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61.
《微生物学免疫学进展》2019,(6)
乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitis B core antigen,HBcAg)是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV) C基因编码的病毒蛋白,是HBV的衣壳蛋白,主要存在于HBV核衣壳表面。乙肝病毒核心蛋白(hepatitis B virus core protein,HBc)来源于HBcAg,由183或185个氨基酸组成。由于HBc本身具有高度的免疫原性,并且可携带自身或外源病原体的抗原/表位在体外自组装成病毒样颗粒,20世纪80年代开始HBc就被用于疫苗载体的研究。现对HBc近年来作为载体在表位疫苗中的应用作一概述。 相似文献
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构建、表达并纯化了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白BTcs1,为开发新型HBV治疗和预防性疫苗提供实验依据。利用DNA重组技术,构建了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表达质粒pBTcs1,在大肠杆菌(HB101)中进行表达,用蔗糖密度梯度超速离心对表达产物BTcs1进行纯化,用SDS-PAGE、SEC、WESTERN-BLOT和电镜进行鉴定。结果表明成功构建了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表达质粒pBTcs1,BTcs1的表达量为20-25 mg/L,DOT-BLOT结果显示BTcs1主要分布在30%-50%蔗糖介质中,SDS-PAGE和SEC结果显示蛋白纯度>95%,WESTERN-BLOT结果显示BTcs1可以与抗HBcAg抗体和抗HBsAg前S1抗体特异杂交,显色条带在约28 kD处,电镜分析表明BTcs1可以自主组装成病毒样颗粒(VLP),直径约为30-34 nm。本研究为进一步探讨BTcs1的功能及应用奠定了基础。 相似文献
65.
家蚕BmN细胞的微载体培养及HBeAg的高效表达 总被引:1,自引:0,他引:1
选择微载体Cytodex3对家蚕BmN(从SilkwormBombyxmori获得的细胞系)细胞进行高密度培养,并获得成功。观察了家蚕BmN细胞在微载体Cytodex3上的贴壁分布,研究了不同接种浓度与微载体浓度时细胞的生长情况,并筛选出最佳的技术参数。在1000mL滚瓶中用微载体Gytodex3培养家蚕细胞,在合适的培养条件下(细胞接种浓度3.6×105细胞/mL、微载体浓度5g/L),5d后,细胞的终密度达到2.8×106细胞/mL,细胞增长指数为7.9。在细胞指数生长期(传代后48~60h)用载有HBeAg基因的重组病毒(rBmHBe)接种(感染量为0.4PFU/细胞),5d后,培养上清中HBeAg滴度为1∶9.6×104,是用方瓶静止培养的家蚕细胞表达量的3倍。 相似文献
66.
用杆状病毒载体在家蚕细胞中表达HBeAg基因 总被引:2,自引:0,他引:2
以PCR技术扩增含有PreC信号肽序列及完整的HBeAg基因的序列(即HBcAg基因5′端447bp),在5′端加上合适的酶切位点,克隆到家蚕核多角体病毒转移载体pBm030上,与野生型BmNPVDNA共转染家蚕BmN细胞,空斑纯化后得到多角体基因失活的重组病毒。ELISA法测定表明培养液上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(<1∶160)。研究结果表明,BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,所表达的HBeAg效价高,纯度好,明显优于大肠杆菌表达系统 相似文献
67.
柯为 《中国生物工程杂志》1986,6(3):69-69
一、为乙型肝炎病毒表面抗原疫苗在我国适用化开创了新路。“乙肝”是世界性的传染疾病,在我国流行面广,危害极大,上海生化所开展乙肝病毒表面抗原基因工程研究取得重要突破以后,他们在总结已有乙肝病毒表面抗原基因工程疫苗研究经验的基础上,再借鉴国外某些经验,结合本国国情和条件,建立以牛痘病毒为载体系统。 相似文献
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表达乙肝病毒融合表面抗原基因SA-28的二倍体酵母工程菌的选育 总被引:1,自引:0,他引:1
将乙肝病毒融合表达抗原基因SA-28的单倍体酵母工程菌Y19/YFD158和与其不同接合型的单倍体酵母菌Y95接合,筛以二倍体酵母工程菌Y95xY19/YFD158。对两种工程菌的研究表明:三倍体工程菌发酵密度为单倍休工程菌的3倍;表达质粒在二倍体酵母中的稳定性明显高于单倍体工程菌;二倍体工程菌对融合抗原的表达量为单倍体的3倍以上,表达质粒在二倍体细菌中的平均拷贝数略低于单倍体工程菌。 相似文献
69.
乙型肝炎病毒3′末端缺失的preS/S基因在转基因小鼠中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
从乙型肝炎病毒adr亚型的基因组DNA中分离3′末端缺失的preS/S基因的DNA片段,构建了由CMV启动子控制的真核表达载体。采用受精卵显微注射方法,获得了基因组整合有3′末端缺失的preS/S基因的2个转基因小鼠品系。在不同的时间点采取血清进行了ELISA分析,发现在这2个小鼠品系中3′末端缺失的preS/S基因可被表达,而且呈稳定状态。此小鼠品系的建立,对于探讨乙型肝炎病毒3′末端缺失的preS/S基因的表达产物在体内的生物学作用及其与肝细胞内细胞癌基因的转录激活之间的关系有重要意义。 相似文献
70.