S1P/S1PR1通路调节LAMB3的表达对食管鳞癌细胞迁移、黏附和转移的影响

该文主要探讨1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)/1型1-磷酸鞘氨醇受体(sphingosine 1-phosphate receptor 1,S1PR1)通路调节层黏连蛋白亚基β3(laminin subunit beta 3,LAMB3)的表达对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移、黏附及转移的影响。使用GEO数据库分析LAMB3在ESCC癌组织与癌旁正常组织中的表达差异情况;用Western blot检测人食管上皮细胞HEEC及人食管鳞癌Eca109、TE-1、KYSE-150细胞中LAMB3的表达量;用S1P处理TE-1细胞,或在Eca109细胞中敲低或过表达S1PR1,采用Western blot检测LAMB3的表达情况;S1PR1-EGFP过表达载体和LAMB3小干扰RNA(siRNA)共转染Eca109细胞,采用划痕实验检测迁移能力;采用LAMB3 siRNA或LAMB3短发夹RNA(shRNA)下调ESCC细胞LAMB3的表达,过表达LAMB3的慢病毒上调ESC...     

高糖诱导腹膜间皮细胞发生上皮间质转化中microRNA的异常变化

目的:定腹膜间皮细胞在高糖引起上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中microRNA的表达差异。方法:常规培养PMC细胞,利用高糖培养液刺激诱导腹膜间皮细胞发生EMT,倒置显微镜观察各组细胞形态学变化,实时定量PCR检测EMT标志基因变化,以此确定高糖诱导EMT的发生。利用特异茎环结构的引物合成microRNA的cDNA,实时定量PCR检测重要microRNA的表达变化。结果:高糖培养液培养腹膜间皮细胞48hr后,细胞形态呈梭形改变,同时EMT标记基因E-cadherin表达明显减低(P0.01),Vimentin表达显著升高(P0.01),说明高糖诱导腹膜间皮细胞发生了EMT。利用microRNA特异的茎环结构引物,实时定量PCR检测结果发现高糖刺激后miR-193a的表达明显上调(P0.01);miR-15a和let-7e的表达明显降低(P0.01);miR-16和miR-21的表达无明显变化(P0.05),同时检测发现高糖刺激后miR-193a的表达水平随刺激时间表达升高。结论:异常变化的microRNA可能对高糖诱导的腹膜间皮细胞EMT具有重要调控作用。     

基于TGF-β1/Smad信号通路初步探讨虎杖醇提物对腺嘌呤诱导小鼠肾间质纤维化的改善作用

目的 研究虎杖醇提物(ethanolic extract of Polygonum cuspidatum,PCE)对小鼠肾间质纤维化的保护作用及其潜在分子机制。方法 将50只雄性C57BL/6N小鼠随机分为5组(n=10):正常对照组、模型组、虎杖醇提物低、中、高(75、150、300 mg/kg)剂量组。除正常对照组外,其他各组灌胃腺嘌呤构建肾间质纤维化模型,虎杖醇提物低、中、高剂量组同时灌胃给予不同剂量的虎杖醇提物混悬液。各组经灌胃给药42 d后用生化试剂盒测定血清肌酐(serum creatinine, Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)水平,通过苏木精伊红染色和Masson三色染色分别观察小鼠肾组织病理学变化及胶原沉积情况,采用Western Blot法检测小鼠肾组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad6、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、I型胶原蛋白(Collagen I)的表达情况。结果 与正常对照组比较,模型组小鼠BUN、Sc...     

儿童胃肠间质瘤治疗进展

胃肠道间质瘤(Gastrointestinal stromal tumors, GIST)是最常见的间叶源性肿瘤。最新统计结果显示,其全球发病率约5~19/106。成人患者临床表现常无特异性,患者多有腹痛、血便、腹胀等症状。GIST主要发生在中老年群体,在儿科极为罕见,因此儿童患者经常被漏诊或误诊。随着近年来基因检测的广泛应用,以及有关儿童GIST研究的深入,发现它代表着一个不同于成人GIST的临床疾病。成人GIST当前主要治疗方式以手术为主,同时根据患者病情应用靶向药物辅助治疗。然而对于儿科患者,一些用于成人肿瘤的治疗方案难以达到理想的治疗效果,甚至会造成不良后果。儿童胃肠道间质瘤的独特生物学特性,决定了它需要独特的治疗方案,以达到最佳的临床疗效。本综述旨在研讨最新文献,提供不同的儿童胃肠道间质瘤的治疗方式。     

一种在荧光显微镜不同时观察贝螅间质细胞及神经细胞发育的方法

用Ｂｒｄｕ及ＦＩＴＣ同时标记贝螅Ｓ期的间质细胞及神经细胞的免疫细胞化学法,不但操作简单,大大缩短实验时间,而且还可避免用同位素Ｈ＾３－Ｔｈｙｍｉｎｄｉｎ标记放射自显影所带来的射线危害。在做成的同一张片子上可通过调节改变荧光显微镜光源的色彩来观察分化前的间质细胞与分化后的神经细胞。在观察两者相互关系上有独特的效果。     

宫颈电环切除术治疗76例子宫颈上皮内瘤样病变的分析

目的:探讨子宫颈电环切除术(LEEP)治疗子宫颈上皮内瘤样病变(CIN)的价值。方法:回顾性分析2004年10月至2006年9月收治的76例CIN患者行LEEP术治疗情况。结果:本研究的CIN 76例中CIN-Ⅰ37例,CIN-Ⅱ7例、CIN-Ⅲ2例,cIN-Ⅰ-Ⅱ21例,CIN-Ⅱ-Ⅲ9例。76例CIN患者行LEEP术治疗后最长的随访2年,最短的三个月。术后三个月新柏氏膜式液基层细胞学检测(Thin-prep Cytolosy Test,TCT)正常者76例(100%),人乳头瘤状病毒(HPV)转阴者75例(98.68%),阴道镜检查正常者74例(97.37%)。本组治愈率为98.68%,复发率为0例。结论:LEEP术治疗CIN具有以下优点:①安全、快捷又出血量少;②手术时间短,可在门诊进行手术;③可达到传统电刀达不到的非常精细的手术效果;④不易产生传统电刀切割时组织被拉长、碳化现象,可以得到不影响病理检查的完好的组织标本,对临近组织损伤小,治疗的同时能进行诊断;⑤疼痛少,不易留下瘢痕,感染少;⑥对宫颈损伤小,可以保留生育功能,更适合年轻患者。⑦避免了二次手术和过度治疗。但术后长期的规范随访,早期发现CIN复发及宫颈癌至关重要。     

脐带间充质干细胞外泌体的分离和鉴定

目的探讨脐带间充质干细胞的外泌体的获取与鉴定方法。方法通过组织块贴壁法从胎儿脐带分离和培养脐带间充质干细胞并通过RiboTMExosome Isolation Kit收集外泌体,采用电镜和流式细胞仪鉴定外泌体。结果第二代脐带间充质干细胞表面CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达,CD29、CD44和CD105呈阳性表达;在透射电镜下观察到脐带间充质干细胞外泌体呈圆形或椭圆形,大小不均匀,直径30~100 nm,有完整的膜结构,内含低密度物质;流式细胞检测外泌体CD9、CD63、CD81和CD83呈阳性表达。结论在培养脐带间充质干细胞的培养基中可以收集到外泌体,可以通过电镜和流式细胞仪对脐带间充质干细胞的外泌体进行鉴定。     

靶向c-Met的Ⅰ型小分子抑制剂的研究进展

间质-表皮转化因子(cellular-mesenchymal epithelial transition factor,c-Met)为受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)亚家族的一个原型成员,也是目前已知的唯一肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,H...     

EpCAM分子特异结合多肽的筛选和鉴定

上皮/内皮细胞分子(EpCAM)是癌干细胞(CSC)重要的表面标记物分子.利用噬菌体展示肽库进行亲和消减富集生物淘筛(Biopanning),经过5轮淘筛,从最后一轮的噬菌体洗脱库中随机挑选47个克隆扩增,通过ELISA方法初步确定30个阳性噬菌体克隆并进行测序,序列分析后获得5个共有序列克隆群,随后通过细胞免疫荧光实...