DNA错配修复蛋白MutS和MutL的相互作用研究

MutL 和 MutS 是DNA错配修复系统中起关键作用的修复蛋白. 利用基因融合技术高效表达了MutL 和 MutS融合蛋白,并利用它们发展了一种研究二者相互作用的简便方法. 融合蛋白MutL-GFP (Trx-His6-GFP-(Ser-Gly)6-MutL),MutL-Strep tagⅡ (Trx-His6-(Ser-Gly)6-Strep tagⅡ-(Ser-Gly)6-MutL) 和 MutS (Trx-His6-(Ser-Gly)6-MutS) 被构建并在大肠杆菌中高效表达. 收集菌体细胞、超声波破碎后离心取上清进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 分析,结果表明有与预期分子质量相应的诱导表达条带出现,其表达量约占全细胞蛋白的30％且以可溶形式存在. 利用固定化金属离子配体亲和层析柱分别纯化融合蛋白,其纯度达到90％. 通过将MutS蛋白固定的方法研究两种MutL融合蛋白分别与MutS之间的相互作用. 结果表明：只有MutS蛋白与含有错配碱基DNA分子结合后才与MutL蛋白发生相互作用. 通过检测MutL融合蛋白标记的绿色荧光信号或酶学显色信号来鉴定相互作用的发生. 建立的融合分子系统方法也为研究其他的蛋白质或生物大分子之间的相互作用提供了一个技术平台.     

中国植物区系新资料

在对中国科学院西双版纳热带植物园标本馆植物标本的鉴定清理工作中,发现中国新记录植物2种,兹报道如下,供有关部门和研究者参考。     

利用GUS基因瞬时表达探索佛手叶盘基因枪转化参数

佛手是芳香科枸橼类植物,有很好的药用和观赏价值,但其品种较为单一,对其进行遗传改良和品种选育显得十分必要.为了将基因枪转化方法应用于佛手的遗传改良和品种选育,本实验以GUS基因为报告基因,利用基因枪方法将其转入金华佛手外植体内,通过检测GUS基因在佛手叶盘中的瞬时表达情况,分析了外植体的幼嫩程度、射程、氦气压力、真空度、轰击次数等参数对GUS瞬时表达的影响,并研究了最佳检测时间.结果表明,以幼叶为受体,在射程为6 cm、氦气压力为7.584×106Pa,真空度为88.046 kPa条件下,2 d后可检测出GUS基因的最佳表达活性.轰击次数多少对GUS基因瞬时表达影响不明显.     

鹅观草属三个物种及其居群间的醇溶蛋白分析

利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(APAGE)对小麦族鹅观草属3个物种:毛叶鹅观草、纤毛鹅观草和竖立鹅观草进行了醇溶蛋白电泳分析,23份材料电泳分离出22条相对迁移率不同的谱带,其中3条(16.6%)共同带,19条(83.4%)具多态性,每个材料可分离出9～16条谱带。结果表明:(1)三个物种具有相似的醇溶蛋白带型,但存在明显的种间差异;(2)同种不同居群间也存在遗传差异;(3)种间差异大于种内差异。     

塔里木河流域下游植物区系及生态学研究

塔里木河流域下游地区植物有30科80属122种。以双子叶植物类群占优势,其中多年生草本植物在塔里木河流域下游植物中占多数。显示了物种形成是年轻的进化类型。生态类型以旱生植物为主。占总种数的52％,这足长期适应比较干旱的自然环境的结果。该区系的温带成分占优势。地中海成分也占有一定地位。这些区系成分的植物都是干旱区荒漠植物的代表。区系地理反映了物种演化过程的历史气候、地质变化动态。查清塔里木河流域下游植物资源的数量和分布区的变迁,为该地区的植物资源保护提供科学依据。     

中国齿隐翅虫属斑齿隐翅虫亚属(鞘翅目,隐翅虫科,筒隐翅虫亚科)分类学研究

齿隐翅虫属Priochirus种类多见于腐木树皮下,是重要的腐木甲虫.其中斑齿隐翅虫亚属的物种比较稀少,目前全世界仅记录3种.本文记述产于我国云南的齿隐翅虫属斑齿隐翅虫亚属1新种,硕斑齿隐翅虫Priochirus(Stigma-tochirus)magnificus sp.nov,及1新纪录种,阿斑齿隐翅虫Priochirus(Stigmatochirus)abori Bernhauer.文中物种检索表包括了世界现有的3种及新种共4个种.所有标本材料(包括所有模式标本)都保存在中国科学院动物研究所.     

胡杨、灰叶胡杨开花生物学特性研究

从居群水平研究了胡杨、灰叶胡杨不同居群的开花物候特征.结果表明:胡杨、灰叶胡杨各居群均表现为雄株开花物候早于雌株,一般可授期开始较散粉期晚1～4 d,结束较散粉期晚2～5 d,并且居群散粉期和可授期的重叠期较长.在同一居群内,胡杨、灰叶胡杨同性单株间开花期的不一致性较高.两个种相比较,胡杨居群的开花进程比灰叶胡杨居群早2～5 d,并且从每日开花株数累积分布来看,胡杨散粉期、可授期为双峰型,灰叶胡杨为单峰型.     

东北老工业基地煤炭矿区环境问题与生态对策

在对我国东北老工业基地煤炭矿区环境问题进行分析的基础上,提出了解决该地区煤炭矿区环境问题的生态对策,包括着重强调煤炭矿区的生态可持续发展对于采矿工业的复兴具有重要推进作用,而澳大利亚关于最佳实践的经验对于今后采煤矿区的发展具有重要借鉴意义。推行生态多元综合治理的土地复垦一修复模式是今后煤炭矿区环境保护的方向。     

综合性ICU铜绿假单胞菌医院内感染临床及药敏分析

目的 探讨综合性ICU铜绿假单胞菌（PA）引发的医院内感染临床及其药敏特点。方法 对温州医学院附属第一医院ICU 1997～2002年铜绿假单胞菌医院感染进行回顾性分析.用16种常用抗生素进行体外药敏试验,采用Kirby-Bauer纸片扩散法按NCCLS标准进行。结果 根据感染部位,PA引发的感染常见于下呼吸道（87.64%）、尿路（7.87%）及皮肤（4.49%）。患者基础疾患包括神经系统疾病（43.82%）,COPD（12.36%）,各种恶性肿瘤（8.99%）,以及各种创伤和大手术后等。体外药物敏感率从高到低依次为头孢哌酮-舒巴坦（84.85%）,头孢他啶（80%）,妥布霉素（78.46%）,庆大霉素（67.5%）,亚胺培南（56.72%）,奈替米星（55.74%）,培氟沙星（45.33%）,替卡西林（38.60%）,其它头孢3代的敏感率均较低。结论 综合性ICU内PA引起的机会感染率高,在临床上应在药敏指导下用药,经验性治疗则优先考虑选用头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶、氨基糖甙类和亚胺培南等敏感性较高的抗生素,同时注意防止是交叉感染,积极治疗原发病。     

耐甲氧西林葡萄球菌3种检测方法的实验比较及临床应用

目的 通过对200株临床分离的葡萄球菌耐苯唑西林的检测,比较3种表型检测法的阳性率并对其临床实用性进行评价。方法 采用美国NCCLS 2004年制订的头孢西丁-纸片扩散法、VITEK32微生物鉴定仪检测及苯唑西林盐琼脂法测试mecA介导的葡萄球菌耐药。结果 200株被检测的葡萄球菌中,头孢西丁-纸片扩散法检出耐苯唑西林的阳性率为68％（136／200）;苯唑西林盐琼脂法的阳性率为67．5％（135／200）;VITEK32仪的阳性率为68．5％（137／200）;且耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的耐药率（86．2％）高于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（26．23％）。3种检测方法结果经χ^2检测差异无显著性。结论 3种方法操作都简便,但各有优缺点,VITEK32仪器检测葡萄球菌耐笨唑西林费用高,一般小型医院不具备条件;盐琼脂筛选法判读直观,但要掌握好孵育时间;NCCLS2004版的纸片扩散法较经济实用,不仅可检测被检菌是否耐笨唑西林,同时还可获得大环内酯-林可霉素-链阳霉素（MLSB）结果,但是当头孢西丁的判断折点在临界时应当复检,建议与盐琼脂筛选法同步检测。