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11.
12.
Single-stranded oligonucleotide primers can be efficiently removed after PCR using E.coli exonuclease VII. Even only a few molecules of double stranded PCR product are unaffected by a treatment which eliminates 20 picomoles of primer in the presence of 500 ng of denatured genomic DNA. Exonuclease VII treatment is rapid and could simplify complicated multistep PCR protocols. 相似文献
13.
本研究工作中,建立了一个有效的甜菜坏死黄脉病毒的分离提纯程序,解决了该病毒粒体易于聚集难以提纯的问题,其操作要点是,(1)通过Sepharose 2B柱层析代替超离心,有效地除去一些小分子量核酸杂质;(2)经PEG再次沉淀浓缩后,调整pH至酸牲(pH3.0),使病毒充分悬浮以减少凝聚;(3)在病毒等电点(pH4.8~4.9)条件下,进一步沉淀以纯化病毒。根据病毒提取物的OD260/OD280比值,算出核酸含量约4.5%。核酸电泳出现4条带,分子量分别为:2.25×10~(?),1.8×10~(?),1.05×10~(?),0.75×10~(?)道尔顿。病毒提取物经超速离心出现4个界面,沉淀系数分别为,200.8S,165S,125.8S,100S。说明甜菜坏死黄脉病毒可能是4组分病毒粒体。病毒粒体含一蛋白亚基,分子量约为2.05±0.05×10~4道尔顿,由16种共199个氨基酸组成。 相似文献
14.
Preparation of [B23-D-alanine]des-(B25-B30)-hexapeptide-insulin by a combination of enzymic and non-enzymic synthesis.
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Des-(B25-B30)-hexapeptide-insulin with B23-glycine replaced by D-alanine was prepared by a combination of enzymic and non-enzymic syntheses. The purified product was homogeneous in polyacrylamide-gel electrophoresis and could be crystallized. The biological activity in vivo of crystalline [B23-D-Ala]des-(B25-B30)-hexapeptide-insulin was determined as 58% of that of standard pig insulin (27 i.u./mg). 相似文献
15.
16.
厚朴类有效成分的含量测定及高效液相色谱图 总被引:9,自引:0,他引:9
用高效液相色谱法对我国木兰科植物“厚朴类”中的酚类和季胺碱类作了定性和定量分析,并提供色谱图,结果表明不同产地的“厚朴”,图谱相同,仅含量有差别,但不同种的“厚朴”,色谱图不同.此结果可作为评价“厚朴类“药材质量和鉴别的方法.根据各类厚朴有效成分的存在,有一定的规律,为木兰科植物化学分类提供了有价值的资料。 相似文献
17.
质粒YRP7用氯霉素法扩增,碱变性裂解法提取,酸酚法及核糖核酸酶纯化后,得到了高产量(5.6mg/L培养液),高纯度(A260:A280=2.0)的质粒制品,经转化实验及酶切分析确定YRP7具有下列特征:大小为5.41±0.10kb,可赋予宿主细胞AmP~r、Tet~r的表型,对大肠杆菌C600的转化频率为10~(-6)、转化效率为1.5×10~6转化子/mgDNA。限制性内切酶BamH Ⅰ、ECoRⅠ、Hind Ⅲ及PstⅠ在其分子上的切点数分别为1、2、2、2,并确定了各酶切片段的分子大小,对BanHⅠ的单切点,经插入失活法证实其位于Tet~r的基因上。由上述特征可确定,质粒YRP7是一个比较理想的克隆载体。 相似文献
18.
19.
The infectivities of Steinernema carpocapsae, S. glaseri, S. scapterisci, and Heterorhabditis bacteriophora to Japanese beetle larvae, Popillia japonica, and house cricket adults, Acheta domesticus, were compared using external exposure and hemocoelic injection. Only H. bacteriophora and S. glaseri caused high P. japonica mortality after external exposure. When nematodes were injected, P. japonica had a strong encapsulation and melanization response to all species except S. glaseri. Heterorhabditis bacteriophora and S. carpocapsae were able to overcome the immune response, but S. scapterisci was not. All species except S. scapterisci were able to kill and reproduce within the host. Only S. scapterisci and S. carpocapsae caused A. domesticus mortality after external exposure. When nematodes were injected, A. domesticus had a strong immune response to all species except S. scapterisci. Steinernema carpocapsae effectively overcame the strong immune response and caused high host mortality, but S. glaseri and H. bacteriophora did not. Steinernema scapterisci caused high host mortality and reproduced, S. glaseri and H. bacteriophora caused low host mortality but only S. glaseri reproduced, and S. carpocapsae was able to kill the host but reproduced poorly. Most (ca. 90%) of the S. carpocapsae in the hemocoel of P. japonica became encapsulated and melanized within 8 hours postinjection. The symbiotic bacterium, Xenorhabduf nematophilus, was often released before this encapsulation and melanization. 相似文献
20.
小麦体细胞胚发生的超微结构研究 总被引:24,自引:0,他引:24
对小麦(Triticum aestivum L.)幼胚培养中体细胞胚发生过程的超微结构变化进行了研究,结果如下:(1)原体细胞中大液泡消失,存在大量小液泡,细胞质的电子密度加强,核大,核仁明显,出现多核仁;(2)细胞器数量和种类,如质体、核糖体和线粒体增加;(3)细胞壁加厚,胞间连丝逐渐消失,细胞器数量丰富,胚性细胞中积累淀粉;(4)细胞壁加厚的胚性细胞中存在核仁液泡、自体吞噬泡和分泌泡;(5)多细胞原胚、球形胚和梨形胚被一层外壁包围,但胚体内细胞间广泛存在胞间连丝;(6)成熟胚生长点部位的细胞内质体中出现膜系结构,已向叶绿体转变,类囊体已形成 相似文献