离体条件下外源茉莉酸甲酯对人参锈腐病菌的影响

人参(Panax ginseng)是我国传统的名贵药材,由毁灭柱孢(Cylindrocarpon destructans)引起的人参锈腐病是严重影响人参产量和品质的重要根部病害之一,在人参生产中会造成严重的经济损失.茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)是一类新型的生长调节物质,既可以参与植物对病原菌及其他逆境胁迫做出的应答并进行信号传递,又可用来诱导植物的抗病反应.为了明确MeJA对人参锈腐病菌的影响并解析MeJA与病原菌致病因子之间的相互关系,该文研究了外源MeJA在不同浓度下对C.destructans的直接影响,包括对菌落生长、孢子萌发、菌丝生长量、病菌分泌水解酶的影响.结果表明:MeJA能够强烈抑制病原菌的生长和孢子萌发,而对病原菌致病酶的活性则表现出促进作用;人参锈腐病菌在PDA平板上的菌落直径从(8.23±0.15) cm(对照)减少到(0.71±0.00) cm(800 μg·mL-l MeJA),在MeJA浓度达到最高时,菌落生长几乎完全被抑制;MeJA的浓度大于400 μg·mL-1时,病原菌的生物量减少了65.3％～ 100％,孢子萌发率和芽管长度减少了100％;MeJA在浓度大于200 μg·mL-1时,果胶酶、纤维素酶和淀粉酶活性升高而蛋白酶的活性却没有变化.综上表明,MeJA对病原菌产生抑制作用的临界浓度为200 μg·mL-1.该研究结果为后续使用MeJA处理人参植株进行诱导抗病性的研究奠定了基础,同时也有助于进一步了解人参锈腐病的致病机理,并为病害防控提供了理论参考.     

山梨酮脱氢酶模块与酮古龙酸杆菌底盘细胞的适配分析

酮古龙酸杆菌Ketogulonigenium vulgare是维生素C二步混菌发酵过程中的产酸菌。山梨酮脱氢酶(L-sorbosone dehydrogenase,缩写为SNDH)作为维生素C直接前体2-酮基-L-古龙酸(2-KGA)合成的关键酶,其作用机制并不十分清楚。借助全基因组测序抽提2个山梨酮脱氢酶基因,分别位于基因组(缩写为sndhg)和质粒(缩写为sndhp)上。通过工程化改造技术在工业产酸菌中构建山梨酮脱氢酶功能模块,比较其对2-KGA产量的影响。研究发现sndhg过表达对菌株产酸影响不明显,sndhp过表达使菌株明显产生副产物。将sndhg和sndhp分别配合辅因子PQQ合成基因pqq A,分别构建sndhg-pqq A和sndhp-pqq A模块,得到的工程菌株产酸情况与之前的结果大致相同。将4株K.vulgare工程菌株分别与内生芽孢杆菌Bacillus endophyticus混合培养传代50 d后,分离菌株进行混菌发酵,其2-KGA的转化率分别提高了15.4%、179%、0.65%和125%。表明混菌适应性进化策略是一种增加功能模块与底盘细胞适配性,进而快速获得优良性状菌种的有效方法。     

胃泌素C-端四肽的N-乙酰化和糖化及其对泌酸活性的影响

本文报道了胃泌素C—端四肽N—乙酰化和糖化的方法,并用大白鼠胃灌流技术研究了它们对泌酸活性的影响。结果表明,乙酰化和糖化均可提高其泌酸活性,其中葡萄糖—1—脱氧果糖四肽(Glc—1—deoxyfru—Trp—Met—Asp—Phe—NH_2)的泌酸活性超过了商品五肽胃泌素(Boc—α—Ala—Trp—Met—Asp—Phe—NH_2)     

乙醇酸氧化酶的纯化结晶和酪氨酸残基的修饰对酶活性的影响

从青菜叶片中纯化的GAO为淡黄色棒状或针状结晶,纯化度达129.3倍。NBS对GAO有强烈的抑制作用,其抑制效应不受pH的影响,抑制程度和 NBS浓度(0～10 μmol/L)呈线性关系;乙醇酸和草酸均能保护GAO免受NBS的抑制。NBS在全抑制浓度范围内并不降低OD_(280),但引起OD_(260)明显上升;当用乙醇酸保护GAO时,这种上升与酶的抑制同时消失。另外两种更专一的酪氨酸残基修饰剂NBSF和N—AI亦显著抑制GAO活性,底物乙醇酸对此有保护作用,N—AI抑制的GAO可被羟胺复活。     

维生素A酸诱导HL-60细胞分化后银染核仁形成区的研究

用Ag-NOR、Brachet反应和作者改进的悬浮培养细胞Ag-aNOR的TEM技术等,综合地对RA诱导HL-60细胞分化后银染核仁形成区的变化进行了研究。实验结果表明,银染NOR的均值在给药组与对照组细胞中差异不显著。对间期细胞进行Ag-aNOR反应,结果??表明其数量在给药组比对照组明显减少,同时发现Brachet反应显示富含rRNA的核仁数与Ag-aNOR数改变极为一致,提示虽然活性的rRNA基因的数量在RA诱导分化的HL-60细胞中不变,但其转录明显受抑,使rRNA合成减少,进而在细胞水平出现了恶性表达的核仁变得少而小、甚至消失的分化表型。HL-60细胞的Ag-aNOR电镜观察更进一步证明了这一结论。     

硫代巴比妥酸（TBA）法检测脂质过氧化水平的探讨

表示脂质过氧化反应有多种指标,如测定丙二醛产生(下称TBA法)、氧的吸收、共轭双键形成、乙烷释放等。在这些指标中,TBA法由于操作简便而广为应用。此法最早见于Wilbur等,他们发现人工氧化的