MiRNA在不明原因复发性流产中的作用

造成复发性流产的原因很多,仍有一半以上无法明确原因,在病因、预防及治疗方面仍有待探索.MiRNA作为高度保守的非编码小RNA,参与了体内细胞发育、分化、凋亡等过程.研究证实,miRNA不仅参与肿瘤、心脑血管疾病等的发生,还参与卵泡发育、胚胎着床、胎盘-母体血循环等妊娠过程的多个环节.表达异常的miRNA谱不仅可作为生物...     

白念珠菌在巨噬细胞逃逸途径的研究进展

<正>白念珠菌(Candida albicans)是最常见的机会性致病真菌之一,可以定植于人类的口腔、胃肠道和生殖道等部位^[1],当宿主的体表微生态失衡时,皮肤黏膜屏障或免疫功能受到破坏,白念珠菌就会导致感染^[2-3]。白念珠菌感染机体后,可以刺激机体产生固有免疫和特异性免疫,介导对病原体的杀伤,从而清除血液和感染器官中的真菌^[4]。其中固有免疫作为抵抗真菌感染的第一道防线,在真菌感染的早期发挥了重要作用,而巨噬细胞是其主要组分之一^[5]。     

数字细胞模型的研究及应用

组学分析技术的发展推动生物学逐渐成为一门以数据分析为中心的科学。依托生物数据在细胞整体系统水平建立数字细胞模型,对于理解细胞系统组织原理和生命产生进化规律,预测各种环境和基因扰动对细胞功能的影响并指导设计人工生命具有重要意义,因此数字细胞的构建模拟设计已成为合成生物学的核心研究内容与底层支撑技术。本文重点对天津工业生物技术研究所创立十年来在数字细胞研究方面的进展进行回顾介绍,重点包括基因组尺度代谢网络模型的构建、质控以及其在途径设计和指导菌种代谢工程改造方面的应用,进一步结合近年来细胞模型研究的前沿趋势,对整合多种约束的模型的构建和分析研究方面的最新成果进行了介绍,最后对数字细胞研究的未来发展方向进行展望。数字细胞技术将与基因组测序、合成和编辑等合成生物学前沿技术一起提升人们对生命进行读写改创的能力。     

小檗碱增强非小细胞肺癌放疗敏感性和下调STAT3信号通路分子水平

目的 探讨小檗碱对非小细胞肺癌放疗敏感性的影响及其作用机制.方法 分别用放疗、小檗碱处理、小檗碱联合放疗非小细胞肺癌Calu-1细胞后,通过MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡.构建Calu-1细胞异位移植瘤裸鼠模型,分别采用放疗、小檗碱处理和小檗碱联合放疗处理异位移植瘤裸鼠后,测量移植瘤的体积和质量;通过HE...     

急慢性感染中B淋巴细胞应答规律比较研究的病毒工具构建

在急性或慢性等不同感染情况下B淋巴细胞应答规律各异。本研究旨在构建重组Armstrong株和重组Clone13株淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus, LCMV),以诱导针对WE株糖蛋白(glycoprotein, GP)特异的B细胞受体(B cell receptor, BCR)转基因细胞KL25HL B细胞应答,从而为比较急慢性感染过程中宿主B细胞的免疫应答差异建立实验模型。首先,通过共转染细胞,使之转录LCMV基因组片段并表达病毒蛋白,成功拯救出重组LCMV-Armstrong(recombinant LCMV-Armstrong, rARM)和重组LCMV-Clone13(recombinant LCMV-Clone13,rCL13)。测序分析表明,这2种重组病毒的GP序列被成功替换为LCMV-WE株的GP序列,并证实它们在感染细胞后具备蚀斑形成能力。随后,本研究使用rARM及rCL13感染野生型C56BL/6J小鼠。结果表明,这2种重组病毒保留了野生LCMV-Armstrong(wild type LCMV-Armst...     

C57BL/6小鼠Lewis皮下移植瘤肺转移灶的病理及超微结构观察

目的 构建C57BL/6小鼠Lewis皮下移植瘤肺转移模型,观察肺转移灶病理以及超微结构变化。方法 C57BL/6小鼠右前肢腋窝皮下接种Lewis细胞,定期测量肿瘤体积,绘制生存曲线,对存活期35 d以上的小鼠进行解剖学观察,HE染色检测肺组织病理变化,透射电镜观察肺组织的超微结构。结果 接种14 d小鼠右前肢腋窝皮下成瘤率为100%,22 d小鼠开始出现死亡,平均生存周期(33.00±6.98)d;解剖学可见肺表面出现典型转移灶,外观呈圆形半透明状,周围有出血;HE染色显示肺转移灶染色深,外观近似圆形,与周围组织界限明显,肿瘤细胞排列紧密,内部可见丰富的毛细血管;透射电镜下可见肺转移灶内肿瘤细胞具有显著的异型性,出现巨核、双核和奇异型核,胞质内含有大量的糖原颗粒和线粒体数量,肿瘤细胞间可见细胞连接。结论 延长存活时间可使皮下移植瘤小鼠形成典型的肺转移灶,肺转移灶内病理学和超微结构变化符合恶行肿瘤的病变特点。     

人源化小鼠在呼吸道病原研究中的应用与发展

小鼠模型对于呼吸道病原的研究有着重要意义。然而进化所带来的肺及免疫系统的物种差异,使小鼠模型难以精准模拟人体的呼吸道病原感染。通过构建免疫系统人源化小鼠,可更好地再现人体免疫系统对呼吸道病原感染的应答。构建肺组织人源化小鼠和肺/免疫系统双人源化小鼠可实现人特异性的呼吸道病原感染及其免疫响应。本综述将从免疫系统、肺、肺/免疫系统双人源化3个方面,回顾人源化小鼠在人类呼吸道病原研究方面的进展。     

小细胞肺癌原代细胞脑转移模型研究初探

目的 本研究拟分离培养保留原始肿瘤的重要特征和功能的小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)原代细胞,并在此基础上构建SCLC原代细胞脑转移小鼠模型,为SCLC脑转移患者的药物研发和评估提供更贴近临床的动物模型。方法 收集临床病人的新鲜SCLC肿瘤组织样本进行小鼠皮下移植,通过小鼠的荷瘤情况、肿瘤组织大小和肿瘤生长曲线的结果,确定小细胞肺癌人源肿瘤异种移植(patient-derived xenograft, PDX)模型的构建情况。并对成瘤后的肿瘤组织进行原代细胞分离培养,通过细胞划痕实验和增殖实验检测细胞的增殖和侵袭能力。通过颈动脉注射原代细胞构建SCLC脑转移模型,并通过临床表现和病理观察确定转移模型是否成功。结果 (1)成功构建SCLC皮下PDX模型,肿瘤传代时间约为56 d,肿瘤生长曲线呈对数生长趋势。(2)成功分离筛选出具备成瘤性的SCLC原代L0细胞,并证实该L0细胞具备较强的细胞迁移和增殖能力。(3)颈动脉注射法成功构建SCLC脑转移模型,并分离出具备脑转移特性的SCLC脑转移B0细胞。结论 本研究利用分离培养SCLC原代细胞,成功构建SC...     

胰腺癌免疫系统人源化小鼠模型的构建及评估

目的 构建并评估胰腺癌免疫系统人源化小鼠模型,以期为胰腺癌的免疫治疗研究提供理想的临床前模型。方法 应用Ficoll密度梯度离心法,从健康人外周血中分离出新鲜的单个核细胞(peripheral blood mononucear cells, PBMC),经尾静脉注射植入重度联合免疫缺陷小鼠NCG体内,以构建免疫系统人源化小鼠模型,随后在小鼠皮下植入人胰腺癌细胞系Aspc1,并定期监测肿瘤生长情况,在PBMC植入后第3周,应用断尾法采集小鼠外周血进行流式分析,检测人CD45⁺细胞的水平,当肿瘤生长至100～200 mm³时开始给予抗PD-1单抗治疗,持续治疗3周后,对小鼠施行安乐死并取材,应用流式细胞术、免疫组化等方法分析胰腺癌免疫系统人源化小鼠外周血、脾、骨髓及肿瘤组织中人免疫细胞的浸润及活化情况。结果 植入人PBMC 3周后,在小鼠外周血、脾及骨髓中可检测到较高水平的人CD45⁺细胞;重建的人源免疫系统能够显著抑制人胰腺癌肿瘤的生长(P<0.01,P<0.001),并被人抗PD-1单抗活化,促进肿瘤组织中细...     

Mdr2基因敲除小鼠建立原发性肝癌模型观察

目的 观察C57BL/6背景的Mdr2基因敲除小鼠自发肝肿瘤形成情况。方法 (11.3±4.2)周龄Mdr2基因敲除C57BL/6-Abcb4^tm1小鼠9只和野生型C57BL/6小鼠5只,连续饲养65周后处死小鼠,留取血清及肝标本。检测血清ALT、AST、AFP水平,肝组织石蜡切片做HE、天狼猩红染色,免疫组织化学检测肿瘤及肿瘤旁组织CK-7、CK-19表达情况。结果 9只Mdr2基因敲除小鼠均自发形成肝肿瘤,血清ALT、AST、AFP水平均显著高于野生型小鼠(P<0.01),Mdr2基因敲除小鼠肝肿瘤CK-7、CK-19染色均为阴性。结论 Mdr2基因敲除小鼠连续饲养至(76.3±4.2)周龄时均自发形成肝肿瘤,其病理组织分型为肝细胞癌。