人血管生成素-PE40融合蛋白基因的构建、表达及活性研究

利用 PCR扩增出人血管生成素 (h ANG)成熟肽的基因片段 .与绿脓杆菌外毒素缺失突变体PE40的基因连接后 ,克隆入 p UC1 9载体中 .测序后克隆入表达载体 p RSETB,构建成 h ANG-PE40融合基因的表达载体 .IPTG诱导 ,表达出分子量约为 58k D的 His6- ANG- PE40融合蛋白 ,占菌体总蛋白的 8% .Ni2 +- NTA树脂纯化表达蛋白 ,SDS- PAGE结果显示纯化重组蛋白为单一条带 .鸡胚绒毛尿囊膜鉴定表明重组蛋白体外能够有效地抑制血管的形成 .     

肌醇磷脂激酶(PI4-K)单克隆抗体的制备及其对细胞生长的抑制

制备了抗肌醇磷脂激酶 ( PI4- K)单克隆抗体 ( A6D)并测定了抗原 -抗体反应基本特性及功能 .结果表明 ,单克隆抗体与固相及溶液中肌醇磷脂激酶的亲和常数分别为 7.5× 1 0 6和 6× 1 0 8( mol/L) -1.单抗 1 .9× 1 0 -7mol/L可以抑制从细胞提取液的 PI4- K酶活力 50 % .用 FITC标记单抗在蛋白微球引导下进入细胞内 ,主要富集在细胞质膜区 ,并对 He La细胞和小鼠小脑细胞生长有明显抑制作用 .     

一种强启动子的分离与功能

A bidirectional promoter of cotton leaf curl virus (CLCuV) was obtained from the total of DNA CLCuV infected tomato leaves by polymerase chain reaction, and the amplified DNA fragment was cloned into the vector. DNA sequences analysis and homology comparison with the promotor of four kinds of isolates recently found indicated that the cloned promoter fragment composed of 436 bp was 99.32% homolog was up to in nucleotides with that of the isolates. Transient expression vectors were constructed by fusing the promoter fragment with gus reporter gene and nopaline terminator in different orientation. These constructs were delivered into the tobacco (Nicotiana tabacum L.) and cotton ( Gossypium hirsutum L.) leaf cells for transient expression by particle bombardment. The results indicated that complementary sense promoter was a strong promoter with high activity in leaf mesophyll and vascular tissues, but virion sense promoter was weaker. The experiments suggested that isolated bidirectional promoter, as a novel strong promoter, could be used for dicots and especially cotton genetic transformation.     

破伤风毒素C部分的克隆及在大肠杆菌中的表达

用ＣＲ方法从破伤风杆菌基因组ＤＮＡ上坟增出破伤风毒素Ｃ部分（ｔｅｔａｎｕｓ ｔｏｘｉｎ ｆｒａｇｍｅｎｔ Ｃ,ＴＴＣ）,经测序其基因片段由１３５６ｂｐ组成,可编码４５１个氨基酸残基的多肽。将其插入原核表达载体ｐＥＴ－２８ａ（＋）中,并在大肠杆力ＢＬ２１９ＤＥ３）中表达,其表达量占可溶性总蛋白质的８．２％;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫印迹分析表明,ＴＴＣ基因（该基因ＧｅｎＢａｎｋ登录号为ＡＦ１５４８２）表     

人心肌肌球蛋白轻链1的克隆,表达纯化和单抗制备

报道了中国人心肌肌球蛋白轻链１ｃＤＮＡ的核苷酸序列,并由此推算的氨基酸序列。与国外发表的人心肌肌球蛋白轻链的氨基酸序列比较,发现有两处差异,即在２４位,由谷氨酸变为丙氨酸,则从９８位起至１０１位有４个氨基酸序列的连续差异,即由天冬酰胺－精氨酸－丝氨酸－赖氨酸变为赖氨酸－脯氨酸－精氨酸－谷氨酰妥,推测可能是由于人种差异而引起的。利用该ｃＤＮＡ在大肠杆菌内的表达产物,已获得一株高效的抗中国人心肌肌球蛋     

用ESR研究水合作用对RNase A分子动力学性质的影响

通过ＲＮａｓｅ Ａ的水合等温线,确定ＲＮａｓｅ Ａ吸附水时所处的相对湿度及其水合值的关系;将标记上自旋探针（马来酰亚胺氮氧自由基）的ＲＮａｓｅ Ａ溶液经透析后冷冻干燥并装入样品管后,在不同相对湿度下与水相互作用,待吸附平衡后将样品管密封测其ＥＳＲ波谱,找出谱图上的Ａｍａｘ与ＲＮａｓｅＡ水合值的关系;从而建立了含微量水的ＲＮａｓｅＡ分子运动与其水含量关系的检测方法,得到导致ＲＮａｓｅＡ分子开始运动的     

影响籼稻基因枪法遗传转化效果的几个因素的研究(简报)

基因枪转化技术在水稻的遗传转化上已被广泛地应用并获得显著的成效。与原生质体转化法相比较,基因枪法具有不受或少受基因型限制的优点且提高了转化效率,但对籼稻,仍有不少问题需要解决,转化系统尚须进一步完善。因此有必要对影响转化频率的因素进行深入的研究。我们在以barnase基因对籼稻的遗传转化以诱发工程雄性不育的研究中,特别注     

导入外源DNA小麦变异类型的光合特性研究(简报)

花粉管通道法是我国学者周光宇等在调查远缘杂交时提出的一种外源基因导入方法。本实验系用花粉管通道技术将C_4植物高粱总DNA(2D)导入C_3作物小麦甘麦8号(G8)和陇春13号(L13),结果在其后代中出现了广泛变异,并从中选育到了丰产、抗逆性强的小麦新品系89144(G8×2D)和89122(L13×2D)。连续几年的大田试验结果表明,其株形、抗锈性及经济产量显著优于其小麦亲本品种。为了进一步阐明这两个变异系光合性状优于其亲本     

基因组内碱基分布整体均衡与局部不均衡的研究进展

近年来,随着各种基因组计划的相继完成,发现在各种生物体单核苷酸链水平上存在着A≌T,G≌C的数量关系,但从几千个至十几万个碱基的范围来看,A≠T,G≠C。从数学上可以证明,如果DNA双链之间碱基的突变率一致,则A≌T,G≌C成立,但很多实验表明,双链之间的突变率并不一致,因此这个问题的解决仍有赖于数理科学和生物学的进一步结合。 Abstract:With more and more genome have been completely sequenced,scientists find the Partial Rule 2(PR2) in entire single strand that A≌T,G≌C.But from the scope of thousands to hundreds of thousand bases,A≠T,G≠C.Form the view of math,if the mutational rate of one strand is equal to others,it could be proved that A≌T,G≌C,but from the view of experience,that premise doesn't exist,so the solution of the problem needs the deeply combination of biology and math.     

新侵入害虫蔗扁蛾生活史

蔗扁蛾Opogona sacchari (Bojer)是一种新传入我国的危险性外来害虫。在温度25.71±2.71℃和相对湿度(74.95±5.02)%的条件下,完成一个世代需要66～135天,全年约可发生4代。幼虫期是历史时最长的虫态,需要37～75天,共7龄,是该虫的为害虫期。成虫的交配和产卵需要一定的空间,产卵量为253.05±65.18 (n=20) 。