甘蔗杆状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种能够快速、灵敏、特异的检测甘蔗杆状病毒(sugarcane bacilliform virus, SCBV)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,针对SCBV的基因序列,设计了特异性扩增引物,利用构建的标准品建立和优化针对SCBV的荧光定量PCR检测方法,并对该方法进行了特异性、稳定性、灵敏性等的测试,随后用于田间样品的检测。结果表明:将含有SCBV基因组序列的重组质粒进行梯度稀释制成标准品,利用标准品进行荧光定量PCR,获得标准曲线y=-3.482 1x+37.264,相关系数r~2=0.999 9,说明CT值与反应起始模板数量呈线性关系,可进行准确定量;组内和组间变异系数在0.19%～1.68%之间,表明检测方法重复性良好;建立的荧光定量PCR方法最低可检测到10个拷贝重组质粒/μL,是常规PCR检测灵敏度的100倍。使用建立的荧光定量PCR方法和常规PCR方法对采集的90份甘蔗叶片样品进行检测,常规PCR检出53份阳性样品,荧光定量PCR检出56份阳性样品,表明所建立的荧光定量PCR方法较常规PCR敏感性高,且准确性高。本研究建立的SCBV荧光定量PCR检测方法重复性好,灵敏度高,为构建甘蔗健康种苗体系提供了一种高效检测方法。     

激光照射胚泡对家兔和小鼠的抗早孕研究

本文在家兔、小鼠上探索了激光的抗旱孕效应,观察到血卟啉衍生物(HPD)和激光的光化效应能使早期胚泡完全坏死和吸收,无流血和晚期流产现象,通过PNQ_3荧光分光光度计测定HPD在胚胎组织中的荧光谱,证实HPD对胚胎组织有亲和力,其对滋养叶细胞比对宫壁组织的亲和力大4倍,借以解释激光光化效应抗早孕的可能机理。     

荧光显微术在当代植物细胞生物学研究中的应用

自从八十年前第一次在显微镜下观察到生物组织经紫外线照射后发射荧光的现象以来,荧光显微术不断获得进步,现已发展成细胞生物学中一个重要的研究手段。高度的灵敏性和专一性、制样与观察程序的简便、尤其是适宜于活细胞研究等特点,是它所具有的独特长处。荧光显微术特别是免疫荧光技术在现代医学生物学研究中的应用是一个     

白暨豚某些血液生化指标的测定

关于海豚和几种淡水豚类的血液学和血液生化指标国外有过研究。白暨豚(Lipotes vexillifer)血液有形成份已有过报道。本实验对白暨豚血液生化指标进行了研究,以期建立白暨豚血液正常生理生化指标,为白暨豚的临床诊断,健康监测和保健措施提供血液学参数,并且为完善淡水豚类血液学比较研究提供基础资料。     

混合家系遗传参数估计方法研究

针对混合家系遗传参数估计,本文在假定公畜方差组分和母畜方差组分相等这一理论基础上,通过对方差分析的期望均方组成分析,提出了新的遗传力估计方法,以及某些特殊情况下的近似估计方法。通过一个估测实例比较了几种遗传力估计方法,结果表明,本文方法与全同胞组分估计最为接近,而且遗传力标准误最小,本文近似估计方法的效果也较好。对各种方法而言,资料越不平衡其差异越大。本文方法可以在一定程度上弥补全同胞分析时,因实际资料的公母畜方差组分差异过大的缺陷,具有实际可行性。此外,由于本文方法是用单因方差分析解决二因方差分析问题,计算更为简便,并可免于计算混合家系平均亲缘相关系数。     

青霉素半连续发酵过程状态与参数在线辨识

本文建立了带有噪声的适合于工业规模青霉素(丝状菌)半连续发酵数学模型,以排气CO₂释放速率(GER)作为在线观测量,应用推广Kalman滤波器(EKF)进行状态与参数在线辨识,为过程的自适应优化控制奠定了基础。试验表明：滤波得到的状态值与实测值相当吻合,证明滤波器是一种较好的发酵状态及动力学参数变化的在线观察器。     

固定化尖镰孢菌细胞的某些酶学特性

尖镰孢菌(Fusariun oxysporum)33—11是一株青霉素V酰化酶的高产菌株。用二醋酸纤维素固定的该菌细胞裂解青霉素V最适的Ph范围为7．4至7.6;最适的反应温度为45℃至48℃;其酶活性受8-羟基喹啉和EDTA的可逆抑制,Mg²⁺、Zn^2-和Mn^2-离子则有激活作用。采用问歇式搅拌裂解青霉素V,测得0．6rnm颗粒度固定化细胞的表观km值为11．7mmol／L。裂解青霉素V的反应活化能为33kJ／mol;底物抑制常数Ks为1950mmol/L;苯氧乙酸和6-APA的抑制常数分别为220mmol／L和270mm0I／L,在裂解反应中．前者是竞争性抑制剂,后者是非竞争性抑制剂。     

稀土荧光探针在生物大分子研究中的应用

钙(Ⅱ)、镁(Ⅱ)离子是生物体内最重要的闭壳层无机阳离子。引入具有适当光性质的、与钙(Ⅱ)等离子成键性质相近的铽(Ⅲ)或铕(Ⅲ),利用荧光光谱技术,是研究一些与钙(Ⅱ)有关的生物大分子在水溶液中构象的一条有效途径。本文综述了稀土荧光探针技术的研究进展。     

Eu3+标记技术的实验研究

本文探讨了当今较有发展前途的时间分辨荧光免疫分析技术中的关键环节——Eu³⁺标记技术中的pH值、螯合剂用量及反应时间等诸因素的影响,选出了最佳反应条件。