鸭各级卵泡中抑制素α和抑制素／活化素βA亚基信使RNA表达丰度的研究

采用非常灵敏的定量竞争RT朠CR技术对鸭各级卵泡中抑制素π和ρA亚基的mRNA表达丰度作了研究,发现在各级卵泡中均有此两亚基mRNA的表达,大卵泡中的π亚基表达量要高于ρA亚基.π亚基mRNA在小黄卵泡(SYF)中表达量最高,以其mRNA的平均相对丰度为1.00,则F1、F2、F3、F4/5、LWF(大白卵泡)中π亚基mRNA的平均相对含量分别为0.26±0.05、0.28±0.07、0.57±0.12、0.98±0.09、0.026±0.006.ρA亚基mRNA在F1中表达量最高,以其mRNA的平均相对丰度为1.00,则F2、F3、F4/5、SYF、LWF中ρA亚基mRNA的平均相对含量分别为0.218±0.09、0.111±0.03、0.058±0.011、0.053±0.013、0.005±0.002.结果显示,随着卵泡的增大π亚基表达量降低,ρA亚基却增加,说明在卵泡发育过程中,π和ρA亚基的表达是独立调节的,另外,ρA亚基在F1中的大量表达,说明F1可能是形成二聚体抑制素/活化素的主要场所.     

尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A2泊表达及其生化特征

将尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２Ｉ（Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ）的基因克隆至表达载体ｐＢＬＭＶＬ２,在大肠杆菌ＲＲ１中成功表达,表达产物Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ约占细菌蛋白质总量的３０％,以包含体的形式存在。纯化包含体后,将产物变性,复性,然后用ＦＰＬＣ Ｓｕｐｅｒｏｓｅ ＾ＴＭ１２纯化,产物经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测只有单一条带。     

黄铁矿对煤生物产气和微生物群落结构的影响

【目的】研究煤中矿物质黄铁矿对生物产气的影响。【方法】本研究以陕西榆林煤作为生物产气底物,以实验室前期驯化的产甲烷微生物作为出发菌群,通过在厌氧体系中添加不同质量的黄铁矿进行煤生物模拟产气试验。利用气相色谱仪、液相色谱仪、酶标仪、傅里叶红外光谱仪和Illumina高通量测序平台研究产气过程中CH₄含量、总挥发性脂肪酸(volatile fatty acids,VFAs)浓度、辅酶F₄₂₀含量、产气前后煤中有机官能团和微生物群落结构的变化。【结果】添加适量黄铁矿在产气前期(15–22 d)能促进CH₄生成,而产气后期(29–50 d)会抑制产气,而且添加0.5%黄铁矿的在前中期的产气量比对照组高48.1%,累计产气量达到193.67 μmol/g-coal。生物产气实验组反应液中的VFAs和辅酶F₄₂₀浓度整体均高于对照组,说明添加黄铁矿促进了反应体系中产酸细菌和产甲烷菌的活性。添加黄铁矿后煤中的醇和酚羟基,–NH–和–NH₂更易被微生物利用。黄铁矿添加对细菌和古菌的群落多样性有...     

线粒体在铁死亡中的形态特征和作用

铁死亡是铁依赖性的脂质过氧化作用驱动的一种独特的细胞死亡方式。与细胞凋亡、自噬性程序性细胞死亡和细胞焦亡等细胞死亡方式不同,铁死亡的主要特征是线粒体形态的改变,包括线粒体膜变得致密并伴随体积变小,以及外膜破裂和线粒体嵴的减少或消失。线粒体作为细胞代谢的核心,是铁代谢、脂质代谢和能量代谢中的重要细胞器。但是,线粒体如何参与铁死亡并在其进程中发挥怎样的作用仍存在争议。本文综述了现有对铁死亡发生和防御机制的认识,并且对线粒体在铁死亡进程中的促进和抑制作用进行了描述和分析,包括线粒体三羧酸循环和糖酵解、线粒体活性氧、线粒体脂质代谢对铁死亡的积极驱动过程,以及通过线粒体铁蛋白、线粒体二氢乳酸脱氢酶等分子对线粒体脂质过氧化物解毒并抑制铁死亡的作用机制。最后补充说明了其他涉及铁死亡的线粒体分子调控机制。本文通过综述线粒体在铁死亡进程中的最新研究进展,旨在对深入了解铁死亡中线粒体的功能及其对铁死亡发生发展的作用机制,为细胞生物学基础研究及临床相关疾病的研究提供理论依据和参考。     

火麻仁的化学成分研究

采用硅胶柱色谱和葡聚糖凝胶LH-20,从火麻仁70％乙醇提取物的氯仿和乙酸乙酯萃取部位分离得到6个化合物。经理化鉴定和波谱方法鉴定方法确定为CannabsinA（1）．β-谷甾醇（2）、胡萝卜苷（3）、正二十四烷酸（4）、甘露醇（5）、棕榈酸（6）。     

ERK1/2 mediates lung adenocarcinoma cell proliferation and autophagy induced by apelin-13

The aim of this study was to investigate the role of apelin in the cell proliferation and autophagy of lung adenocarcin- oma. The over-expression of APJ in lung adenocarcinoma was detected by immunohistochemistry, while plasma apelin level in lung cancer patients was measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Our findings revealed that apelin-13 significantly increased the phosphorylation of ERK1/2, the expression of cyclin D1, microtubule-associated protein 1 light chain 3A/B （LC3A/B）, and beclinl, and con- fwmed that apelin-13 promoted A549 cell proliferation and induced A549 cell autophagy via ERK1/2 signaling. More- over, there are pores on the surface of human lung adeno- carcinoma cell line A549 and apelin-13 causes cell surface smooth and glossy as observed under atomic force micros- copy. These results suggested that ERK1/2 signaling pathway mediates apelin-13-induced lung adenocarcinoma cell proliferation and autophagy. Under our experimental condition, autophagy associated with 3-methyladenine was not involved in cell proliferation.     

应用寡核苷酸芯片并行检测CYP1A和GSTM1基因多态性

利用寡核苷酸芯片检测方法分析CYP1A单核苷酸多态性(SNP)和GSTM1缺失与否,实验结果证明了寡核苷酸芯片技术可并行、准确、高效地检测基因的单核苷酸多态性和其他类型的基因多态型,可为疾病遗传易感性及单体型的研究提供强有力的研究工具。采用该寡核苷酸芯片,检测了84份正常人的血液DNA样本,其中GSTMl基因缺失率达到47．6％,接近报道数值。统计分析发现,CYP1A m1-m2的3种基因型组合TT-AG、TT-GG和TC-GG的发生频率都为0,而根据实验得到的m1和m2各自基因型数据计算,它们的发生频率应是11．4％、2．6％和3．1％,所以推测在所检测的样本中没有T(m1位点)和G(m2位点)的连锁组合,即m1和m2位点的组合只有3种单体型：T-A、C-A和C-G,其发生频率分别是69．6％、7．7％和22．6％。     

布雷菲德菌素A通过线粒体凋亡途径增强顺铂抗肺癌GLC-82细胞的作用

本研究证明了线粒体凋亡途径在布雷菲德菌素A（brefeldin A,BFA）联合顺铂（cis-dichlorodiamine platinum,CDDP）抗非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中的作用。MTT结果显示,BFA对肺癌GLC-82和NCI-H1299细胞的半数有效抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）分别是100 ng/mL和400 ng/mL,CDDP对GLC-82和NCI-H1299细胞的IC50分别是4 μg/mL和15 μg/mL;而分别采用半量的BFA和CDDP联合处理GLC-82或NCI-H1299细胞后,抑制作用均进一步加强。DAPI染色结果进一步证明了二者的协同作用——与单独用药组相比,细胞核染色质固缩加剧,核裂解碎片增多,乃至形成凋亡小体,表明细胞凋亡的发生。与单药组比较,联合用药导致肺癌GLC-82细胞线粒体膜电位显著下降;q-RT-PCR及Western印迹结果显示,在联合用药早期（24 h）,GLC-82细胞可能通过提高Bcl2表达以促进存活;而在联合用药晚期（48 h）,细胞已发生不可逆转的凋亡,Bcl2表达受抑制,同时二者通过促进Bax表达来诱导细胞色素C释放,使胱天蛋白酶 3发生剪切激活,最终诱导细胞凋亡发生。提示线粒体凋亡途径可能是BFA协同CDDP抗非小细胞肺癌的分子机制之一,为肺癌的临床治疗方案提供了更多的理论依据。     

人FAM92A1基因诱饵表达质粒的构建与鉴定

目的 构建人FAM92A1基因（hFAM92A1）的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1并检测其蛋白表达、毒性和自激活作用.方法 PCR扩增hFAM92A1的基因编码序列并克隆入诱饵表达载体pGBKT7中,酶切和测序鉴定后,转化到酵母AHl09细胞中,Western印迹检测诱饵蛋白表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用.结果 成功构建FAM92A1基因的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1,测序结果正确.Western印迹实验证实酵母细胞高表达诱饵蛋白hFAM92A1,诱饵蛋白没有自激活作用.结论 构建的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1可用于下一步酵母双杂交系统实验,为进一步研究hFAM92A1功能奠定了基础.