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高产稳产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌的构建 总被引:7,自引:0,他引:7
重组大肠杆菌Escherichia coliHMS174(pTZ18UPHB) 含有携带聚羟基烷酸(PHA) 合成基因( phaCAB)** 的质粒pTZ18UPHB,是很有潜力的PHA 生产菌,但存在着质粒不稳定和不能合成3羟基丁酸(3HB) 与3羟基戊酸(3HV) 共聚物[P(3HBco3HV)] 的缺陷。将RK2 质粒上的par DE 基因引入pTZ18UPHB 构成质粒pJMC2 ,该质粒可以在宿主E.ColiHMS174 中稳定遗传。将培养基中的磷酸盐浓度降至18 m mol/L,发现E.Coli HMS174(pJMC2) 能够以丙酸为前体合成P(3HBco3HV) ,其中3HV 在共聚物中的含量为5 % ~8 % 。在5L自动发酵罐中分批补料培养E.Coli HMS174(pJMC2) ,培养基初始磷酸盐浓度为15 m mol/L,30 h 后每升培养液中干菌体可达42-5 g,P(3HBco3HV) 占干重的70 % ,其中3HV 在共聚物中的含量为4-9 % 。 相似文献
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王科杨帆罗平漆建鑫陈学明 《现代生物医学进展》2014,14(17):3322-3324
目的:观察重组人γ-干扰素辅助治疗脊柱结核手术的临床疗效。方法:选择2009年6月至2012年6月在我院治疗脊柱结核患者110例,随机分成实验组和对照组,每组55例。对照组患者行手术治疗,手术前后予抗结核治疗,观察组在对照组治疗的基础上加用γ-干扰素治疗。观察和比较两者患者症状改善情况、Frankel分级、并发症及复发率。结果:治疗组优良率为(96.4%)高于对照组(83.6%),两组患者功能评价比较差异均有统计学意义(X2=8.0,p=0.005);治疗组并发症发生率为5.5%,对照组为18.2%,治疗组并发症发生率比对照组低(X2=8.3,p=0.004),两组相互比较差异均有统计学意义;治疗组患者神经功能Frankel分级E级比例(98.2%)较对照组为(81.8%)高,差异有统计学意义(X2=5.1,p=0.02)。结论:人重组r-干扰素有改善脊柱结核患者的临床症状,促进伤口愈合,减少并发症及复发率等特点,值得在临床推广。 相似文献
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2000年以来,多数H5N1亚型禽流感病毒在NS基因的263~277位发牛15个碱基的缺失。为了研究此缺失在流感病毒进化中的生物学意义,构建H5N1亚型流感病毒A/SD/04株的HA、NA、NS的全基因表达载体,以及NS基因263~277位删除的突变载体。通过反向遗传学技术,与编码WSN的其他内部基因(PB2,PB1,PA,NP和M)的表达载体进行组合转染,获得在NS基因的263~277位缺失和不缺失的2个重组H5N1亚型流感病毒(RWSN—m248和RWSN-248)。此两个重组病毒在无干扰素产生的Vero细胞上的繁殖滴度相似,在能产生干扰素的细胞MDCK和COS-1细胞上的繁殖滴度有明显差异。两个重组病毒在鸡胚中的繁殖滴,IVPI,MDT和EID50均无显著差异。说明NS基因的263~277位核苷酸的缺失不影响病毒的整体毒力,但降低了H5N1的抗干扰素能力。 相似文献
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大肠杆菌中重组GNA蛋白的分离纯化 总被引:4,自引:1,他引:4
具有特异结合甘露糖基的雪花莲外源凝集素(Galanthus nivalis agglutnin,GNA)具有多种生物活性,在糖蛋白分离、逆转录病毒病和害虫防治等方面有广泛的应用价值。该试验分别采用超声破碎法、冻融裂解法和溶菌酶法破碎重组大肠杆菌细胞后,经尿素或SKL(十二烷基肌氨酸钠水溶液)溶解后,再透析复性获得了在大肠杆菌(E.coli)中高效表达的重组GNA蛋白,并经SDS—PAGE电泳检测GNA的大小、浓度及表达量.通过对诱导表达时间、超声处理的功率、时间、模式、尿素和SKL洗涤浓度,透析条件的优化组合,建立了一套从大肠杆菌细胞中分离重组GNA蛋白的有效方法,为进一步的重组CNA生物活性试验提供了物质基础, 相似文献
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针对重组人甲状旁腺素相关肽在反相柱的高效液相色谱中出现的两个峰,研究两个峰性质并对两个峰是由于一种物质形成了两种构象造成的加以讨论。采用了离子交换柱的高效液相色谱分析、电泳、高效液相色谱和质谱联用分析、SDS破坏小肽高级结构再进行反相柱的高效液相色谱分析、更换反相柱高效液相色谱分析中的流动相等方法,结果表明,从高效液相色谱分析和电泳分析来看,样品为纯品。同时推测两个峰是由于一种物质形成了两种不同的构象造成的,且两种构象可以在有酸性离子对试剂的情况下快速达到动态平衡。 相似文献
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