全文获取类型
收费全文 | 2271篇 |
免费 | 92篇 |
国内免费 | 622篇 |
出版年
2024年 | 11篇 |
2023年 | 49篇 |
2022年 | 70篇 |
2021年 | 57篇 |
2020年 | 57篇 |
2019年 | 66篇 |
2018年 | 53篇 |
2017年 | 57篇 |
2016年 | 53篇 |
2015年 | 69篇 |
2014年 | 130篇 |
2013年 | 88篇 |
2012年 | 113篇 |
2011年 | 151篇 |
2010年 | 135篇 |
2009年 | 129篇 |
2008年 | 155篇 |
2007年 | 102篇 |
2006年 | 121篇 |
2005年 | 120篇 |
2004年 | 159篇 |
2003年 | 109篇 |
2002年 | 106篇 |
2001年 | 106篇 |
2000年 | 81篇 |
1999年 | 76篇 |
1998年 | 45篇 |
1997年 | 68篇 |
1996年 | 62篇 |
1995年 | 31篇 |
1994年 | 42篇 |
1993年 | 47篇 |
1992年 | 63篇 |
1991年 | 52篇 |
1990年 | 32篇 |
1989年 | 45篇 |
1988年 | 14篇 |
1987年 | 16篇 |
1986年 | 10篇 |
1985年 | 16篇 |
1984年 | 5篇 |
1983年 | 5篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 4篇 |
1980年 | 1篇 |
1966年 | 1篇 |
1963年 | 2篇 |
排序方式: 共有2985条查询结果,搜索用时 15 毫秒
101.
亲和力是影响改型单链抗体应用于临床的重要因素之一.利用巨型引物PCR定点诱变方法,设计并化学合成出两组含多个突变位点的简并引物,在第一轮PCR中使用简并引物分别扩增出含突变碱基的两条特异性的DNA片段,即巨型引物,将其经琼脂糖凝胶电泳分离纯化后,作为3′和5′的两端引物应用于第二轮PCR反应中.通过改变标准PCR反应条件,调整引物与模板的浓度,扩增出特异性较强的目的DNA条带.PCR产物经回收后,进行DNA测序.测序结果表明利用该方法扩增得到特异的抗CD3改型单链抗体的突变体库. 相似文献
102.
103.
植物表达抗体的研究与发展 总被引:4,自引:0,他引:4
利用植物表达抗体是近年来兴起的植物基因工程的一个新领域.它将编码抗体或抗体片段的基因导入植物,从而在植物中产生全长抗体或抗体片段.利用植物表达抗体最诱人的潜在用途是可以大规模廉价生产治疗和诊断用抗体.此外,植物抗体还能够通过调控植物代谢改良植物性状并赋予植物对病虫害的抗性.目前植物抗体的商品化还存在一些问题. 相似文献
104.
用DIGFA单盲检测各类胃病患者血清HP特异性抗体,结果表明其敏感性为979%,特异性为915%,诊断效率达947%,youden’s指数为089。通过本法与常规ELISA比较,发现两法前四种诊断指标均无明显差异,但DIGFA简易、快速,无需任何设备,数分钟内即可得出正确结论,因此适合于基层医院查病、胃镜检查前过筛及流行病学调查应用 相似文献
105.
抗癌胚抗原单链抗体基因的构建及高效表达 总被引:8,自引:2,他引:6
采用重组PCR技术将已获得的抗癌胚抗原鼠源单克隆抗体E7B10重,轻链可变区基因经(Gly3Ser)3编码的寡核苷酸拼接成单链抗体基因,并在大肠杆菌中高效表达了单链抗体C端的融合蛋白,其表达量达到菌体总蛋白的20%,SDS-PAGE和Western印迹图谱显示表达产物分子量为27kD,与其基因编码蛋白的理论推算值相符。 相似文献
106.
β-catenin是Wnt/β-catenin信号通路的重要成员。本研究构建β-catenin的原核表达载体,成功地在大肠杆菌Escherichia coli中进行表达。镍柱纯化重组蛋白后免疫兔子,制备了抗棉铃虫β-catenin的多克隆抗体。ELISA和Western blot的方法检测抗体效价和抗体特异性,结果表明抗体的效价较高,特异性较好。最后应用该抗体调查了滞育和发育蛹脑中β-catenin的表达情况,从蛋白水平证实了发育蛹脑中β-catenin高于滞育蛹脑。本研究为后续研究棉铃虫β-catenin的功能以及Wnt/β-catenin信号通路在棉铃虫发育中的作用奠定了基础。 相似文献
107.
目的观察树鼩的细胞是否与抗鼠或抗人的CD抗体反应。方法采树鼩外周血与小鼠的CD3、CD4、CD8抗体反应。再分离培养树鼩的脐带间充质干细胞,分别与抗小鼠的CD29-FITC、Sca-1-PE、CD90-PE反应,与抗人的CD44-FITC、CD29-FITC、CD13-FITC、CD34-FITC反应。结果树鼩外周血与小鼠的CD3、CD4、CD8抗体不发生反应,但树鼩的脐带间充质干细胞与抗小鼠的CD29-FITC抗体发生反应,阳性率为99.8﹪。树鼩的脐带间充质干细胞与抗人的CD44-FITC抗体发生反应,阳性率为99.7﹪。结论树鼩的外周血与小鼠的CD抗体不反应,但树鼩的脐带间充质干细胞与小鼠的CD29-FITC抗体和人的CD44-FITC抗体反应效果较好。 相似文献
108.
[目的]磷酸二酯酶(Pde)作为G蛋白信号传导途径上的效应酶,发挥着重要作用。该酶已在粟酒裂殖酵母菌、稻瘟病菌等中有相关报道。通过对禾谷炭疽菌中Pde生物信息学分析,以期为深入开展该蛋白定位、功能研究等方面研究,以及实现以控制病原菌G蛋白信号途径功能新的药物靶标的开发提供有力的理论支撑。[方法]基于酿酒酵母中已经报道的典型Pde序列,利用Blastp以及关键词对禾谷炭疽菌蛋白质数据库进行比对、搜索,并通过SMART保守结构域分析、理化性质、疏水性、细胞信号肽、跨膜区结构、亚细胞定位以及二级结构等生物信息学分析,此外,通过对禾谷炭疽菌中的典型Pde与其他物种中的同源序列进行遗传关系比较分析。[结果]明确禾谷炭疽菌中存在2个Pde,上述Pde均含有最低比例的色氨酸,均属于亲水性蛋白,均不含有信号肽以及均定位于细胞质等特征。[结论]通过对比,发现禾谷炭疽菌、酿酒酵母中的Pde具有诸多相同性质,提示不同真菌之间存在的保守性。 相似文献
109.
为构建具有凝集性、免疫反应性的双功能融合蛋白,本研究采用重叠延伸PCR方法将2E8ScFv(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和mE2(猪瘟病毒E2蛋白主要抗原编码区基因)拼接成融合基因2E8mE2,并插入原核表达载体pET-DsbA,将重组表达质粒pET-DsbA-2E8mE2转化入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)PlysS中进行IPTG诱导表达,表达的融合蛋白经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定,结果表明:2E8mE2融合基因在大肠杆菌中获得了表达,表达产物以包涵体形式存在,分子量约为65kDa,与预期的大小一致。分别采用亲和层析法和谷胱甘肽再氧化法对融合蛋白进行纯化和复性,红细胞凝集试验证实:2E8mE2融合蛋白复性效果良好,既能够与人红细胞结合,又能够与猪瘟病毒抗体反应,具有双功能特性。 相似文献
110.
双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)有两个抗原结合位点,其中一个位点可与靶细胞表面抗原结合,另一个位点则可与载荷物(如效应细胞,分子等)结合。将BsAb应用于肿瘤治疗,发挥抗肿瘤效应的思想已有二十多年历史,随着对效应细胞生物学了解的加深和抗体工程的飞速发展,各种形式的BsAb相继出现,多种BsAb药物已进入临床初期试验或治疗使用阶段。本文就BsAb的各种新形式及其在肿瘤治疗中的应用新进展作简要概述。 相似文献