产γ-谷氨基甲酰胺合成酶菌株的筛选及产酶条件研究

以假单胞菌(Pseudomonas sp.)为出发菌株,通过紫外诱变筛选得到一株γ-谷氨基甲酰胺合成酶高产菌株UV-19,其酶活提高32.54%。以突变株UV-19为供试菌株,对γ-谷氨基甲酰胺合成酶的发酵条件进行优化。首先利用Plackett-Burman设计筛选出影响较大的4个因素:葡萄糖、蛋白胨、起始pH值、装液量。在此基础上再利用CCD响应面分析法进行优化,得到最佳产酶培养条件为(g/L):葡萄糖15、蛋白胨12、NaCl 5.0、MgSO4.7H2O 0.2、K2HPO4.3H2O 0.5、甲胺盐酸盐1.0g/L、起始pH值6.5、装液量72mL/250mL。该优化条件下进行产酶培养,假单胞菌发酵产γ-谷氨基甲酰胺合成酶酶活力可达32.68U/mL。     

POSSUM、P-POSSUM和APACHE-Ⅱ评分对肝门部胆管癌手术后住院死亡风险评估的对比研究

目的：通过利用POSSUM、P-POSSUM和APACHE-Ⅱ评分对我院行手术治疗的肝门部胆管癌病例的术后住院死亡率的预测进行预测,评价各评分的预测能力,为肝门部胆管癌术后死亡风险寻求有效的评估方法。方法：收集了2002年1月～2007年12月期间在东方肝胆外科医院接受手术治疗的348例肝门部胆管癌的病例资料,统计其手术后的住院死亡率;统计学方法：所有的数据通过SPSS15.0 for windows、Medcalc9.2.10 for windows进行分析处理,计量资料经t检验、计数资料以x2检验和Z检验,P〈0.05为有统计学意义;O：E值和ROC曲线用来评价评分方法的判别能力。结果：348例患者的术后有6例发生住院期间死亡,死亡率为1.7%,POSSUM评分预测的住院死亡率为9.3%（33例）,两者之间的差异有统计学意义（x2=19.80,df=1,P〈0.01）;P-POSSUM评分预测的住院死亡率2.8%（10例）,两者之间的差异无统计学意义（x2=1.02,df=1,P〉0.05）;APACHE-Ⅱ评分预测的住院死亡率9.2%（32例）,两者之间的差异有统计学意义（x2=18.82,df=1,P〈0.01）。POSSUM、P-POSSUM和APACHE-Ⅱ评分对应的ROC曲线下面积分别为0.759、0741和0.608。结论：P-POSSUM评分能很好的预测肝门部胆管癌手术的术后住院死亡率,POSSUM和APACHE-Ⅱ评分不能准确的预测,明显高估了术后死亡风险。     

国产房缺封堵器治疗多孔型房缺

目的：评估国产封堵器治疗多孔型房缺的可行性及安全性。方法：在X线及超声引导下对19例多孔型房缺植入国产房缺封堵器,术后常规进行心电图及经胸心脏超声随访半年。结果：所有患者均成功进行了房缺封堵,其中5例放置1枚国产普通型房缺封堵器,7例放置2枚国产普通型房缺封堵器,另7例则分别放置1枚细腰大边型房缺封堵器,术后即刻超声检查1例仍有少许分流,术后1月时随访分流消失,所有患者随访半年未出现明显并发症。结论：国产房缺封堵器可安全应用于多孔型房缺患者的封堵治疗,在经验丰富的先心病介入治疗专科中心,封堵治疗可做为部分多孔型房缺患者的首选治疗。     

早期负性经历的表观遗传学研究进展

表观遗传学（epigenetics）是指不涉及DNA序列改变、可以通过有丝分裂和减数分裂进行遗传的基因表达变化的遗传学分支领域。目前研究主要集中在DNA甲基化、组蛋白密码、染色质重塑和非编码RNA调控等方面。早期负性经历是指个体出生早年所经历的不良生活事件,还包括个体出生前所经历的负性生活事件。大量研究表明早期负性经历对个体成年后的行为会造成明显影响。本文将综述早期负性经历中表观遗传的各种机制。     

浅全麻下拔除气管导管在临床中的应用

目的:探讨丙泊酚与瑞芬太尼持续泵注浅全麻状态下拔除气管导管在临床中的应用效果.方法:选择ASAI-Ⅱ级择期行开腹胆囊切除手术全麻患者200例,随机分为对照组和试验组,各100例.对照组术毕符合拔管条件时拔除气管导管,试验组手术结束时持续泵注丙泊酚瑞芬太尼维持病人于浅麻醉状态,待患者自主呼吸恢复,潮气量达6～8ml/kg,呼吸频率大于12次/min,脱氧10minSpO2在95％以上,PetCO2在正常范围,停止输注丙泊酚和瑞芬太尼,拔除气管导管.记录两组患者手术结束时、拔管时、拔管后1min、3min、5min各时点的平均动脉压(MAP)、心率(HR)及术后患者恢复情况.结果:组内比较,与T1时刻比较,试验组T2、T3、T4时刻的MAP、HR差异无统计学意义;对照组T2、T3、T4时刻的MAP、HR高于T1时刻(P＜0.05).组间比较,T1时刻两组比较差异无统计学意义,T2、T3、T4时刻的MAP、HR对照组高于试验组(P＜0.05).试验组不良记忆的发生例数少于对照组(P＜0.05).两组患者SpO2＜96％的发生例数、自主呼吸恢复时间、拔管时间比较差异无统计学意义.结论:丙泊酚与瑞芬太尼持续泵注浅全麻状态下拔除气管导管,患者血流动力学平稳,无不良记忆.     

国产房缺封堵器治疗多孔型房缺

目的:评估国产封堵器治疗多孔型房缺的可行性及安全性。方法:在X线及超声引导下对19例多孔型房缺植入国产房缺封堵器,术后常规进行心电图及经胸心脏超声随访半年。结果:所有患者均成功进行了房缺封堵,其中5例放置1枚国产普通型房缺封堵器,7例放置2枚国产普通型房缺封堵器,另7例则分别放置1枚细腰大边型房缺封堵器,术后即刻超声检查1例仍有少许分流,术后1月时随访分流消失,所有患者随访半年未出现明显并发症。结论:国产房缺封堵器可安全应用于多孔型房缺患者的封堵治疗,在经验丰富的先心病介入治疗专科中心,封堵治疗可做为部分多孔型房缺患者的首选治疗。     

重组鼠疫菌F1抗原的纯化及其在ELISA检测鼠疫免疫中的应用

从表达rF1抗原的大肠杆菌中以Superdex-200凝胶过滤层析纯化rF1抗原,电泳扫描显示纯化率>90%。SDS-PAGE及琼脂免疫双扩散结果显示纯化的rF1抗原具天然F1抗原的活性。将此纯化的rF1抗原用于间接ELISA分析免疫动物血清中抗F1抗体的水平,并与天然F1抗原相比较,证明rF1抗原优于天然F1抗原分析结果,可用于鼠疫的血清学检测。     

益生菌及其细胞组分的免疫调节作用

益生菌对肠道黏膜系统的调节作用是应用益生菌提高宿主抵抗某些病源菌感染及预防肿瘤发生的基础。但是,益生菌的作用机理目前还不完全清楚。益生菌细胞壁组分可能是引发免疫反应的功能性物质,而构成各种益生菌细胞壁组分的差异可能是益生菌免疫调节作用存在菌种特异性的主要原因。肠道派伊尔斑外层的M细胞是介导益生菌或其细胞组分进入上皮下层的主要通道,进入上皮下层的益生菌或其细胞残片可以被黏膜免疫系统的树突状细胞(DC)或巨噬细胞吞噬,并呈递给淋巴细胞。益生菌及其细胞组分在黏膜局部刺激黏膜免疫系统,也可以引起系统免疫反应,但其通过局部免疫刺激引起系统免疫反应的机理目前还不清楚。研究益生菌细胞组分构成和益生菌免疫激活作用之间的关系,及由局部免疫刺激引发系统免疫反应的机理是益生菌免疫刺激作用机理研究需要解决的两大问题。     

Novel potent agonist [(pF)Phe4,Aib7,Aib11,Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2 and antagonist [Nphe1,(pF)Phe4,Aib7,Aib11,Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2 of nociceptin/orphanin FQ receptor

Two novel ligands for the nociceptin/orphanin FQ (N/OFQ) receptor (NOP), [(pF)Phe4,Aib7, Aib11,Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2 (peptide-1) and [Nphe1,(pF)Phe4,Aib7,Aib11,Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2 (peptide-2), have been generated by combining different modifications of N/OFQ sequence. In the present study, we investigated the actions of two analogues and compared them with those of N/OFQ in four assays. Peptide-1 mimicked N/OFQ effects in mouse vas deferens and mouse colon and showed similar maximal effects but higher potency relative to N/OFQ. The effects of peptide-1 were sensitive to NOP receptor selective antagonist ([Nphe1]N/OFQ(1-13)-NH2) but not to naloxone in vitro. Peptide-1 (25 pmol, i.c.v.) mimicked the pronociceptive action of N/OFQ (2.5 nmol, i.c.v.) in mouse tail withdrawal assay, displaying higher potency and longer lasting effects. In anesthetized rats, peptide-1 (1 nmol/kg, i.v.) produced a marked decrease in mean arterial pressure, which was comparable to that evoked by i.v. N/OFQ (100 nmol/kg). Peptide-2 did not produce any effect per se but antagonized N/OFQ actions in mouse vas deferens and mouse colon assays. Peptide-2 is active in vivo where it prevented the pronociceptive effect induced by 2.5 nmol N/OFQ i.c.v. in the mouse tail withdrawal assay. Furthermore, peptide-2 at 5 nmol produced alone a robust and long lasting antinociceptive effect. Moreover, peptide-2 (10 and 40 nmol/kg i.v.) didn't produce any effect per se but antagonized hypotensive actions produced by i.v. administration of N/OFQ. Collectively, these findings demonstrate that [(pF)Phe4,Aib7,Aib11, Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2 behaves as a highly potent NOP receptor agonist which produces long lasting effects in vivo and [Nphe1,(pF)Phe4,Aib7,Aib11,Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2 acts as a pure and competitive antagonist of the NOP receptor.     

本氏针茅根际土提取物对本氏针茅及其优势种种子萌发的影响

以本氏针茅及其优势种大针茅和百里香种子为受体,采用生物检测的方法研究了0(对照)、0.1、0.2和0.5g/mL本氏针茅根际土甲醇浸提液和水浸提液对3种受体种子萌发的影响,以探究草地演替过程中物种间的生态关系和化感作用的表现形式。结果显示:(1)甲醇浸提液对3种受体种子的发芽均有抑制作用;水浸提液对本氏针茅发芽有促进作用,对百里香有部分促进作用,而对大针茅有抑制作用。(2)甲醇浸提液对本氏针茅和大针茅胚根和胚芽生长无显著影响,而抑制百里香胚根和胚芽的生长;水浸提液对本氏针茅胚根生长无显著影响,对本氏针茅胚芽生长具有显著促进作用,而对其它两种受体胚根和胚芽均无显著影响。(3)各种浓度甲醇浸提液对大针茅和百里香生长表现出了化感综合抑制效应,对本氏针茅生长于0.2g/mL时表现出化感综合抑制效应,其它2种浓度(0.1、0.5g/mL)表现为化感综合促进效应;水浸提液对本氏针茅和百里香表现为化感综合促进效应,而对大针茅表现为化感综合抑制效应。研究表明,本氏针茅根际土甲醇浸提液和水浸提液的化感物质存在差异;不同受体对同一浸提液反应不同,同一受体对不同浸提液的反应也不同。