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细菌酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本文应用纸片法筛选出5种动物病原菌的醋酶同工酶阳性株,并对3种强阳性株应用PAGE进行酶谱测定。同时对这些细菌酯酶同工酶样品的提取及测定条件进行了摸索。结果表明:不同细菌酯酶同工酶酶谱存在着显著差异。这为某些细菌种鉴定提供一种方法。 相似文献
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以聚丙烯酰胺凝胶电泳方法测定了331例辽宁满族新生儿脐带血血红蛋白F中Gγ/Aγ比值。结果显示:高Gγ(>80%)者4例,占1.21%,其基因频率(f)为0.00604,低Gγ(30-48%)者6例,占1.81%,其基因频率为0.00906,其余正常,Gγ平均值为65.23±6.38%。未发现AγT链。对其中八例异常者(4例高Gγ值,4例低Gγ值)的染色体DNA进行了基因图谱分析,确定4例高Gγ值者基因型有两种:Gγ-Gγ/Gγ-Aγ二例,Gγ-AGγ-Aγ/Gγ-Aγ二例;4例低Gγ值者基因型有二种,分别为:Aγ-Aγ/Gγ-Aγ二例和-GAγ/Gγ-Aγ二例。其中Aγ-Aγ基因型在中国人群中未见报道过。 相似文献
45.
46.
PCR-SSCP分析方法的优化 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:优化PCR-SSCP分析方法。方法:选择野生型Kir2.3质粒和突变型Kir2.3(2123L)质粒为样本,其PCR结果的鉴定采用2%的琼脂糖凝胶EB显色,SSCP分析采用12%的非变性聚丙烯酰胺凝胶DNA银染显色。PCR产物变性比较了三种方法:即碱变性、SDS变性、直接变性。聚丙烯酰胺凝胶根据丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺及甘油的比例设计了六个实验组,每组采用两种条件电泳,即:30mA恒流快速电泳和100V恒流过夜电泳。结果:选择直接变性的PCR产物作为变性上样液,并确定了三种凝胶配及该条件下适用的电泳条件。即:丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为49比1,凝胶中含1%甘油,4℃,500V高压电泳3min接着30mA恒流快速电泳3h;丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为49比1,凝胶中含5%甘油,4℃,500V高压电泳3min接着30mA恒流快速电泳3h;丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为29比1,凝胶中不合甘油,4℃,500V高压电泳3min接着100V恒流过夜电泳12h。结论:条件优化的PCR-SSCP是一种筛查基因突变简便、有效的实验方法。 相似文献
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鲫鱼血清凝集素的生物学性质研究 总被引:4,自引:0,他引:4
采用硫酸铵盐析和梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,从鲫鱼血清中分离出一种天然凝集素,对其生物学性质进行研究。结果表明,该凝集素能够识别和凝集多种细菌,红细胞和酵母,不被透析,耐热,耐碱,抗DNase,RNase,SDS,对胰蛋白酶,糖苷酶和β-巯基乙醇敏感等特性,是一种分子量为67kD,等电点为6.2的糖蛋白分子,其活性能被乳糖、半乳糖,甘露糖和重金属离子所抑制,能显著促进巨噬细胞的吞噬,杀菌能力,是一种重要的免疫调节分子。 相似文献
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琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测小麦基因组DNA RAPD扩增产物的方法学比较 总被引:4,自引:0,他引:4
通过20%(wv)的琼脂糖凝胶和5%(wv)的聚丙烯酰胺凝胶电泳对小麦白粉病抗、感特性品种基因组DNA的RAPD检测结果表明:5%聚丙烯酰胺凝胶对线性DNA分子(01~20kb)和长度相差100bp以下的DNA分子的分离较20%的琼脂糖凝胶电泳效果好。因此,我们研究出了一项利用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测小麦白粉病抗、感特性的新技术,在工作中建立了一种适合于检测小麦基因组DNA结构差异的电泳方法。该方法主要包括:(1)丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺的新配比;(2)分离DNA片段的最佳凝胶浓度;(3)电泳条件;(4)脱色、漂洗、银染、显色过程。实验发现,该技术对于小麦白粉病抗、感特性检测中的小片段和长度相差100bp以下的线性DNAPCR扩增结果的分辨效果较好。应用该技术在抗感品种间已经发现了DNA水平上的差异。 相似文献