阔叶薰衣草芳樟醇合成酶基因的克隆与表达载体构建北大核心CSCD

以阔叶薰衣草(Lavandula latifolia)的鲜叶为试材,通过RT-PCR技术,获得阔叶薰衣草芳樟醇合成酶基因的cDNA序列。该序列长度为1809bp,编码602个氨基酸,包含一个1809 bp的开放阅读框,与NCBI上已公布的阔叶薰衣草的芳樟醇合成酶蛋白序列相似度为98%,有21个核苷酸差异,11个氨基酸差异,将其命名为Lslis。序列分析研究表明:Lslis具有多数单萜烯类合成酶基因典型的保守结构域,即DDXXD,RRX8W和(N,D)D(L,I,V)X(S,T)XXXE;具有芳樟醇合酶活性必需的DDXXD功能基团。Lslis推导氨基酸序列的预测分子质量和等电点分别为70.36和5.66 kD;疏水性分析结果表明其大部分氨基酸区域为亲水结构,该基因为亲水多肽。Lslis和已公布的阔叶薰衣草芳樟醇合酶Lllis的蛋白二级结构预测结果表明,两者在整体结构上基本保持一致,但Lslis相对于Lllis要少一个α螺旋结构。将其连接到pMD18-T的载体上,通过中间载体pCAMBIA1303,构建了Lslis基因的植物表达载体,并将其导入农杆菌,经菌落PCR鉴定和测序结果表明该片段已插入表达载体。     

SND1转基因小鼠的构建

目的:构建 SND1 过表达的转基因小鼠模型。方法:利用对小鼠 SND1 基因转录本构建 SND1 过表达载体pInsulator-CAG-3×FLAG-SND1,利用受精卵原核注射技术,将外源线性pInsulator-CAG-3×FLAG-SND1转基因载体注射到受精卵细胞核内,将存活受精卵进行胚胎移植制备 SND1 转基因小鼠,用PCR、RT-PCR技术鉴定转基因小鼠是否构建成功。结果:成功构建过表达 SND1 基因的转基因小鼠模型,为进一步研究 SND1 基因在动物体内的生物学功能奠定基础。     

云南澄广花应该作为极小种群植物加强保护

正云南澄广花(Orophea yunnanensis)是一个极度孤立的物种,其近缘种为产于印度的单花澄广花(O.uniflora Hook.f.et Thoms.)(李秉滔,1976)。根据标本记载,由侯宽昭先生于1940年4月1日采自云南省江川县(今澄江县)禄充笔架山,编号74518。自发现近76年以来再没有在笔架山周边地区发现过,是一个典型的狭域物种。我们在进行云南种子植物区划研究中,发现它显示了该区域与热带亚洲区域久远的地质联系。李秉滔先生和其外国同行在Flora of     

哺乳动物基因组靶向修饰阳性细胞富集的报告载体系统研究进展

基因组靶向修饰技术对基因功能研究、基因治疗以及转基因育种研究都具有重要的意义和价值。近年来发展起来的人工核酸酶如ZFNs、TALENs和CRISPR/Cas9等的应用大大提高了基因组靶向修饰的效率。但是由于核酸酶表达载体转染效率、核酸酶表达效率及活性以及基因组被打靶后的修复效率等因素在一定程度上制约着基因组靶向修饰阳性细胞的获得。因此富集和筛选基因组靶向修饰阳性细胞是一个亟待解决的问题。报告载体系统可以间接地反映核酸酶的工作效率并有效富集核酸酶修饰的阳性细胞,进而提高基因组靶向修饰阳性细胞的富集和筛选效率。本文主要针对由非同源末端连接(Non-homologous end joining,NHEJ)和单链退火(Single-strand annealing,SSA)两种修复机制分别介导的报告载体系统的原理和应用进行了详细的介绍,以期为以后的相关研究提供借鉴和参考。     

马铃薯StDof5的克隆及表达分析

【目的】DNA binding with one finger(Dof)基因家族是植物特有的转录因子在植物生长发育和胁迫响应中发挥重要作用。研究Dof转录因子在马铃薯响应逆境胁迫特别是盐胁迫中的功能与机制,为获得抗盐逆境胁迫新品种提供一定的理论和技术基础。【方法】克隆StDof5,并对其进行生物信息学分析,通过同源重组的方法构建StDof5过表达载体,转化马铃薯得到阳性植株,并对其表达进行分析。【结果】StDof5的CDS全长498 bp,编码165个氨基酸,分子式为C800H1236N242O246S9,StDof5原子个数2 533个,相对分子量为18 468.63 kD,等电点是8.47,脂肪族指数为51.45,不稳定系数为45.16,预测该蛋白为不稳定蛋白。预测得到的跨膜螺旋个数为0,其属于非跨膜蛋白。StDof5蛋白亲水性平均值为-0.876,预测该蛋白属于亲水性蛋白。StDof5蛋白二级结构预测结果显示α螺旋占20%,β转角占0,延长链占9.7%,无规卷曲占66.06%。盐胁迫表型试验表明,过表达植株（OPs）比野生型（DES）的株高、鲜重均有明显程度上升,但根长、根数和叶...     

荒漠中的"绿洲"

论述了荒漠中绿洲的意义、成因和它的发展。提出了绿洲的开发前景及它在荒漠地区的生态及经济价值,指出了发展和经营好绿洲的重要性。在发展中要以流域为单元系统治理．合理分配利用水资源,控制人口等关键问题,适度扩大绿洲,为荒漠地区的持续发展打下基础。     

南方鲇

南方鲇是我国特有的大型肉食性名优鱼类。具有个体大,生长快,抗病力强等特点。其形态特征、生活习性、繁殖与生长、人工养殖等都具有自身的特殊性,也是一种很好的实验研究材料。     

重型颅脑损伤患者人工气道的护理

目的：探讨人工气道的护理。方法：对19位病人加强消毒隔离措施;实行低渗液持续湿化气道;加强基础护理;合理应用抗生素。结论：加强人工气道的护理是控制肺部感染,降低人工气道并发症的重要保证。     

介绍2个游戏型生物分子模型

新课程必修一"分子与细胞"模块中,蛋白质分子和核酸分子的结构既是教学重点,也是教学难点.在课堂教学过程中,笔者尝试通过学生游戏的方式帮助学生建立起蛋白质和核酸的分子结构模型,不仅使抽象的分子结构变得直观化,大大地激发了学生的学习兴趣.同时也培养了学生空间想象能力、模型构建能力,使教学难点得以成功地化解,取得了较好的教学效果.     

极度濒危蕨类植物中华水韭人工批量繁育获得成功北大核心CSCD

中华水韭（Isoetes sinensis）是W.R．Maxon于1922年在江苏南京玄武湖发现,先后被列入《中国植物红皮书》和《国家重点保护野生植物名录》,属于极度濒危物种（CE）。