Poliovirus 2A(pro) induces the nucleic translocation of poliovirus 3CD and 3C' proteins

Poliovirus genomic RNA replication, protein translation, and virion assembly are performed in the cytoplasm of host cells. However, this does not mean that there is no relationship between poliovirus infection and the cellular nucleus. In this study, recombinant fluorescence-tagged poliovirus 3CD and 3C' proteins were shown to be expressed mainly in the cytoplasm of Vero cells in the absence of other viral proteins. However, upon poliovirus infection, many of these proteins redistributed to the nucleus, as well as to the cytoplasm. A series of transfection experiments revealed that the poliovirus 2A(pro) was responsible for the same redistribution of 3CD and 3C' proteins to the nucleus. Furthermore, a mutant 2A(pro) protein lacking protease activity abrogated this effect. The poliovirus 2A(pro) protein was also found to co-localize with the Nup153 protein, a component of the nuclear pore complexes on the nuclear envelope. These data provide further evidence that there are intrinsic interactions between poliovirus proteins and the cell nucleus, despite that many processes in the poliovirus replication cycle occur in the cytoplasm.     

植物冷锻炼对于胁强敏感度的影响(英文)

前文由柑桔枝条在不同低温下、不同冷冻时间的电解质外渗测定,提出胁强(stress)、作用时间与胁变(strain)之间关系的数学模型。在这个模型中共有3个参数:屈服点温度(yield point temperature),胁强敏感度(stress sensitivity)和作用时间敏感度(sensitivity to duration),用以描述植物的抗性。抗性强的植物应表现为屈服点温度较低,胁强敏感度或者时间敏感度较低。为验证此数学模型,本工作以经冷锻炼与未经冷锻炼的盆栽柑桔枝条为材料,作不同温度与时间处理的电解质外渗率的测定,研究了冷锻炼对于上述3个参数的影响。发现胁强敏感度和屈服点温度受冷锻炼影响而下降,时间敏感度未表现明显变化。对于田间柑桔、油桐与毛竹的定期测定,在固定冷冻时间下,得到了类似于盆栽柑桔的结果。入冬时,植物抗冻性提高,3种植物都表现出下列两种变化:1.胁强敏感度的明显下降;2.屈服点温度和/或时间敏感度亦下降。开春时的变化则相反。胁强敏感度的变化与后一种变化有各自的规律,且因植物种类而不同。拐点胁强(stress at inflection point)具有与半致死温度(50％killing point temperature)不同的意义,它的变化是上述两种变化的综合结果。本试验结果表明,冷锻炼对于植物胁强敏感度有明显影响,用本数学模型的3个抗性指标描述     

雌激素对中华鳖性腺分化及DMRT1、SOX9基因表达的影响

中华鳖（Pelodiscus sinensis）性别决定的方式一直存在较大的争议,分子机制更是不清楚。在大部分脊椎动物中,雌激素在性别决定和性腺分化中扮演重要的调控作用。实验通过对性别分化前胚胎进行雌二醇（E2）和芳香化酶抑制剂（AI）处理,研究雌激素在中华鳖性腺分化中的作用及机理。实验结果显示,与对照组（雌性比例49%）相比,E2处理组中雌性中华鳖仔鳖比例显著增加,高达92.3%;而在AI处理组中,雌性比例显著下调至13.1%。HE染色分析表明,ZZ（雄性）和ZW（雌性）胚胎分别经过E2和AI处理后,ZZ和ZW性腺结构呈现明显的雌性化和雄性化特征。同时,通过RT-PCR和免疫荧光染色发现,E2能显著降低雄性性别关键因子DMRT1和SOX9 mRNA和蛋白表达水平;AI则表现相反的调节作用。综上所述,雌激素通过抑制雄性性别关键因子DMRT1和SOX9的表达来抑制雄性分化,促进雌性分化,揭示雌激素在中华鳖雌性性别分化中起着重要的调控作用。       

野生大黑蚁中抗菌肽类物质的分离纯化及其耐热性

以野生大黑蚁为原料,采用索氏抽提法除脂后,经乙醇浸提法粗提,再利用透析法分离纯化,得到对细菌具有抑制作用的抗菌肽类物质,并对该抗菌肽类物质进行氨基酸分析和耐热性检测。结果表明：分离得到的抗菌肽类物质对枯草芽胞杆菌具有抑制作用,其抑菌圈直径为24 mm;结合索氏抽提除脂,乙醇浸提和透析法所得到的粗提物氨基酸含量较高;蚂蚁抗菌肽类物质表现出较高的热稳定性,80 ℃下加热50 min后抑菌活性下降。     

川西亚高山森林林窗不同时期土壤转化酶和脲酶活性的特征

为了解川西亚高山森林林窗对不同时期土壤生态过程的影响,于2012年6月—2013年5月期间,根据温度动态过程,对比研究了生长季节(土壤完全融化期、生长季节前期和生长季节后期)与非生长季节(冻结初期、深冻期和融化期)川西亚高山粗枝云杉(Picea asperata)人工林林窗中心、林缘和林下土壤有机层和矿质土壤层转化酶和脲酶活性变化过程。结果表明:林窗不同区域中,土壤有机层转化酶活性均高于矿质土壤层;在生长季节,土壤有机层和矿质土转化酶活性表现为:林窗中心林下林缘,而脲酶活性表现为:林窗中心林缘林下。冻结初期和深冻期林窗中心土壤转化酶活性均高于林缘和林下,而在融化期林下转化酶活性高于林窗中心和林缘;冻结初期和融化期林下土壤脲酶活性显著高于林窗中心和林缘,而在深冻期林窗不同区域土壤脲酶活性没有显著差异。林窗不同区域在不同时期对土壤转化酶和脲酶活性的响应有着深刻影响。     

Neuropeptide Receptors NPR-1 and NPR-2 Regulate Caenorhabditis elegans Avoidance Response to the Plant Stress Hormone Methyl Salicylate

Alternative splicing is prevalent in plants, but little is known about its regulation in the context of developmental and signaling pathways. We describe here a new factor that influences pre-messengerRNA (mRNA) splicing and is essential for embryonic development in Arabidopsis thaliana. This factor was retrieved in a genetic screen that identified mutants impaired in expression of an alternatively spliced GFP reporter gene. In addition to the known spliceosomal component PRP8, the screen recovered Arabidopsis RTF2 (AtRTF2), a previously uncharacterized, evolutionarily conserved protein containing a replication termination factor 2 (Rtf2) domain. A homozygous null mutation in AtRTF2 is embryo lethal, indicating that AtRTF2 is an essential protein. Quantitative RT-PCR demonstrated that impaired expression of GFP in atrtf2 and prp8 mutants is due to inefficient splicing of the GFP pre-mRNA. A genome-wide analysis using RNA sequencing indicated that 13–16% of total introns are retained to a significant degree in atrtf2 mutants. Considering these results and previous suggestions that Rtf2 represents an ubiquitin-related domain, we discuss the possible role of AtRTF2 in ubiquitin-based regulation of pre-mRNA splicing.     

抗人肝癌单抗片段抗体HAb18F(ab')_2的冻干工艺研究

选择适合于HAb18F(ab')2片段抗体的冻干保护剂及其冻干工艺,是确保该生物制品的质量关键之一,对不同种类和不同浓度的保护剂进行了研究,结果表明10%蔗糖对HAb18F(ab')2片段抗体冻干样品的剂型、外观、残水量(<3%)、复溶时间(<10s)、纯度(>95%)及稳定性没有影响。研究优化与保护剂相结合的适用于HAb18F(ab')2片段抗体的最佳冻干工艺,为抗体片段扩大生产提供依据。     

骨髓间充质干细胞移植对急性肝功能衰竭大鼠肝组织miRNA-155和TNF-α表达的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对急性肝功能衰竭（ALF）大鼠肝组织中miRNA-155和TNF-α表达的影响,以及与BMSCs疗效间的关系。方法将SD大鼠随机分为健康对照组、ALF组、BMSCs治疗组和BMSCs预防组,其中ALF组予以900 mg/kg D-GalN＋10μg/kg脂多糖腹腔注射建立模型;BMSCs治疗组在900 mg/kg D-GalN＋10μg/kg脂多糖腹腔注射后2 h,予以尾静脉注射BMSCs 5.0×10^6;BMSCs预防组在900 mg/kg D-GalN＋10μg/kg脂多糖腹腔注射前予以尾静脉注射BMSCs 5.0×10^6;健康对照组予以0.9﹪氯化钠溶液1 ml腹腔注射。给药7 h后每组处死大鼠,检测大鼠血清ALT和AST,ELISA法检测TNF-α水平,实时定量PCR检测肝组织miRNA-155、TNF-αmRNA。各组间肝功指标差异采用方差分析,同时观察每组大鼠的24 h生存率,并用卡方检验比较各组生存率的差异。结果 D-GalN/脂多糖诱导7 h后,与ALF组相比,BMSCs预防和BMSCs治疗组大鼠ALT、AST、TNF-α水平均有所降低（P〈0.01）;同时两组肝组织TNF-αmRNA和miRNA-155表达水平均有下调（P〈0.01）;但两组间相比较差异无统计学意义。ALF组大鼠肝组织miRNA-155上调和TNF-αmRNA诱导呈正相关（r=0.734,P=0.001）。BMSCs预防组和BMSCs治疗组miRNA-155和TNF-αmRNA的部分逆转亦呈正相关（r值分别为0.687和0.590,P值分别为0.004和0.006）。给药后24 h,健康对照组、ALF组、BMSCs治疗组和BMSCs预防组大鼠死亡率组间比较差异有统计学意义（c2=19.078,P〈0.01）。结论在BMSCs干预大鼠ALF发病过程中,可以部分逆转上调的肝组织miRNA-155和TNF-α,且存在协同性,提示BMSCs治疗ALF可能通过对肝组织miRNA-155和TNF-α的调控发生作用。