蛋氨酸羟基类似物对肉鸡骨骼性能和基因表达的影响

本文以雄性罗斯肉鸡为材料,探讨饲粮添加不同蛋氨酸源:蛋氨酸(DLM)、蛋氨酸羟基类似物(HMTBA)和蛋氨酸羟基类似物钙盐(HMTB-Ca)对肉鸡骨骼性能和基因表达的影响。结果表明,HMTBA和HMTB-Ca能提高肉鸡终体重、日增重、血液GSH/GSSG比值、抗氧化酶(CAT)水平、总抗氧化能力(T-AOC)、骨骼长度、重量、骨骼指数(p<0.05)。不同蛋氨酸源对肉仔鸡采食量、料重比和灰分含量影响不显著(p>0.05),HMTBA组骨生长分化因子-5(GDF-5)表达量显著上升(p<0.05)。HMTB-Ca显著提高骨骼强度、钙磷含量,下调金属基质蛋白酶-2(MMP-2)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平(p<0.05)。由此可知,采食蛋氨酸羟基类似物及其钙盐饲粮,可提高肉鸡体增重,改善血液氧化还原状态,改善骨骼生长发育,其中HMTB-Ca对骨骼作用更显著。     

固始鸡1日龄和36周龄下丘脑高丰度差异性MiRNA的鉴定及功能预测分析

为鉴定鸡下丘脑发育相关特异性表达miRNA,基于固始鸡1日龄和36周龄下丘脑小RNA的Solexa测序数据,共鉴定到266种2个发育阶段共表达的miRNA,其中157种miRNA的表达水平被显著下调,22种被显著上调.聚类分析显示,鸡下丘脑高丰度差异性miRNA主要集中于let-7、mir-181、mir-30、mir-99、mir-1和mir-17等基因家族.另外,预测了10种高丰度差异性miRNA的靶基因,并进行了相应的GO分析和KEGG通路分析.结果显示,预测靶基因在发育过程、代谢过程、细胞过程和生物学过程调节等4个生物学过程以及细胞周期、粘着斑、TGF-beta信号通路和MAPK信号通路等通路中显著富集.研究结果为进一步揭示miRNA调控鸡下丘脑发育的分子机制提供了有益线索.     

荧光Real-time PCR鉴定鸡胸骨总RNA质量

为了更准确地鉴定提取鸡骨总RNA的质量,试验分别用核酸蛋白检测仪、1%琼脂糖凝胶电泳和荧光Real-time PCR检测评价3种不同的方法提取成年鸡胸骨总RNA的质量。结果显示,荧光Real-time PCR可更好地鉴定提取的骨总RNA的质量。用核酸蛋白检测仪、1%琼脂糖凝胶电泳能粗略检测RNA的纯度和完整性,但不能反映提取过程中是否引起基因不均一的减少,所检测的纯度也不能精确反映RNA的反转录效率。     

华南双季稻区早稻收割和晚稻移栽对褐飞虱种群动态的影响

为了阐明华南双季稻区早稻收割和晚稻移栽对褐飞虱种群动态的影响,2011年在韶关市采用田间调查与卵巢解剖的方法研究了双季早稻、双季晚稻、田埂杂草上褐飞虱的种群动态及虫源性质。结果表明:早稻收割后,早稻上大量的褐飞虱1～2龄若虫被淘汰,3龄以上若虫及成虫不断转移扩散致使附近晚稻秧田和杂草上褐飞虱虫量突增;晚稻移栽之后,杂草及晚稻秧田的褐飞虱又向新插秧的晚稻进行转移,但成为有效虫源的虫量较少,因此,早稻收割和晚稻移栽对褐飞虱种群动态造成了极为不利的影响,晚稻秧田和田埂杂草可作为褐飞虱转移过程中的流动栖息场所,在褐飞虱虫量转移中起着一定的作用。     

褐黄孢链霉菌原生质体制备与再生

以纳他霉素产生菌株褐黄孢链霉菌SG-2002为出发菌株,考察了菌丝体培养基、甘氨酸浓度、培养时间、溶菌酶浓度、酶解温度、酶解时间及再生培养基对原生质体形成与再生的影响.原生质体形成和再生的最佳条件为S培养基中添加1%的甘氨酸,菌丝体培养 30 h,溶菌酶浓度 40 mg/(g菌体干重),酶解温度 30 ℃,酶解时间 60 min.褐黄孢链霉菌的原生质体形成量达到4.0×106 个/mL,再生培养基选择R5′培养基,再生率为9.0%.     

黑龙江4种铁线莲色谱指纹特征比较分析

运用化学计量学方法,比较分析黑龙江4种铁线莲植物,辣蓼铁线莲、棉团铁线莲、褐毛铁线莲、齿叶铁线莲根及根茎石油醚提取物的色谱指纹特征。色谱-光谱数据的多元分辨结果表明4种铁线莲的色谱指纹特征中,总计至少有45种化学成分存在,共有的化学成分为14种,单独的化学成分分别为3、6、2及2种。聚类分析显示,辣蓼铁线莲与棉团铁线莲间的相似程度在4种铁线莲全部两-两组合的相似程度中最小。     

鸡枞发酵菌粉中皂苷的大孔树脂分离纯化

目的:研究大孔吸附树脂纯化鸡枞皂苷的方法.方法:采用分光光度法测定鸡枞皂甙的含量,分别考察了树脂种类、样品液浓度、pH值、吸附流速、洗脱剂浓度对鸡枞皂甙分离纯化的影响.结果:HPD-450树脂最适合鸡枞皂苷的纯化.工艺条件为:洗脱剂乙醇的体积分数为40%,吸附流速为1～2mL/min,样品液浓度为2.5～4.0mg/mL,样品液pH值为5～7.采用HPD-450大孔吸附树脂对鸡枞皂甙进行纯化效果最优.结论:在上述条件下,大孔树脂可用于鸡枞皂甙的分离纯化.     

鸡6个功能基因microRNA靶标区域SNP的生物信息学预测

GDF-8、IGF-I,IGF-III、IGF2R、,IGFBP2和GHR是鸡的重要经济性状候选基因.利用miRanda和Targetscan软件预测6个基因3'UTR潜在的microRNA靶标,并发掘靶标区域SNP位点.结果表明:在6个基因的26个microRNA靶标区域,共检测到125个SNP位点,在靶标及其5'和3'邻接等长侧翼区分别检测到47个,44个和35个SNPs位点,其中12个SNP定位于靶标种子序列互补区.种子序列互补区及其3'侧翼区的SNP位点可能会影响microRNA的调控,导致家禽的表型变异.