彻底清除转化体中野生型DNA的专一位点诱变方法

我们设计了一种高效的专一位点诱变方法,可从混合体中清除野生型ＤＮＡ。并将所需突变ＤＮＡ转入被转化细胞中,如此合成了与一种ＤＮＡ分子目标序列一致的并带有能产生限制性内切酶位点的插入突变的两条互补的寡核苷酸链。利用野生型ＤＮＡ分子中的两端各有两个限制性位点的一段目标ＤＮＡ片段作为模板,上述合成的两种寡核苷酸引物被延伸、富集并分离。被延伸的产物在聚合酶链式反应中又反过来被用作模板,以获得突变的双链ＤＮＡ片段,此片段通过其两端的限制性位点能很方便地用侧面限制性内切位点克隆到质粒中去。用这些质粒转化的大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）细胞可进行大量的分析。通过集落杂交试验、限制性内切酶分析和ＤＮＡ序列分析,得知这些转化体百分之百含有突变型的ＤＮＡ序列。     

植物抗真菌病害基因工程研究概述

真菌病害是作物损失的主要原因之一。作物病害的80％由病原真菌所引起。真菌病的危害性极大,如19世纪中期,爱尔兰曾因晚疫病严重爆发而导致马铃薯绝产,致使100万人挨饿、200万人被迫背井离乡远迁北美。过去,人们对作物真菌病害的控制有三条途径:(1)选育并采用抗病品种,育种方法为通过有性杂交利用作物本身或近缘种中的抗性基因;(2)施用化学杀菌剂;(3)采取预防措施,如轮作、     

孤孢属两新种

在对新疆及海南岛的捕食线虫真菌的调查中发现2个真菌与已报道的孤孢属的真菌不同,确定为新种——长梗孤孢菌(Monacrosporium longiphorum Liu et Lu sp. nov.)和小舟形孤孢菌(Monacrosporium microscaphoides Liu et Lu sp. nov.)。长梗孤孢菌主要特征为分生孢子梗较长,448-660 μm,分生孢子3-4个分隔,39-65(54) × 13-22(18) μm。小舟形孤孢菌主要特征为孢子较小,0-3个分隔,以2个分隔为主,23-39(29) × 8-15.5(12)μm。在老的培养物中可见球形串生的厚垣孢子。     

淀粉分支酶sbeIIb基因RNA干涉片段转化玉米自交系的研究

玉米高直链淀粉育种是玉米分子育种的一个重要研究方向.本实验中,首先研究了不同诱导愈伤培养基对再生体系的影响,确定了LS+2,4-D 2.0 mg/L+L-pro 700 mg/L+CH 500 mg/L+3 %蔗糖为诱导培养基.同时,构建并验证了含有淀粉分支酶sbeIIb基因双干涉片段载体和胚乳特异性启动子的表达载体pCAMBIA 1301+Glu+1620,并转入根癌农杆菌EHA105,以农杆菌转化法转化玉米自交系178.通过PCR检测,5株转化株表现阳性,初步证明了干涉片段已整合入玉米基因组中.     

医学病原真菌的研究现状和发展方向—— 美国微生物学院2008 年真菌学术研讨会报告

真菌可作为植物、动物、昆虫甚至其他真菌的病原.在丰富多样的真菌世界中,仅有少数真菌具致病性,对人类和动物致病的真菌因在宿主体温条件下生长的要求,其种类和数量有限.随着时间的推移,侵袭性、现代医疗护理--医院内治疗的方式,导致对人类致病的真菌增加.感染人类的真菌已经发生了几次独立的进化,以后还将继续发生.本文报告美国微生物学院2008年真菌学术研讨会,简述医学病原真菌的研究现状和发展方向.     

真菌次生代谢产物多样性及其潜在应用价值

从生物间的协同进化和微生物次生代谢产物的功能意义原理出发,本文侧重介绍了与植物和昆虫密切相关的一些真菌及其次生代谢产物在医药和农用新药物开发应用中的潜在价值。     

利用光合细菌发酵转化麸皮

研究了光合细菌不同处理下对麸皮分解转化的效果。设计8种处理方法：经氨化,未经氨化,分别进行好氧培养,厌氧培养,对照培养,未加光合菌室温下放置的4种不同操作。在处理的1d,2d,3d,5d时分别测定每个培养瓶中葡萄糖和蛋白质含量,并且调节其pH值在6．6－7．5之间,结果表明,光合细菌在经氨化的厌氧培养时对麸皮的转化效果最好。     

基于医院管理者视角的医学新技术转化应用模式分析

目的 对医院管理者视角下,新技术的引进,引进后的使用与管理及使用后的综合评估与反馈进行综合分析。方法 通过对53名医院管理人员1~1.5小时的半结构式访谈收取定性资料,并进行属性归类分析。结果 研究发现新技术在引入过程中主要考虑的因素涉及新技术的特性及循证依据的情况、新技术引入可能对医生的影响、新技术引入可能为医院带来的影响、新技术引入过程中涉及的相关政策、新技术引入可能对医患关系的影响;明晰了新技术引入的程序、新技术的使用管理及使用后的评估。结论 二三级医院基本已经形成一整套新技术的引进及管理反馈机制,在医院层面新技术的引进及使用过程中,政策因素起到非常重要的作用。     

转化生长因子-β对基质金属蛋白酶及其组织抑制因子调控的研究进展

基质金属蛋白酶 (MMPs) 及其组织抑制因子 (TIMPs) 参与调控胞外基质 (ECM) 的降解与重建,二者的协同作用以及表达的动态平衡保证组织的生理/病理形态结构建成,并完成生长、分化、维持、降解的往复周期. 转化生长因子-β(TGF-β)通过对MMPs和TIMPs家族成员因细胞类型而异的基因表达调控作用,表现出调节ECM重建的生物学效应. TGF-β可通过激活Smad通路、促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 通路,以及刺激激活蛋白-1(AP-1)复合体的形成,完成对MMPs和TIMPs基因表达的调控功能.