利用激光微束穿刺法将外源基因导入小麦的研究

用激光微束穿刺法将携带有新霉素磷酸转移酶（ＮＰＴ－Ⅱ）基因的质粒ｐＪＩＴ１０１导入京花１号小麦幼胚细胞。方法是将小麦幼胚细胞进行高渗缓冲液预处理,用微米级的激光微束处理,然后在卡那霉素培养基上筛选出具抗性的愈伤组织及绿色小植株。第一年,从１５０个小麦幼胚中,在卡那霉素培养基上筛选出４株绿苗,取两株进行ＮＰＴ－Ⅱ酶活性分析,测到了ＮＰＴ－Ⅱ酶的活性。第二年重复实验,从２４５个小麦幼胚中,经筛选获得１株绿苗,进行了叶片ＤＮＡＰＣＲ扩增检测,转化的绿色小苗扩增出所导入的ＮＰＴ－Ⅱ基因编码的片段。结果表明,外源ＮＰＴ－Ⅱ基因已导入了小麦,并实现了整合表达。     

普通小麦×东方旱麦草属间杂种的产生及无性系的建立

本研究以普通小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．;２ｎ＝６ｘ＝４２,ＡＡＢＢＤＤ）为母本,以东方旱麦草（Ｅｒｅｍｏｐｙｒｕｍｏｒｉｅｎｔａｌｅ（Ｌ．）Ｊａｕｂ．ｅｔＳｐａｃｈ;２ｎ＝４ｘ＝２８）为父本,首次成功地获得了属间远缘杂种Ｆ１,其平均结实率为０．０８％。利用植物细胞工程技术,对杂种幼胚愈伤组织的诱导、胚性无性系的建立、植株再生、壮苗培养等,最终获得了生长正常的杂种Ｆ１植株。同时,通过对杂种幼胚愈伤组织、根尖细胞的细胞学观察,结果表明该杂种为真杂种,即２ｎ＝５ｘ＝３５（预期染色体数）的杂种细胞占主体;另外,因组培过程中发生了染色体数目的变异,故也有少量２ｎ＝２８－３４染色体数的细胞。以上杂种的获得为将旱麦草优异基因向小麦的转移奠定了基础。     

Plant regeneration from protoplasts of hydroxyproline resistant cell line in Onobrychis viciaefolia

An efficient protocol for plant regeneration from protoplasts of hydroxyproline(HYP)resistant cell line of Onobrychis viciaefolia was established.In SH medium supplemented with 1mg/L2,4-dichlorophenoxy-acetic acid(2,4-D),0.5mg/L kinetin(KT)and 0.2mg/L naphthalene acetic acid(NAA),the division frequency of protoplastderived cells reached up to over 60%,and microcalli were obtained in 5-6wk.Upon transferring them on agar solidified MS medium plus 2mg/L indole-3-acetic acid (IAA),shoots were induced.After cultivating them on MS medium with or without IAA,roots were regenerated.Chromosome number of all protoplast-regenerated plants examined were normal(2n=28).The protoplast-derived calli and plants grew vigorously on the medium containing 10 mmol/L HYP.     

可乐茄叶肉原生质体培养再生植株

本文报道茄属果树可乐茄（ＳｏｌａｎｕｍｑｕｉｔｏｅｎｓｅＬａｍ．）叶肉原生质体的分离、培养及植株再生。幼嫩叶片原生质体经酶游离、纯化后,以１×１０４个／ｍｌ密度培养于稍加改良Ｋ８ｐ（附加２,４－Ｄ０．５ｍｇＬ（－１）、ＮＡＡ１．０ｍｇＬ（－１）和ＢＡ０．５ｍｇＬ（－１））的培养基中,三天后开始分裂,一周分裂３—４次。一个月形成小细胞团,植板率为０．１—０．２％,小细胞团转培养于ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇＬ（－１）上增殖后进行分化。原生质体来源愈伤组织在ＩＡＡ（０．１—１．０ｍｇＬ（－１））与ＢＡ或ＺＴ组合的培养基中能诱导器官发生,芽分化率最高可达４２．９％;但ＩＡＡ、ＢＡ、ＺＴ三者一起使用未见任何器官分化。小芽在ＭＳ＋ＩＡＡ０．２ｍｇＬ（－１）中生根成植株。可乐茄叶肉原生质体的植株再生,可应用于育种和茄属植物遗传工程研究。     

从水稻根部悬浮培养细胞分离原生质体及植株再生

以长香稻(Oryza sativa L．)(糯稻)的幼嫩种子根为材料,在Ms和N6培养基上诱导产生结构松软而分散的愈伤组织,经过AA液体培养基振荡悬浮培养,悬浮培养细胞经酶解后得到了活性较高的原生质体,试验结果表明这是分离原生质体较理想的材料。在附加2,4-D lmg／L(以下单位同)、KT(激动素)0．2、各氨酰胺876、天门冬酰胺266的Ms琼脂糖培养基中,诱导出了大量愈伤组织,在含KT2、NAA(α-萘乙酸)0．2、zT(玉米素)0．2、cH(水解酪蛋白)1000和4％椰子汁的N6培养基中成功地诱导出了由原生质体再生的植株。当代原生质体再生植株能正常开花、结实、产生种子;染色体数均为二倍性(2n＝24),最显著的特点是结实率低,穗粒数减步、生育期延迟。     

微波处理对水稻种子萌发的影响（简报）

水稻种子经微波加热激或单以热激处理后,在相同处理温度（45℃）下,微波加热激处理显著促进芽活力和根活力,而单以45℃热激仅极显著促进根活力。表明在相同升温幅度下,微波处理和常规水浴热激处理的影响有明显区别。     

将处理物质从叶柄引入叶片的方法探讨

在现代植物生理学的研究中,常常希望将离体生化研究中所常用的一些反应的底物、抑制剂、促进剂、解联剂或其它了些处理物质引入叶片内,以便探讨在复杂的生命活动中这些反应在发生变化时,对其它反应有何影响。这是把生理研究和机理探讨结合起来的重要途径。因此,如何将这些物质引入叶片是一个值得研讨的问题。通过叶柄的输导组织将这些物质引入叶片是一个常用的方法,也已有不少成功的实例［’,’,‘j。这种叶柄引入法的成功使用,首先需要考虑到它们进入叶片的速度和数量及其影响因素,它们能否到达预期部位及如何检测等问题。现在,…     

离体条件下诱导番茄果实状结构的再生

以番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｉｌｌ．）雌蕊和幼果的组织作外植体可以诱导果实状结构的再生。这种果实状结构在离体条件下能培养成熟,成熟时具红色。解剖观察表明：果实状结构由果肉和包围在外面的果皮组成,无种子和胎座。外源激素和外植体年龄的试验揭示：１．以雌蕊组织作外植体时,仅附加外源细胞分裂素就可以诱导果实状结构的再生,外源生长素似乎不是必需的,最高的诱导频率（５０．０％ ）出现在仅附加玉米素０．５ ｍ ｇ／Ｌ的组合。２．从直径４—１２ ｍ ｍ 的幼果上分离的外植体在附加外源激素的培养基上均可诱导果实状结构的再生,但只有从直径８ ｍ ｍ 的果实分离的组织块作外植体并将它们培养在６－ＢＡＰ ２ ｍ ｇ／Ｌ,ＮＡＡ０．１ ｍ ｇ／Ｌ的培养基上时,果实状结构的诱导频率最高（６２．５％ ）。为了探讨在果实状结构再生中表现出来的细胞全能性的表达,提出了植物细胞全能性的部分表达（Ｐａｒｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆｐｌａｎｔ ｃｅｌｌｔｏｔｉｐｏｔｅｎｃｙ）的概念并进行了讨论。