小鼠天然可溶性VEGF受体基因sflt-1的克隆及鉴定

 可溶性血管内皮细胞生长因子受体 (sFlt 1 )与膜表面受体Flt 1竞争结合血管内皮细胞生长因子 (VEGF) ,并且与膜表面受体Flt 1及KDR形成异源二聚体 .完全阻断VEGF的生物学活性 ,除与sFlt 1的结合部位结构域有关外 ,还与整个蛋白质分子的高效分泌表达有关 .而蛋白质分子的高效分泌表达与蛋白质在细胞内高尔基体及内质网的加工密切相关 ,基因工程重组可溶性受体由于一些尚未明了的原因 ,往往不能高效表达 ,从而大大影响了其应用价值 .利用RT PCR技术从胚胎小鼠中扩增出天然可溶性VEGF受体基因sflt 1 ,克隆于pcDNA3载体中 ,在COS 7细胞中短暂表达 ;并克隆至pET42b载体中 ,经IPTG诱导后 ,可大量稳定表达与His Tag形成的融合蛋白 ,经HisNi柱纯化 ,可特异性结合VEGF .可溶性受体sFlt 1在肿瘤组织的高效表达可有效阻断新生血管的形成 ,从而为肿瘤的治疗探索一种方法 .     

DNA芯片及其在生命科学中的应用

对DNA芯片的发生、发展、技术特点及在生命科学中的应用作了回顾,结果表明DNA芯片通过DNA或RNA样品与阵列的的杂交,可用于基因测序、基因表达、新基因的发现、突变的检测等等领域,虽然DNA芯片目前存在着不足和缺陷,但它正成为基因组和后基因组研究的重要工具.     

氟化物对酒精发酵生产的影响

ＮａＦ是ＥＭＰ途径的抑制剂,然而,目前酒精发酵生产中却用以提高出酒率,这与酒精发酵机理是矛盾的。通过实验研究,分析比较ＮａＦ对酵母菌酒精发酵,革兰氏阳性菌（乳酸杆菌）和阴性菌（醋酸杆菌）代谢活动的影响,加入ＮａＦ对发酵液中钙,镁离子浓度的改变,结果发现钙,镁离子浓度与酒精发酵密切相关,生产上,ＮａＦ之所以能改善酵母菌的酒精发酵,主要是降低了水的硬度。ＮａＦ的用量应以水的硬度而定。过量ＮａＦ对酵母菌     

Studies on the binding of pepsin with three pyrethroid insecticides by multi‐spectroscopic approaches and molecular docking

In this study, the molecular interactions between pepsin and three pyrethroid insecticides, including fenvalerate, cyhalothrin and deltamethrin, were investigated by multi‐spectroscopic and molecular docking methods under mimic physiological pH conditions. The results indicated that all of these insecticides could interact with pepsin to form insecticide–pepsin complexes. The binding constants, number of binding sites and thermodynamic parameters measured at different temperatures indicated that these three pyrethroid insecticides could spontaneously bind with pepsin mainly through electrostatic forces and hydrophobic interactions with one binding site. According to the theory of Föster's non‐radioactive energy transfer, the distance (r) between pepsin and three pyrethroid insecticides were all found to be less than 7 nm, which implied that the energy transfer occurred between pepsin and these insecticides, leading to the quenching of pepsin fluorescence. Synchronous and three‐dimensional fluorescence, CD spectra and molecular docking results indicated that all tested pyrethroid insecticides bound directly into the enzyme cavity site and the binding of insecticides into the cavity influenced the microenvironment of the pepsin activity site which resulted in the extension of peptide strands of pepsin with loss of α‐helix structures.Copyright © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.     

石刁柏及党参体细胞胚发生中的淀粉代谢动态

以石刁柏（Ａｓｐａｒａｇｕｓｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）无菌苗的嫩茎和党参（Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓｐｉｌｏｓｕｌａ）的地下嫩茎为外植体,诱导体细胞胚发生。用ＰＡＳ法研究体细胞胚发育过程中淀粉代谢的动态变化情况,实验结果表明,二种材料的体细胞胚发育中,淀粉动态情况基本相同,后期胚性细胞和器官原基分化之前出现二次淀粉积累高峰     

健康人和感染患者抗绿脓杆菌内毒素蛋白(EP)抗体水平的测定分析

用微量间接血凝法检测了健康人和绿脓杆菌感染患者血清抗EP抗体.健康人共检测154人.基础抗体水平绝大部分在1:8以下(占85.05%)EP—HA GMT为1:7.3.无性别差异(x~2=3.04、P>0.05).绿脓杆菌感染患者检测38例,免疫前GMT高于健康人1.43倍,免疫后较免疫前GMT提高4倍.绿脓杆菌EP是绿脓杆菌共同抗原,检查人抗EP抗体水平对诊断、防治绿脓杆菌感染具有重要临床意义.     

两种新紫杉烷类二萜化合物的研究

从云南红豆杉（ＴａｘｕｓｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓＣｈｅｎｇ ｅｔＬ．Ｋ．Ｆｕ）的树皮中分离鉴定了５ 种化合物。通过理化常数及ＩＲ、ＭＳ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ分析,鉴定为７－表－紫杉醇Ｂ（Ⅰ）、１,１３－二乙酰基－１０－去乙酰基巴卡亭Ⅲ（Ⅱ）、紫杉醇Ｃ－７－木糖甙（Ⅲ）、紫杉醇（Ⅳ）和３－表－熊果酸（Ⅴ）。其中,Ⅰ和Ⅱ为新化合物     

地中海拟无枝菌酸菌专一的噬菌体φMMR1的研究

从生产力复霉素ＳＶ的地中海拟无枝菌酸菌（Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ）Ｕ１１９的工业发酵罐裂解液中,分离到一株新的噬菌体φＭＭＲ。该噬菌体经多次单斑分离、纯化,得到的噬斑多数为清亮的（约占９０％）,其它噬斑为浑浊斑,但未能从中分离到溶源菌。在被测试的可能的宿主菌中,φＭＭＲ１不能感染除地中海拟无枝菌酸菌以外的菌株,说明寄主范围很窄。对φＭＭＲ１的增殖和储存条件,诸如ｐＨ值、温度、二价金属离子、有机溶剂等对φＭＭＲ１的影响进行了较详细的研究。电子显微镜观察揭示,φＭＭＲ１为长尾无收缩尾鞘,头为正多面体,属长尾噬菌体科Ｂ１亚群。制备了φＭＭＲ１的兔抗血清,并测定了φＭＭＲ１以地中海拟无枝菌酸菌Ｕ－３２为宿主菌的一步生长曲线。使用２４种限制性内切酶对φＭＭＲ１ＤＮＡ进行了单酶切分析。结果表明,φＭＭＲ１基因组ＤＮＡ为线状双链,未找到粘性末端,大小约为５９６ｋｂ。φＭＭＲ１ＤＮＡ的Ｇ＋Ｃ含量为６７％。利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析了噬菌体的外壳蛋白多肽的组成。纯化的裸露噬菌体ＤＮＡ可利用电穿孔技术成功地转染地中海拟无枝菌酸菌Ｕ－３２。     

重金属污染的转基因植物修复——原理与应用

污染环境的植物修复技术具有成本低、不造成二次污染等优点。从自然界中寻找用于污染环境修复的超富积植物不仅难度大 ,而且受生物量、生长周期以及地理环境等因素的限制。近几年迅速发展起来的通过转基因植物进行污染环境的修复技术显示了广阔的应用前景。外源基因在植物的高效表达可以提高植物吸收、运输、降解污染物的能力以及修复的效率 ,并可以作为研究不同污染物修复机理的实验系统。以转基因植物修复几种主要的重金属污染为例 ,介绍了转基因植物修复的原理、现状及存在问题 ,并探讨了提高转基因植物修复效率的一些方法 。