特异性PCR反应鉴别携带W染色体的嵌合体公鸡子代性别的研究

利用聚合酶链式反应(PCR)特异扩增家鸡W染色体高度重复序列EcoRI家族的447bp片段,作为鉴定家鸡W染色体存在的依据.4个表现型为雄性的嵌合体公鸡的精液中检测到了W染色体,通过人工授精获得嵌合体子一代.检测了其中188个雏鸡的血液,51.6%(97/188)含有W染色体,x2检验结果显示,雌雄后代符合1:1的比例,这表明在这188个成活的嵌合体子代中,基本上没有W染色体精子所产生的雏鸡,携带W染色体的精子没有将其W染色体传递到其子代雏鸡中.本研究利用PGR性别鉴定技术,从分子水平上对精液中携带W染色体的嵌合体公鸡(ZW→ZZ型)子代的性别分化作了初步的探讨。 Abstract:The W chromosome was detected in four cocks' sperms by a method based on the polymerase chain reaction which amplifies the EcoRI repeat unit of the chicken W chromosome.188 offsprings of these chimeric cocks were obtained by artificial insemination and 51.6% (97/188) was detected W chromosome in blood.The result of χ2 test suggests that the sex ratio is 1:1.It seems as if no evidence was found for skewed sex ratios of these offsprings.Therefore it seems as if the sperms with W chromosome could not contribute to these 188 offspring chicks.     

高等植物成花基因的研究

高等植物的成花可分为两个阶段：由茎顶端分生组织转变成花分生组织和花器官的形成。前者主要受成花计时基因的控制,而后一阶段主要由植物的同源（异型）框基因调控。本文综述了近年来对植物成花调控基因的研究,并着重对第一阶段成花基因的功能、它们间的相互作用和特点进行了总结。 Abstract:Plant flower can be divided into two phases——from stem apex meristem tissue into flower meristem tissue and floral apparatus.The flower time genes control the flower development and the homologous genes control flower apparatus identify.This paper summarizes recent studies on plant flower and emphasizes on the first phase flower control genes,theirs interaction and function,characteristic of the homologous genes.     

人细胞周期蛋白D1/CDK4基因的真核表达及生物活性鉴定

通过生物工程获得人重组细胞周期蛋白 (cyclinD1 )及细胞周期蛋白激酶CDK4蛋白 ,作为抗癌药物筛选的分子靶点 .从人HL 6 0细胞中获得细胞周期蛋白D1 CDK4基因的cDNA ,先克隆至pGEMT Easy载体上 ,再经重组构建供体质粒pFastBac D1和pFastBac CDK4 .重组供体质粒转化感受态DH1 0Bac细胞 ,挑取确证为白色克隆的菌落振荡培养 ,分离制备高纯度杆粒DNA .以重组病毒适量感染昆虫细胞Tn 5B1 4 ,利用Bac to Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞Tn 5B1 4 (Hi5 )中表达相应的重组蛋白 .应用昆虫杆状病毒表达系统 (Bac to Bac)在昆虫细胞Tn 5B1 4中分别高效表达了人细胞周期蛋白D1和CDK4蛋白 .SDS PAGE分析表明 ,表达量占细胞可溶性蛋白质的 2 0 %左右 ,表达产物经Ni2 + NTA亲和层析纯化后纯度达 85 %以上 .研究表明 ,昆虫细胞表达的细胞周期蛋白D1和CDK4蛋白能促进Rb蛋白的磷酸化 ,具有生物活性 .成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4真核杆状病毒表达载体 ,并且在昆虫细胞中正确表达了具有生物活性的细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白 .     

猴免疫缺陷病毒引起多形核嗜中性白细胞凋亡的可能机理

本实验目的是研究猴免疫缺陷病毒（SIV）引起多形核嗜中性白细胞（PMNs）凋亡的机理。实验用PCR技术扩增gag基因,用Western blot法测定p53和bcl-2基因的表达。结果显示PMNs在被SIV感染后随着保温时间的延长存活率下降,在感染后24h可以从PMNs中扩增出gag基因。PMNs中p53基因的表达在感染后24h增加。同时bcl-2基因的表达在对照组和SIV感染组都增加,但在SIV感染组bcl-2蛋白的表达明显低于对照组。结果揭示SIV能够感染PMNs,p53和bcl-2基因表达的改变可能是SIV感染PMNs引起细胞凋亡的机理。     

风毛菊属(Saussurea DC.)植物果皮微形态特征及其分类意义的初步研究

本文报道了风毛菊属28种植物瘦果表皮纹饰的扫描电镜观察。结果表明风毛菊属果皮纹饰有四种类型:即条纹型(有隔条纹亚型和无隔条纹亚型)、孔纹型、网纹型、复合型。果皮纹饰显示出明显的差异性,可作为划分组成或亚属的标准,与传统分类结果基本一致。也可为某些种间界限不清的种类提供有用的证据,但对于大多数种类来说,果皮纹饰在种的划分上还有待进一步研究。     

Distinct role and functional mode of TR3 and RARalpha in mediating ATRA-induced signalling pathway in breast and gastric cancer cells

All-trans retinoic acid (ATRA) affects cell proliferation, differentiation and apoptosis through its receptors, RARs and RXRs. Besides these, other receptors such as orphan receptor TR3, are also involved in the regulatory process of ATRA. However, how different receptors function in response to ATRA is still largely unknown. In the present study, we found that formation of TR3/RXRalpha heterodimers in the nucleus and their subsequent translocation into the cytoplasm, in association with regulation of apoptosis-related proteins Bcl-2, Bcl-xl and Bax, was critical for apoptosis induction by ATRA in breast cancer cells MCF-7. When such translocation was blocked by Leptomycin B (LMB), ATRA-induced apoptosis was consequently abolished. However, in ATRA-induced gastric cancer cells MGC80-3, RXRalpha heterodimerised with RARalpha but not with TR3, and remained in the nucleus exerting its effect on cell cycle regulation. When transfected with antisense-RARalpha, MGC80-3 cells changed from ATRA-sensitive to ATRA-resistant and most cells were arrested in the S phase, implying the importance of RARalpha in cell cycle regulation. Furthermore, we demonstrated that the effects of ATRA depend on the relative levels of TR3, RARalpha and RXRalpha expression in cancer cells. In ATRA-induced MCF-7 cells, highly expressed TR3 favours the formation of TR3/RXRalpha and promotes the TR3/RXRalpha signalling pathway causing apoptosis; while in ATRA-induced MGC80-3 cells, high expression of RARalpha favours the formation of RARalpha/RXRalpha and promotes the RXRalpha/RARalpha signalling pathway in mediating cell cycle regulation. In conclusion, these results reveal the novel mechanism that cellular expression and location of protein is associated with diverse signalling transduction pathways and the resultant physiological process.     

重组人组织型纤溶酶原激活剂(rht-PA)及其突变体的纯化

稳定高效表达重组人组织型纤溶酶原激活剂 (rht PA)的CHO细胞株和表达组合突变体的细胞株进行了 3L转瓶培养 .将培养上清分别进行了Lys Sepharose 4B亲和层析和Zn2 + Sepharose 4B层析两步纯化 ,rht PA纯度提高了 5 34倍 ,比活达 2 5× 10 5IU mg ,产率为 73% ;突变体纯度提高了1119倍 ,比活达 5 9× 10 5IU mg ,产率为 6 9% .纯化产物SDS PAGE分析显示 ,rht PA和突变体基本都呈单一条带 ,扫描分析均达到 98%以上纯度 .rht PA和突变体在纯化系统中的行为作对照分析发现 ,突变体的构建思想在Lys Sepharose 4B亲和层析过程中有充分体现 .这两步层析组合是很好的纯化t PA及其突变体的方法 ,尤其是Lys Sepharose 4B纯化突变体效果更好     

青海海北高寒草甸黄嘴朱顶雀亲鸟递食率

中国科学院海北高寒草甸生态系统定位站的黄嘴朱顶雀（Acanthis flavirostris)雌雄亲鸟的育幼行为数据收集于1999－2001年的3个繁殖季节（5－8月）。观察使用了一个闭路电视系统,包括放在鸟巢附近5－10cm处的摄像头和35－40m外的监视器。数据分析表明：亲鸟的递食率无年间变化;雌、雄鸟递食率没有差异;总递食率不随雏鸟日龄和日间不同时段改变,但雌鸟在傍晚以前的递食率低于雄鸟并在傍晚高于雄鸟。在雏鸟6日龄前,雌鸟总递食率低于雄鸟,且二者逐步逼近,然后稳定在同一水平。此种性别差异与雌鸟在递食以外所承担的,为雏鸟保温、遮阳以及清除雏鸟粪便等事务有关。这些结果与单配制鸟类亲本投资理论一致。     

高空气球搭载实验对鸡冠花黄酮类化合物成分的影响

利用高空气球搭载了2个品种鸡冠花（Celosia cristataL.)的种子,进行空间诱变处理,飞行高度为40.112km,飞行时间近4h,回收后播种栽培,采收子一代（SP1）花序,将各组样品花序的乙醇提取物与Mg HCl,Zn HCl,1?Cl3-乙醇液,2%AlCl3-乙醇液,1%NaOH进行显色反应,呈现黄酮类化合物性质特征颜色,又以槲皮素,山柰酚,异鼠李素为对照品,采用HPLC法测定分析了各搭载组花序中黄酮醇的含是,并与地面对照组比较,结果表明,2个品种鸡冠花搭载组花序黄酮醇总量分别为0.859%,0.864%,比对照组分别提高90.04%,142.02%。高空环境诱变处理对鸡冠花花序中黄酮类化合物合成产生了显著效应。     

蛇毒神经生长因子促进周围神经再生的诱发电位观察

目的：研究蛇毒神经生长因子（sNGF)对大鼠坐骨神经损伤后诱发电位的影响,评价蛇毒神经生长因子在促进周围神经再生中的作用。方法：建立大鼠坐骨神经钳夹模型,局部滴加药物和术后肌注sNGF,通过脊髓诱发电位（SEP）,运动诱发电位（MEP）评定,观察坐骨神经修复情况。结果：sNGF治疗后可使伤后SEP,MEP提早出现,结论：蛇毒提取的NGF对大鼠坐骨神经损伤修复具有促进作用。